史冒亟墼匿里！Ｑ堕至！旦盟堑鲞墨！塑４１・急性百草枯中毒大鼠肺组织中基质金属蛋白酶及其组织抑制剂表达变化的研究佟飞，［摘要］田英平，石汉文，姚冬奇，霍书花，苏建玲，扈琳，陈慧目的观察急性百苹枯中毒大鼠肺组织中基质垒属蛋白酶（ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９）７｝－－其组织抑制因子１（Ｔ１ＭＰ一１）的袁选变化，探计其在百草枯（Ｉ】Ｑ）所致肺损伤中的作用。方法舳只ｓＤ大鼠，随机分为染毒组和对照组。对照组用生理盐水灌胃；染毒组用ＰＱ按５０ｚｒ４ｒ／ｋｇ灌胃染毒；分别于灌药后１、３、７、１４、２１、２８、３５ｄ观察两组肺组织病理变化，同时采用ＲＴ—ＰｃＲ检测肺组织ＭＭＰ一２ｍＲＮＡ、ＭＭＰ一９ｍＲＮＡ及ＴＩＭＰ—ＩｍＲＮＡ的表达。结果与对照组相比，染毒组走鼠肺组织中ＭＭＰ一２ｍＲＮＡ的表达从ｌｄ就明显增强，７ｄ达高峰，此后开始缓慢下降，１４ｄ至２８ｄ仍高于对照组，３５ｄ与对照组相比无统计学差异；ＭＭＰ一９ｎｆｉ），ＮＡ的表速１ｄ至７ｄ高于对照组，１４ｄ降至对照蛆水平；而ＴＩＭＰ一１ｎ扛州Ａ的表达从１ｄ开始增强，１４ｄ达高峰，以后维持在高水平．至３５ｄ仍明显高于对照组。结论ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９厦ＴＩＭＰ一１在ＰＱ中毒大鼠肺损伤中起重要的调节作用，大鼠肺纤维化与ＭＭＰｓ／ＴＩＭＰ比例的失衡有关。［关键词］中毒；百草枯；基质金属蛋白酶；肺损伤５９５４［中图分类号］ＲＳｔｕｄｙｏｌｌ［文献标识码］Ａ【文章编号］１００２—１９４９（２００６）０１—００４１—０３ｔｈｅｅｘｐｒｅ商ｏｎｏｆｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓａｎｄｉｔｓｆｉＳ目．１ｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｉｎｈ嗥ｄⅫ０ｆｒａｔｓｗｉｔｈａｃｕｔｅｐａｒａ叩ｍｔｐｏｉⅫＩｊＩ唱ＴＯＮＧｊＨ，ＴＩＡＮＹｉｎｇ一面昭，ＳｉｌｌＨａｎ—ｍ．ｅｔｍ０１ＤｅｐａｒｔｍｅｍｏｆＥｍｅｒｇｅｎｃｙ，ｔｈｅＳｅｃｏｎｄ舶”蒯ｏｆＨｅｂｅｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｗ．ｒｓｉｔｙ－踬曲出”昭０５００００．Ｃｈｉｎａ［Ａｂｓｔｒａｃｔ】ＯｂｊｅｃｔｉｖｅｗｉｔｈａｃｕｔｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｅｆｆｅｃｔｏｆｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａＲｅｓ８０ＳＤｗｍｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏａｎｄｉｔｓｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｉｎｌｕｎｇｉｎｊｕｒｙｏｆｐｏｉⅢ）ｎｅｄｇｒｏｕｐｒａｔｓｐａｒａｑｕａｔｐｏｉｓｏｎｉｎｇ．Ｍｅｔｈｏｄｓｃｏｎｔｒｏｌ口岬ａｎｄＡｔｌ．３，７，１４，２１，２８［荩金项日］河北省卫牛厅资助项日（Ｎｏ０５２３０）［作者单位Ｊ｜｝，ｑＪＬ医科人学第二医院急诊科，河北石家庄０５００００『作者简介］佟Ｅ（１９６９５），女，副主仟区师，副教授，硕｝生导师。主要研究方向：急性中毒的救治。动物的组织灌注压，一方面可能使肠上皮缺血得到改善，氧供增加，毛细血管通透性降低，肠上皮细胞间隙水肿减轻，使ＬＰＳ发生移位的机会减少；另一方面，可能使肝血流也增加，网状内皮系统功能恢复，增强ｒ肝脏对ＴＰｓ的解毒作用？同时，氧疗本身町以缓解休克动物的酸中毒．恢复细胞功能，使ＭＯＤＳ的发生。（本文承蒙西南医院中・心实验室郝江主任的悉心指导特此致谢！）参考文献１董燕，王仙园，周娟，等氧疗别高海拔地医失血性休克救治作用黏膜【：皮细胞因无氧代谢和酸中毒而受损的程度减轻，从而也有利于维护肠道的屏障功能，减少细菌及ＬＰＳ移位人血，使炎症反应细胞活化减少。另外，有的学者认为，在无内毒素出现时，氧自由基可增加在体细胞因子表达，这一效应通过ＮＦ—ｌ出激活实现。ＮＦ一的研究［Ｊ］．护理学杂志，２１１０４，１９（ｔ６）：３—５２ＤｅｉｔｅｈＥＡ．Ｍｕｌｔｉｐｌｅｏｉ＇《ｌｉｌｆａｉｌｕｒｅ：ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙａ玎ｄｐｏｔｅｎｔｉａｌｆｕｔｕｒｅｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ］ＡｎｎＳｔｔｒｇ，１９９２，２１６（２）：１１７—１３４３ＳｕｋｈｏｍｉｋｔｈｅｒａｐｙｉｎＩ，ＫｒａｕｓｚＭＭ，ＢｒｏｄｏｆＶ，ｄｄＤｉｖｅｒｇｅｎｔｅｆｆｅｃｔｓｏｆｑ＊ｎ出在氧自由基刺激几分钟就可被激活，启动１啊’一ａ、ＩＬ一１Ｂ和ＩＬ一６的转录；而ＩＬ一１和ＴＮＦ—ａ本身也可激活ＮＦ一加，从而构成一个前炎性介质的正反馈环，介导炎症介质反应的瀑布效应５．６。我们的实验也观察到，动物体内氧自由基代谢产物ＭＤＡ的变化趋势同血浆ＬＰＳ水平和ＩＬ一６ｎｄ孙ｌＡ表达变化相似．研究表明，血清或血浆中的丌，一６浓度可敏感地反映小组织损伤的程度＿７Ｊ。这提示，在缺血缺氧一再灌注过程中，原发的缺血缺氧、氧自由基生成及肠源性细菌／ＬＰＳ可能均参与了体内炎性介质表达的介导，引起一系列的炎性损伤．，氧疔后南于血液中物理溶解氧的增加能够唤醒因缺血缺氧而顿抑的组织细胞和恢复线粒体呼吸链功能，使组织供能增加和内源性ＳＯＤ生成增加，提高ｒ机体对氧自由基的清除能力‘…。而且，氧疗还可以有利于增加组织灌注压，降低肠道受损程度，减少肠源性细菌／ＬＰＳ移位人血，使炎症细胞因子的表达降低，这将有助于控制ＳＩＲＳ的发生发展，从而减少７５ｈｍｒ嘣讨ｄｓｍｌｍｎｔａａ３１１ｅｄｈｅｎ瑚Ｔ｝ｌａ西ｃｓ｝１０ｃｋ【Ｊ】Ｓｑｗｃｋ，２００２，１８（３）：２７７—２８４４ＡｋｉｒａＴ，ＳｔｃｐｈａｎｂｒｅａｔｈｉｎｇｉｎａＰ，ＳａｍｕｅｌＡ，ｅｔ耐Ｅｆｆ戕．ｔｓｏｆｉｎｃ麒ａｓｅｄｏｘｙｇｅｎｒｍｓｖｏｋｕｎｃｃｍａｔｒｏｌｌｅｄｈａ邶Ｉｒ｜Ｌ呼ｃｓｈｏｃｋｏｕｔｃｏｍｅｍｏｄｅｌｉｎｌＪＪＲ删ｍ－ｉｔａｆｉｒｍ．２０ｌｅｏ．４５（３）：２０９—２２０ＭＤ．Ｍｏｐ，ｒｅＥＥ．ＭＳｃｈｗｕｒｌｚｃ…ＦＡｅｔ“Ｎｕｃ］ｅｍｆａｃｔｗ—ＫＢｉｓａｃｔｉｖａｔｅｄｉｎ柏Ｔ。出Ⅱｍａｃｍｐｈａｇｅｓｆｒｏｍｐｕｔｉｅｎｔ＊ｗｉｆｌ，Ⅲ１ｌｋ”铡”ｌ址‘町ｄｉｓｔ—ｓｙｎｄｒｃｍｅ…“ｔ６ＣａｒｅＭ“，１９９６，２４（８ｊ：１２８５一１２９２ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒＫＢｉｎｃｙｔｏｋｉｎｅＢｌａｃｋｗｅｌｌＴＳ．ＣｈｒｉｓｔｍａｎＪＷＴｈｅｗｌｅｏｆｇｅｎｅｍｇｕｌａｆｉｏｎ［Ｊ］ＡｍＪＲｅ卿ｒＣｅｌｌＭｅｌＢｉｄ，１９９７，１７（１Ｊ：３—９Ｐｑ”Ｈｎ（ｊｉ…ｍ［ｕ帅ｌｌｌｌｔＭ，上ｔｉｍＪ，ｄａ／Ｍａｉｏｒ溉ｘｍｄａｒｙＪｓｕｒｇｅｒｙｉｎ］！ｌｔｍｔｃｌｉｎｉｃａｌｔｅｌ㈣ｏｆ９８９—１０００．ｐａｌｉｅｎｔｓａⅢ１Ｉｍｒｉｎｌｍｒａｔｉｗｂｉｏｃｈｅｒｒｆｉｃａｌｃｙｔｏｋｉｎｅｌｉｂｅｍｔｋｍ：ｄ出ｍｉｒＨｎｌ加ｄｔｈｅｍ破吣ｌＪＪＴ…，２００１，５０（¨：８练庆林，胡长虹．陈涛大鼠急性氧中毒时肺内氧自由基含量的变化［Ｊ］中华航海医学朵志，１９９８．５（１）：４５—４８收稿日期：２００５—０９１２］［本文编辑：曹丽萍万方数据 ４２ＣｈｉｎＪＣＪｉｔ鱼堕坐Ｌ地！Ｑ逝．些Ｉ堑．№．１ａｎｄ．３５ｄａｙｓａｆｔｅｒｅｘｐｏｓｍ＇ｅ，ｔｅｎｍｒｓｏｔｅａｃｈｇｒｏｕｐ，ｗｅｌＰｕｓｅｄｗｅｒｅ１０ａｓｓｅｓｓｌｕｎｇｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｔ＂ＭＭＰ一２ｍＲＮＡ，ＭＭＰＲｅｓｕｌｔｓＣｏｍｐａｒｅｄ一９ｍＲＮＡａｎｄ３１ＭＰ—ｌｍＲＮＡｉｎｌｕｎｇｓｍＲＮＡｉｎｌｕｎｇｒｅｔｕｒｎｅｄｔｏｎｓｓｕｅｅｖａｌｕａｔｅｄｂｙＲＴ—ＰＣＲａｔｗｉｔｈｃｏｎｔｒｅｌｇｒｏｕｐ．ｔｈｃｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＭＭＰ一２ｄａｙ，ｄｅｃｒｅａｓｅｄｓｌｏｗｌｙａｆｔｅｒｗａｉｄｓ，ａｎｄｂａｓｅ］Ｊｎｅａｔ山ｅ１４ｔｈｄａｙ．Ｅｘｐｌ－盼ｓｉｏ．ｒｅｌａｔｉｖｅｌｙｈｉｇｈｌｅｖｅｌｓＩｌｐｗｉｔｈａｃｕｔｅｔｏｏｆｐｏｉｓｏｎｅｄｇｍ）ｔｔｐＫ＿【ｒｍ＇ｋｅｄｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄａｔｔｈｅｎｏｍＭｌｅｖｅｌ３５山ｄａｙ．ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＭＭＰ一９删Ａａｎｔｈｅｆｉｒｓｔｄａｙ，ｒｏａｃｈｅｄｆｉｌｅｐｅａｋａｔ山ｅ７ｔ｝ｌｒｏｓｅｆｒｏｍｌｔｏ７ｄａｙ，ｒｅｔｍａｌｅｄｔｏａｔｏｆⅡＭＰ—ｌｎ１Ｉｌ—Ａｍａｒｋｅｄｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄ乱ｔｈｅｆｉｒｓｔｄａｙ，ｒｅａｃｈｅｄｔｈｅｐｅａｋｄａｙＣｏｎｄｕｓｉｍａＭＭＰ一２．ＭＭｔ’一９ａｎｄＴＩＭＰ—ｌｐｌａｙｔｈｅ１４ｔｈｄａｙ，ａｎｄｋｅｐｔｌｕｒｌｇａｆｔｈｅ３５ｔｈｉｍｐｏｒｔａｎｔｍｌｅｉｎｉｎｊｕｒｙ－ｏｆｒａｔｓｐａｒａｑｕａｔｐｏｉｓｏｎｉｎｇ．’ｌｌａｅｄｅｖｅｌｏ阻ｌｔｅｎｔｏｆ‘吡ｋｍｆ】ａｒｖｌｌｂｍｓｉｓｉｓｃｌｏｓｅｌｖ商ａｔｅｄｔｏｔｈｅｉｍｂａｌｍｍｅｏｆＭＭＰｓ／ⅡＭＰ．［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］Ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ；Ｐａｍｑｕａｔ；Ｍａｌｌ＠ｍｅｔａＵｏｐｍｔｅｉｔｍｓｅ；Ｐｕｈｎｏｎａｒｙｉｎｊｕｒｙ百草枯（ｐａｒａｑｕａｔ，Ｐｏ）属有机杂环娄除草剂，目前在世界范围内广泛使用。它对人和动物的毒性很高，其病死牢可达８０％以上。，ＰＱ中毒可引起多脏器拟害，肺是ｐＱ作片ｊ的主要靶器官，中、重度巾毒如能度过急性期，以后则出现不可逆肺纤维化，后期多死于肺功能衰竭“。但日前ＰＱ诱导肺组织损伤机制尚不完全清楚。绑胞外基质（ＥＣＭ）合成和降解失衡足引起细胞基质积聚导致肺间质纤维化的重要病理生理因素．而基质金属蛋白酶（ＭＭＰｓ）及其组织抑制物（ＴＩＭＰｓ）是凋节细胞基质降解的重要酶体系。但其在ＰＱ中毒所致且ｌ｜ｊ损伤中的表达变化在国内外还鲜有报道。本研究通过观察肺组织中幕质金属蛋白酶２，９（ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９）及基质金属蛋白酶组织抑制因子１（’Ｉ＇ＩＭＰ一１）基凶表达的变化，探讨它｛ｌｌｇＬ，Ｐｏ中毒发病过程中的作用。１材料与方法１１实验材料殷试剂清沽级成年ｓＤ大鼠８０只（雌雄各半），体质量１８０，２００ｇ，由河北医科大学动物巾心提供。２０％百革枯溶液购自萸国捷利康有限公司。ＲＮＡ提取试剂’Ｉ＇ｒｉｚｏｌＲｅａｇｅｎｔ购自Ｉｍｉｔｍｇｅｎ公司。逆转录酶、核糖核酸酶抑制剂、‘Ｎｍ、’ｌ＇ａｑＤＮＡ聚合酶、随机引物（Ｒａｎｄｏｍｐｒｉｍｅｒｓ）和琼脂糖（ａｇａ㈨ｅ）均购自美国ＰｍｌＩｒｅｇａ公司。１．２动物分组及模型制备选择８０只ｓＤ大鼠，分为对照绢和染毒组。其中对照组１０只，用１ｍＬ生珲盐水一次性灌胃；染毒组７０只，将Ｐｏ按５０ｍｇ／ｋｇ用生理盐水稀释到１ｍ１．一次性灌胃染毒。分别于灌药后第１、３、７、１４、２１、２８、３５ｄ取１０只大鼠，麻醉下解剖大鼠留取肺组织标本。一部分用于ＲＴ—ｗＲ检测，另一部分用于病理学观察。１３ＭＭＰ一２ｍＲＮＡ、ＭＭＰ一９ｒｒｄ｛ＮＡ及７ＦＩＭＰ—ＩｍＲＮＡ的盯一ＰＣＲ检测按照Ｉｎｖｉｔｒｏｇ．，ｎ公司生产的试剂盒说明，提取肺组参｛总ＲＮＡ，进行ＲＴ—ＰＣＲ检测。ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９、ＴＩＭＰ一１及０一ａｃｔｉｎ引物由｝一海生工生物工程技术服务有限公司台成。其中ＭＭＰ一２引物序列为：上游引物：５’一（：ｔ瑚ｗｌｗＭｌｕ：ｃ（—Ｗ：ＡＣ一３’，下游引物：５’一ＣＧＡＴＣＣＣＡ３ＥＡＡＡＧＡＣＡＡｆｆ；一３’．扩增产物大小为ｚＯＯ岫。ＭＭＰ一９卜游引物：５‘一Ｃ４７，ＴＩｑ℃ＴＧＴＣＣＡＧＡＣＣＡＡＧＧ一３７，Ｐ游引物：５’一７ＩＵＣＡＡＧＧＡＴＩ＇ＧＴＣＡＴＣＩＧＧＡ一３’，扩增产物大小为４３５ｈｐ。。Ｉ＇ＩＭＰ一１上游引物：５’一ＴＣＣＣＣＡＧＡＭ盯ＣＡＴＣＧＡＧＡＣ一３７，Ｆ游引物：５’一ＡＴＧＣ，Ｃ１１；ＡＡＣＡＧＧＧＡＡＡ（＇ＡＣ一３’，扩增产物大小为３２９ｂｐ。ＰＣＲ反应参数：９４℃５ｎｄｎ．然后９４“Ｃ４５ｓ，５５Ｔ：４５ｓ，７２℃４５ｓ（３５个循环），７２ｃｃ延伸５ｎｌｉｎ。同时扩增鼠日一ａｃｔｉｎ用作内参照，其卜游引物：５’一ＧＣＣ＿４ＩＧＴＡＣＧＴＡＧＣＣＡＴＣ（■一３’，下游引物：５’一ＧＡＩＡＧＣＣＧｒＦＡＣＴＣＧＣＣ＆＾Ｇ一３’，：‘增产物大小为３７４ｈｐ。取ＲＩ＂一ＰＣＲ产物４止，加１ｊ样缓冲液１血，在１５％琼脂糖凝胶万 方数据卜电泳，８０ｖ，４５ｎｎ，用Ｌ肿凝胶图像成像系统拍摄打印实验结果，用凝胶图像分析系统（Ｇｅｌ—ＰｒｏＡｎａｌｙｚｅｒＶｅｒｓｉｏｎ３．ｏ）分析结果。以ＭＭＰ一２／口一ａｃｔｉｎ７１１ＭＰ一１／口一ａｅｔｉｎ，ＭＭＰ一９／ｐ—ａｅｔｉｎ的比值５Ｊ＇男ｌｌ表示ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９，耵ＭＰ一１的相对表达水平。实验重复三次二１４统计学处理实验数据以均值±标准差（。±ｓ）表示．采用ＳＰ＆Ｓ１１．０统计软件进行ｔ检验，统计结果以Ｐ＜０．０５表示差异有显著性。２结果２Ｉ急性百草枯中毒』＝鼠肺组织病理学变化对照组光镜下观察可见肺泡结构清晰，肺泡罐薄．肺泡隔无增宽及充血，无炎性细胞浸剩及出血现象，町见少许纤维组织。染毒组于染毒后ｌｄ可见肺泡壁毛细血仟扩张、淤『【Ｉｌ，气管及血管周崮有不Ｉ卅程度的水肿，肺内小灶状或大片状炎性细胞浸润；３ｄ后肺问质和肺泡水肿达高峰，部分肺泡腔充满粉染均质水肿液，部分有透明膜形成，弥漫性肺出血．肺泡脏塌陷，肺泡腔内有游离的中性粒细胞和巨噬细胞；７ｄ时肺泡塌陷明显，可以见到成纤维细胞；１４、２８ｄ出现部分肺泡间隔纤维性增厚，可见胶愿纤维增生。３５ｄ可见到大量成纤维细胞融合，胞枝溶解或｝ｉ『ｉ失．纤维化形成，偶可见玻璃样变。２．２大鼠肺组织ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９及ＴＩＭＰ一１的ｍＲＮＡ动态变化对燎组大鼠肺组织中即有少量ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９及ＴＩＭＰ一１ｎ删Ａ的表达。染毒组大鼠肿组织中ＭＭＰ一２ｕ出，ＮＡ的表达从Ｉｄ就明显增强（Ｐ＜００１）；７ｄ达高峰，相对表选量为埘ｊｌ｝ｆ组的２．４倍；ＩＥ后开始缓慢下降，１４ｄ至２８ｄ仍明显强于对照组（Ｐ＜００１）；３５ｄ与对照组相比无统计学差异（Ｐ＞００５），见图１。ＭＭＰ一９ｍＰＯＩＡ的表达１ｄ开始增强（Ｐ＜０．（】５）；３ｄ即达高峰，为对照组的１．９倍；７ｄ时仍高于对照组（Ｐ（００５）；１４ｄ及以后与对麒组相比无统计学意义（Ｐ＞０．０５），见图２。而‘Ｉ＇ＩＭＰ一１ｍＲＮＡ的表达从Ｉｄ就咀显增强（Ｐ＜０．０５）；１４ｄ达高峰，为对照组的２８倍（Ｐ＜０．０１）；以后维持住高水平，军３５ｄ仍明显高于Ｘ，ＩＮ组（Ｐ＜Ｏ０１），见图３。图１大鼠肺组织ＭＭＰ一２ｍＲＮＡ的表逃Ｍ：标准相对分子质量；Ｎ：对照组；１～７：染毒组第１。３．７，】４２１．２８．３５天堂国急煎壁堂型墅§生！旦笠堑鲞筮１魍图２大鼠帅组织ＭＭＰ一９ｎｌｌＩＮ４的表达Ｍ：标准相对分子质量；Ｎ：对照组；１～７：染毒组第１，３，７。１４图３大鼠肺组织ＴＩＭＰ—ｌｍ卧Ａ的表达Ｍ：标准相对分了质量；Ｎ：对照组；ｌ～７：染毒组第ｌ，３．７．１４２１，２ｌＩ，３５天３讨论百草枯（ＰＱ），又名克芜踪，化学名称为１，Ｉ’二甲幕一４，４’一联吡啶二氯化物，属有机杂环类除草剂一随着其在我同农业上的广泛应用，ＰＱ中毒也口趋增多．．ＰＱ中毒可引起多脏器损害，肺足其作用的主要靶器官，表现为急性肺泡炎和迅速进展的肺问质纤维化，是ＰＯ中击死『。的主要原因。奉研究通过大鼠ＰＱ灌胃制做动物染毒模型，观察肺组织病理形态学，结皋表明，该模型早期ｎｒ见肺泡壁毛细『ｉ【Ｌ管扩张、淤血，气管技血管周围组织水肿．肺内炎性细胞浸润，随后可见肺泡塌陷；１４—２８ｄ出现部分且ｉ｜ｉ泡『日Ｊ隔纤维性增厚，胶原纤维增生；３５ｄ可见到大Ｉ黾成纤维细胞融台，胞梭溶解或消失，纤维化形成。经过了肺组织水肿、肺泡炎、问质增生和肺纤维化等几个阶段，与文献乜一报道一致。ＰＯ中毒引起的肺损伤与自南基有关，进入肺内的Ｐ。经由ＮＡＩ）ＰＨ辅助的单电子还原为臼由基，然后冉与分子氧形成阳离子及超氧阴离子，经超氧化物歧化酶歧化形成过氧化氧，进一步形成毒性更高的羟自由基，诱导脂质过氧化反应，导致肺组织氧化性毒性损害“。但ＰＱ中毒引起的肿纤维化机制目前还不清楚。Ｍａｎｏｕｏ等。…报道，肺纤维化的形成与自由基及基质金属蛋白酶有密切天系。肺纤维化的过程是一个非常复杂的过程，细胞基质台成和降解过程调控着细胞基质的量。正常情况下，肺内胶原的合成与降解处于平衡状态，如果肺内细胞基质的合成增加，或降解减少，都能引起细胞基质积聚，进而导致肺纤维化形成【４一。对肺纤维化发生发展的研究，长期以来人们比较注重丁胶原合成的研究，而胶原的降解在肺纤维化的启动及其进展中的作用研究极少。目前，已知能够降解胶原的酶主要为万 方数据ＭＭＰｓ。ＭＭＰｓ是一组锌、钙离子依赖性的内肽晦家族，在结构上具有极大『司源性．根据底物的不同分为问质胶原酶、明胶酶、间质溶解素和膜型ＭＭＰ。ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９属于明胶酶，能通过分解Ⅳ型腔原蛋白及糖蛋白成分，肺基质成分降新；７ｌＩＭＰ—ｌ则是它们特异性的抑制剂。本实验结果显示．在ＰＱ中毒早期，ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９及ＴＩＭＰ—Ｉ呈同步性升高．肺组织病变仅以炎性损伤为主；ＰＱ中毒后期，ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９与ＴＩＭＰ一１呈非同步变化，ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９逐渐下降，而’ｌＩＭＰ一１仍持续升高，肿组织则…现纤维化病灶。其机制可能是：ＰＱ巾毒首先引发炎症，肺泡内皮、上皮细胞受损，大量炎性细胞包括中性粒细胞、单桉巨噬细胞、淋巴细胞晕璺，进人肺泡腔，释放一系列细胞因子和炎症介质，促进ＭＭＰ。台成与活化…，从而导致该期内卿一２、ＭＭＰ一９及ＴｍＰ１表达增高，在这一阶段ＭＭＰｓ主要起溶解、破坏基膜驶缃施基质的作用。由于ＭＭＰｓ／ＴＩＳｍＰ—ｌ比例仍能维持平衡，必此炎症早期来ｆＩｊ现卸』胞基质聚积。随着肺组织炎症反地逐渐减弱，ＭｌｖｌＰｓ产生与活化逐渐减少，｛！＿ｌＴＩＭＰ一１表达仍持续书‘高，可能引发了ＭＭＰｓ／ＴＩＭＰ～ｌ比例失衡，由于＇ｌＩＭＰ一！钾制ｒＭＭＰｓ对细胞基质的降解，导致细胞基质积聚．肺纤维化形成。Ｐａｒｄｏ等…１发现：早期，ＭＭＰｓ和盯ＭＰ表达增高．后期ＭＭＰｓ表达减少而１．ＩＭＰ表达增高。另外Ｍｏｒｉｍｎ，・等”出认为，大鼠肺纤维化与ＭＭＰｓ／ＩｌＭＰ比例的失衡有兑、所以，虽然目前ＰＱ中毒所致肺纤维化的成因仍未完令明确，也九特效治疗方法，但ＭＭＰｓ／ＴＩＭＰ比例的失衡町能是促进疾病进展的囊要田素，明确ＭＭＰｓ及ＴＩＭＰ基因表达调控机制并予以干预，使ＭＭＰｓ／ＴＩＭＰ比例保持在平衡状态，可能是治疗Ｐ。中毒的新途释之一：参考文献１鼬㈣ＩⅣＤＪ，Ｃｈ《ｓｅＣＣ．Ｅｎｇｅｌｂ删ｈｌＦＭＥｑ瑚Ⅱ㈣同ｐ８哪ｊｕⅢｐｏｉｓｏｎｉｎｇｈｉｓｔｏｌ雌ｌｃＨｌ，ｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｒｒｏｓｃｏｐｉｃ目ｍｍｌ【ｔⅡⅫ１Ｉｑ哪…Ｐｃｈｓｌｌ紫ｓｉｎｔｈｅｌｉｉｌｌｇＬＪ］ＳＡｆｒＭｅｄＪ，１９８４．６６（１３）：４８５—４８９ＳｕｎｔｍＺＥＲｏｌｅｏｆｍｌｔｉｏｘｉｄａｎｔｓｉｎｐａｒａｑａ］ａｔｔｏｘｌｃｉｌｙ［ＪＪＴｏｘｉｃｏｌｏｇ）２【】【１２，１８０（１）：６５—７７Ｍ＜ｑｎｏｍｙＢ，ＮｅｎａｎＳ．Ｌ“ｅｍＯ．ｅ／ｎｆＴｈｅａｌＭｎ㈣ｏｆ…ｔｉ…㈣¨ｓｐｅｃｉｅｓｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｐｍｌ∽ｔｓｍｉｃｅａｇａｉｎｓｔｂｉｅｏｍｙｃｉｎ—ｉｎｄｍ－Ｈｊ¨ｌｌｒｍｍ盯ｖｆｉｂｒｏｓｉｓ［ＪＪＲ雌ｐｉｒＲｅｓ，２００５，６（１）：１ｌ—１９ＨａｙｏｓｈｉＴ，Ｓｉｅｌｌｃ￡ＳｔｅｒｎａＷＧ．ｂｌｎｌｌｉｒｉｇＩｉＷ．ｅｌａ／ｈｎｎ．础目ｊ１（ｍｄｓｔｕｄｙｏｆｍｅｔａｌｌｏｐｍｉｅｉｌ㈣ｍⅡｌｉｈｅｉｒｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｌｏｒｓｉｎｔｈｅｌＩⅡ１目ｔｄＩ”ｎⅫｗｉｔｈｄｉｆｆｕｓｅ司删引ｋⅡ‘嶝。ｄｉｄｉｃｔｘａｔｈｉｃｍｌｌＩｌｍ唧６ＬＨ俅ｉ。Ｊ。如ＪＰｓｆｌｍｌ，１９９６，１４９：１２４ｌ１２５６Ｉ叫｝ｐａｈｄｎｅｎＵ，ＷｈｉｔｓｅｔｔＪＡ．ＷｅｒｌＳＥ。ｅｌ删Ｉｍｅｒｌｅｏｋｉｎ—ｌｂｅｌａｃ…ｐｕｌｍｑＬａｗｉｍｉｌａｉｌｍｌａｌｉｍ：，ｅｍｐｈｙ孵ｍａ．叩ｄａｉｒｗａｙｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇｉｎ｝ｈＰａｄｕｈｍｕｒｉｎｅｌｍｌｇ【Ｊ］ＡｍＪＣｅｌｌＭｏｌｐａｒｄｏ“ｎｆａｎｄＩ“ｘＪＪｉ剐ｃ…ｆＴＩＭＰ一１．ＴＩＭＰ一２．ＭＭＰ—１３、ＭＭＰ一２．ａｉｒ｛Ａ．ｈｎ＊Ｒ胁Ｊ．ＳｅｇｕｒａＲ唧ＪｒＢｉｄ，２００５，３２（４）：３ＩＩ一３１８Ｖａｌ如ｚＬ．Ｅｘｐ—ｉｏｎｂｆＭ／’９ｉｎｃａｒｌｙ蛐ｄａ由ａｒＩｃ剐８ｑ”ｒ…“ｆⅦｇｓｉｌｉｃｏｓｉｓＣＪ】＾ｎｎ～’ＡｃａｄＳｃｉ，１９９９．８７８：５８７—５８９ＭｏｒｉｍｏｔｏＹ，Ｋｉｍ１４，ｍ．山Ｔ，ｅｔⅡｆＥｆｆｅｃ’ｏｆ１０ｎｇ一【岍¨ｉｎｈａｌａｔｉｃａｌｏｆＩＩ｝ｎｅＦｏｒ】ｅｘｔｍｅｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘｉｎｔｈｅｌｕｎｇｓｏｆＩ＞ａｌｓｉｎｖｉｖｏ【ＪｌＩｎｈａｌｌｈｌ‘ｄ．２００５．１７（３）：１５３１５９．收稿１３期：２００５—０８—３０］ｆ本文编辑首丽稍‘ｊ２３４５６７
