(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 110564714 A(43)申请公布日 2019.12.13
(21)申请号 201910689210.9(22)申请日 2019.07.29
(71)申请人 广州市仟壹生物技术有限公司
地址 510000 广东省广州市海珠区荔福路
68号六楼(72)发明人 林沐春 蓝德安
(74)专利代理机构 广州市越秀区哲力专利商标
事务所(普通合伙) 44288
代理人 李悦(51)Int.Cl.
C12N 9/96(2006.01)C12N 9/62(2006.01)C12N 9/76(2006.01)C12N 9/50(2006.01)A23K 10/14(2016.01)
权利要求书1页 说明书7页
C11B 3/00(2006.01)
(54)发明名称
一种动物油脂酶解组合物及其酶解方法与应用(57)摘要
本发明公开了一种动物油脂酶解组合物，由
0.1-5按重量份的以下组分制成：1-20份蛋白酶、
份磷酸氢二钠、0.1-5份磷酸二氢钠和0.1-5份的柠檬酸钠。该动物油脂酶解组合物对动物油脂水解具有较快的速率、受金属离子或pH值变化影响小，酶解时间短、得到的油脂不易乳化，油脂收率高。本发明还提供了基于该动物油脂酶解组合物对动物脂肪组织进行酶解的方法，方法加热时长短、能耗低，油脂得率高、油脂品质高。
CN 110564714 ACN 110564714 A
权 利 要 求 书
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1.一种动物油脂酶解组合物，其特征在于，由按重量份的以下组分制成：1-20份蛋白酶、0.1-5份磷酸氢二钠、0.1-5份磷酸二氢钠和0.1-5份的柠檬酸钠。
2.如权利要求1所述的动物油脂酶解组合物，其特征在于，所述磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和柠檬酸钠的重量比为(1-2)：1：(0.8-1.2)。
3.如权利要求1所述的动物油脂酶解组合物，其特征在于，所述蛋白酶为木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胰蛋白酶或米曲蛋白酶是的一种或两种以上。
4.如权利要求1所述的动物油脂酶解组合物，其特征在于，还包括0.1-0.5份EDTA-二钠。
5.如权利要求1所述的动物油脂酶解组合物，其特征在于，所述动物油脂酶解组合物加水制成2-4wt％的溶液，以1-3wt％的用量添加于动物脂肪组织。
6.一种动物油脂的酶解方法，其特征在于，包括以下步骤：前处理：将动物脂肪组织去杂、洗净，搅碎，投入反应釜；加料：向反应釜加入动物油脂酶解组合物和水，搅拌均匀；所述动物脂肪组织为鸡脂肪组织、猪脂肪组织、牛脂肪组织和羊脂肪组织中的一种或两种以上；
所述动物油脂酶解组合物由按重量份的以下组分制成：1-20份蛋白酶、0.1-5份磷酸氢二钠、0.1-5份磷酸二氢钠和0.1-5份的柠檬酸钠；
酶解：于50-68℃酶解，升温至90-100℃灭酶；分离：静置1-8h后，以3000-5000r/min离心，得到动物油脂。7.如权利要求6所述的酶解方法，其特征在于，加料步骤中，向含有每10000重量份的动物脂肪组织的反应釜中加入3-5重量份的动物油脂酶解组合物和100-300份的水。
8.如权利要求6所述的酶解方法，其特征在于，酶解步骤中，于58℃酶解20min。9.如权利要求6所述的酶解方法，其特征在于，分离步骤中，静置2-4h，于3500-4500r/min离心，得到动物油脂。
10.一种如权利要求6-9任一项所述的酶解方法在制备饲料中的应用。
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说 明 书
一种动物油脂酶解组合物及其酶解方法与应用
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技术领域
[0001]本发明涉及畜牧加工技术领域，具体涉及动物油脂酶解组合物及其酶解方法与应用。
背景技术
[0002]与中国饮食习惯相对应地，中国的畜牧、禽类养殖业高度发达。以动物脂肪生产的食用动物油脂在食品行业占有重要作用。
[0003]目前市场上的食用动物油脂以高压蒸煮法(0.1-0.2MPa)和高温炸干法(121-128℃)为主。高压蒸煮法容易导致油脂中的营养物质分解、油脂降解等问题，且会有少量油脂残留于块状板油中未提取完全。高温炸干法同样会导致营养物质分解，且能耗高、风味焦苦、带有因高温而导致的对人体有害的物质，烹调范围比较受限。最终产品的酸价和过氧化值也较高，油脂的感官评价结果不理想。[0004]利用酶使脂肪细胞破碎，释放出脂肪颗粒及其它水溶性物质，形成水相和油相并分离，是目前正在发展的一种温和条件下提炼动物油脂的方法。使用到的酶通常为蛋白酶，因为细胞膜的主要成分是蛋白质(42％)和脂质(50％)，蛋白酶能有效酶解细胞膜结构上的蛋白质结构，破坏脂肪细胞的细胞膜，让油脂自动析出，无需借助外力(高温、高压)或只需要借助极少外力便可高效提取出脂肪细胞中的油脂。[0005]然而，通常在蛋白酶解法制备动物油脂的过程中，由于蛋白酶受高油脂含量、蛋白质水解成蛋白质分子和多肽时会造成的体系乳化等问题，将导致蛋白酶在酶解一段时间后活性大幅度降低，从而造成酶解速率大幅度下降，收率较低。发明内容
[0006]为了克服现有技术的不足，本发明的目的之一在于一种蛋白酶不易失活、酶解效率高的动物油脂酶解组合物。
[0007]本发明的目的之二在于提供一种蛋白酶不易失活、酶解效率高的食用动物油脂的酶解方法。
[0008]本发明的目的之三在于提供该动物油脂酶解组合物的应用。[0009]本发明的目的之一采用如下技术方案实现：[0010]一种动物油脂酶解组合物，由按重量份的以下组分制成：1-20份蛋白酶、 0.1-5份磷酸氢二钠、0.1-5份磷酸二氢钠和0.1-5份的柠檬酸钠。
[0011]该动物油脂酶解组合物能有效地避免酶解蛋白质过程中，体系处于稳定的 pH值范围、有效减少酶解过程中，动物脂肪组织酶解后带来的金属离子带来的酶的失活影响。[0012]较优选地，该动物油脂酶解组合物由按重量份的以下组分制成：2-5份蛋白酶、0.3-1份磷酸氢二钠、0.3-1份磷酸二氢钠和0.3-1份的柠檬酸钠。[0013]进一步地，所述磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和柠檬酸钠的重量比为(1-2)：1：(0.8-1.2)。即该动物油脂酶解组合物可以保持酶解体系pH值处于7.0-8.0的区间，并能有效避免
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金属离子对酶的影响。[0014]进一步地，所述蛋白酶为木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胰蛋白酶或米曲蛋白酶是的一种或两种以上。较优地，蛋白酶为木瓜蛋白酶和胰蛋白酶或米曲蛋白酶的组合。[0015]进一步地，还包括0.1-0.5份EDTA-二钠，以更加强该动物油脂酶解组合物对金属离子的耐受性。
[0016]进一步地，所述动物油脂酶解组合物加水制成2-4wt％的溶液，以1-3wt％的用量添加于动物脂肪组织。该动物油脂酶解组合物可快速酶解呈立体结构的蛋白质，当细胞膜的蛋白质水解开链形成小分子蛋白质或多肽时，酶解速率过低有可能造成脂肪的分离提取困难，该动物油脂酶解组合物可有效避免油脂乳化，从而有利于油脂的分离。[0017]本发明的目的之二采用如下技术方案实现：[0018]一种动物油脂的酶解方法，包括以下步骤：[0019]前处理：将动物脂肪组织去杂、洗净，搅碎，投入反应釜；[0020]加料：向反应釜加入动物油脂酶解组合物和水，搅拌均匀；[0021]所述动物油脂酶解组合物由按重量份的以下组分制成：1-20份蛋白酶、0.1-5 份磷酸氢二钠、0.1-5份磷酸二氢钠和0.1-5份的柠檬酸钠；[0022]酶解：于50-68℃酶解，升温至90-100℃灭酶；[0023]分离：静置1-8h后，以3000-5000r/min离心，得到动物油脂。[0024]该酶解方法酶不易失活、酶解速率快，可快速地获得动物脂肪，有效地减少了动物油脂的乳化，易于分离得到动物油脂，同时得到的动物油脂具有较佳的风味，酸价和过氧化值指标低，油脂出品品质高。
[0025]所述动物脂肪组织为鸡脂肪组织、猪脂肪组织、牛脂肪组织和羊脂肪组织中的一种或两种以上。
[0026]进一步地，加料步骤中，向含有每10000重量份的动物脂肪组织的反应釜中加入3-5重量份的动物油脂酶解组合物和100-300份的水。[0027]进一步地，酶解步骤中，于58℃酶解20min。该温度下，蛋白酶的酶解活性较高，酶不易受毒害，酶解速率高，有效避免油脂乳化，收率较高。[0028]进一步地，分离步骤中，静置2-4h，于3500-4500r/min离心，得到动物油脂。采用静置分离的过程，使油脂和蛋白质进行沉降分离，减少相互间的静电、分子间作用力以破乳，再通过离心的方式，最终分离得到动物油脂。[0029]相比现有技术，本发明的有益效果在于：[0030]本发明提供了一种酶不易失活、酶解速率快、油脂收率高的动物油脂酶解组合物，该动物油脂酶解组合物对pH值和金属离子具有较好的耐受性，酶解过程对动物油脂的品质无损坏、可得到较佳品质的动物油脂；
[0031]该动物油脂酶解组合物对动物脂肪组织进行酶解的用量少、酶解效率高，酶解后，易从动物油脂中分离，对最终产品的品质无不利影响，得到的动物脂肪可以通过食品安全检验，可应用于制备动物饲料、化工工业原料中。[0032]本发明提供的酶解方法，酶解速率快，收率高，可得到较佳品质的动物油脂。
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具体实施方式[0033]下面，结合具体实施方式，对本发明做进一步描述，需要说明的是，在不相冲突的前提下，以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。[0034]以下是本发明具体的实施例，在下述实施例中所采用的原材料、设备等除特殊限定外均可以通过购买方式获得。
[0035]本发明提供一种动物油脂酶解组合物，由按重量份的以下组分制成：1-20 份蛋白酶、0.1-5份磷酸氢二钠、0.1-5份磷酸二氢钠和0.1-5份的柠檬酸钠。[0036]该动物油脂酶解组合物中，在酶解动物脂肪组织时，可有效维持体系的pH 值，同时能有效酶解过程中，金属离子对酶的影响。该动物油脂酶解组合物中，磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和柠檬酸钠形成缓冲液，磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和柠檬酸钠的重量比为(1-2)：1：(0.8-1.2)，以使在酶解过程中，体系的pH 稳定在7.0-8.0之间。从而使蛋白酶的活性维持在最佳的状态。本发明体系对因脂肪组织酶解后产生油脂过程中的金属离子对酶的活性影响也具有较佳的耐受性。
[0037]以下具体实施方式中，所使用的磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和柠檬酸钠可使用其结晶水状态的试剂，磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和柠檬酸钠基于不含结晶水的有效成分进行计重的。本发明中，动物油脂酶解组合物较优地，由2-5份蛋白酶、0.3-2份磷酸氢二钠、0.3-2份磷酸二氢钠和0.3-2份的柠檬酸钠，与水配成 2-3wt％的溶液，以2-2.5wt％的用量添加于动物脂肪组织。更优地，该动物油脂酶解组合物由2份蛋白酶、0.3-1份磷酸氢二钠、0.3-1份磷酸二氢钠和0.3-1份柠檬酸钠组成，或再进一步地，包括0.1-0.2份EDTA-二钠。[0038]本发明提供一种动物油脂的酶解方法，包括以下步骤：[0039]前处理：将动物脂肪组织去杂、洗净，搅碎，投入反应釜；[0040]加料：向反应釜加入动物油脂酶解组合物和水，搅拌均匀；[0041]所述动物脂肪组织为鸡脂肪组织、猪脂肪组织、牛脂肪组织和羊脂肪组织中的一种或两种以上；
[0042]所述动物油脂酶解组合物由按重量份的以下组分制成：1-20份蛋白酶、0.1-5 份磷酸氢二钠、0.1-5份磷酸二氢钠和0.1-5份的柠檬酸钠；[0043]酶解：于50-68℃酶解，升温至90-100℃灭酶；[0044]分离：静置1-8h后，以3000-5000r/min离心，得到动物油脂。[0045]该酶解方法的速率快、得率高，过程中加热时间短，能耗低，得到的油脂中气味清香，口感清甜无涩味，可用于食品加工等行业。[0046]该酶解方法可用于制备饲料中。[0047]实施例1：
[0048]一种动物油脂酶解组合物由按重量份的以下组分制成：2份胰蛋白酶、1份磷酸氢二钠、1份磷酸二氢钠和1份的柠檬酸钠。[0049]实施例2：
[0050]一种动物油脂酶解组合物由按重量份的以下组分制成：20份木瓜蛋白酶、5 份磷酸氢二钠、5份磷酸二氢钠和5份的柠檬酸钠。[0051]实施例3：
[0052]一种动物油脂酶解组合物由按重量份的以下组分制成：2份木瓜蛋白酶、0.3 份磷
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酸氢二钠、0.3份磷酸二氢钠和0.3份的柠檬酸钠。[0053]实施例4：
[0054]一种动物油脂酶解组合物由按重量份的以下组分制成：5份米曲蛋白酶、0.8 份磷酸氢二钠、0.8份磷酸二氢钠、0.8份的柠檬酸钠和0.3份EDTA-二钠。[0055]实施例5：
[0056]一种动物油脂酶解组合物由按重量份的以下组分制成：2份木瓜蛋白酶、1 份米曲蛋白酶、0.5份磷酸氢二钠、0.5份磷酸二氢钠和0.5份的柠檬酸钠。[0057]实施例6：
[0058]一种动物油脂酶解组合物由按重量份的以下组分制成：2份木瓜蛋白酶、1 份胰蛋白酶、0.5份磷酸氢二钠、0.5份磷酸二氢钠、0.5份的柠檬酸钠和0.2份 EDTA-二钠。[0059]实施例7：
[0060]一种动物油脂的酶解方法，包括以下步骤：[0061]前处理：将10kg猪脂肪组织去杂、洗净，搅碎，投入反应釜；[0062]加料：向反应釜加入实施例1得到的5g动物油脂酶解组合物和200g的水，搅拌均匀；
[0063]酶解：于58℃酶解20min，升温至100℃灭酶；[0064]分离：静置3h后，以4000r/min离心10min，得到动物油脂。[0065]实施例8：
[0066]一种动物油脂的酶解方法，包括以下步骤：[0067]前处理：将10kg牛脂肪组织去杂、洗净，搅碎，投入反应釜；[0068]加料：向反应釜加入实施例2得到的3g动物油脂酶解组合物和100g的水，搅拌均匀；
[0069]酶解：于58℃酶解20min，升温至100℃灭酶；[0070]分离：静置3h后，以4000r/min离心10min，得到动物油脂。[0071]实施例9：
[0072]一种动物油脂的酶解方法，包括以下步骤：[0073]前处理：将10kg猪脂肪组织去杂、洗净，搅碎，投入反应釜；[0074]加料：向反应釜加入实施例3得到的3g动物油脂酶解组合物和200g的水，搅拌均匀；
[0075]酶解：于50℃酶解40min，升温至90℃灭酶；[0076]分离：静置8h后，以3000r/min离心10min，得到动物油脂。[0077]实施例10：
[0078]一种动物油脂的酶解方法，包括以下步骤：[0079]前处理：将10kg鸡脂肪组织去杂、洗净，搅碎，投入反应釜；[0080]加料：向反应釜加入实施例4得到的4g动物油脂酶解组合物和300g的水，搅拌均匀；
[0081]酶解：于68℃酶解20min，升温至95℃灭酶；[0082]分离：静置1h后，以5000r/min离心10min，得到动物油脂。[0083]实施例11：
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一种动物油脂的酶解方法，包括以下步骤：前处理：将10kg牛脂肪组织去杂、洗净，搅碎，投入反应釜；加料：向反应釜加入实施例5得到的3g动物油脂酶解组合物和100g的水，搅拌均酶解：于68℃酶解20min，升温至95℃灭酶；分离：静置1h后，以5000r/min离心10min，得到动物油脂。实施例12：
一种动物油脂的酶解方法，包括以下步骤：前处理：将10kg牛脂肪组织去杂、洗净，搅碎，投入反应釜；加料：向反应釜加入实施例6得到的3g动物油脂酶解组合物和100g的水，搅拌均
匀；
[0087][0088][0089][0090][0091][0092]
匀；
[0093]
酶解：于68℃酶解20min，升温至95℃灭酶；
[0094]分离：静置1h后，以5000r/min离心10min，得到动物油脂。[0095]对比例1：
[0096]一种动物油脂的酶解方法，包括以下步骤：[0097]前处理：将10kg猪脂肪组织去杂、洗净，搅碎，投入反应釜；[0098]加料：向反应釜加入2g胰蛋白酶和200g的水，搅拌均匀；[0099]酶解：于58℃酶解60min，升温至100℃灭酶；[0100]分离：静置3h后，以4000r/min离心10min，得到动物油脂。[0101]对比例2：
[0102]一种动物油脂的酶解方法，包括以下步骤：[0103]前处理：将10kg猪脂肪组织去杂、洗净，搅碎，投入反应釜；[0104]加料：向反应釜加入2g胰蛋白酶、1份磷酸氢二钠和1份磷酸二氢钠和200g 的水，搅拌均匀；[0105]酶解：于58℃酶解60min，升温至100℃灭酶；[0106]分离：静置3h后，以4000r/min离心10min，得到动物油脂。[0107]对比例3：
[0108]一种动物油脂的酶解方法，包括以下步骤：[0109]前处理：将10kg牛脂肪组织去杂、洗净，搅碎，投入反应釜；[0110]加料：向反应釜加入2g木瓜蛋白酶、1g胰蛋白酶和100g的水，搅拌均匀；[0111]酶解：于68℃酶解20min，升温至95℃灭酶；[0112]分离：静置1h后，以5000r/min离心10min，得到动物油脂。[0113]对比例4：
[0114]一种动物油脂的制备方法，包括以下步骤：[0115]前处理：将10kg猪脂肪组织去杂、洗净，搅碎，投入高压反应釜；[0116]加料：向高压反应釜加入2g脂酶解组合物和200g的水，搅拌均匀；[0117]制油：升温118℃后保压120min，冷却至70℃；[0118]分离：静置3h后，以4000r/min离心10min，得到动物油脂。[0119]对比例5：
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一种动物油脂的制备方法，包括以下步骤：前处理：将10kg猪脂肪组织去杂、洗净，搅碎，投入反应釜；加料：向反应釜加入2g脂酶解组合物和200g的水，搅拌均匀，气密盖封；制油：升温105℃后，排气至常压、升温至115℃，保温3h，冷却至70℃；分离：静置2h后，以4000r/min离心10min，得到动物油脂。性能检测1.得率
实施例7-12以及对比例1-4加热时长如下表所示：表1得率比较
实施例7 实施例8 实施例9 实施例10 实施例11 实施例12 得率，％ 76.4 76.3 76.1 77.4 75.1 76.9 对比例1 对比例2 对比例3 对比例4 对比例5 / 得率，％ 68.1 69.5 67.2 57.3 57.3 /
[0130]实施例7-12的酶解方法得到的动物油脂量明显高于对比例1和4，比采用加热方式得到的动物油脂的含量高略高，对比例1和3中，单独用蛋白酶酶解而不添加磷酸氢二纳、磷酸二氢钠和柠檬酸钠缓冲体系时，得率明显下降。增加磷酸氢二纳和磷酸二氢钠后，对比例2的收率有所增加，但是也不及相应的实施例。[0131]2.工艺时长比较
[0132]实施例7-12以及对比例1-5加热时长如下表所示：[0133]表2能耗比较
[0134]
[0135]
由表2可知，实施例7-12的加热时长明显短于对比例4或5，即能耗相对较低，且动
物油脂受热时间短，不易产生有害物质。由表1结合表2可知，虽然对比例1-3的加热时长较短，但是由于蛋白酶在酶解过程中，失活现象较严重，导致实际能耗产出不佳。[0137]3.感官评价
[0138]取2份实施例7-12及对比例1-5得到的动物油脂样品，加入98份水，倒入烧杯中，加热至100℃，冷却至40℃，分别由10位感官评价鉴定师，由1-10 分对气味进行评价、1-10对口感进行评价，并由气味评分按40％和口感评分按 60％进行加权。结果如下表所示：[0139]表3感官评分比较
[0136][0140]
评分 实施例7
8.9 实施例8
8.6 实施例9
8.7
8
实施例10
8.9 实施例11
8.8 实施例12
8.7
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对比例1 对比例2 对比例3 对比例4 对比例5 / 评分 7.3 7.9 7.2 6.5 7.2 /
[0141]由表3可知，对比例4和对比例5采用的传统加热的方式，获得的动物油脂口感差于实施例；对比例1、2和3虽然口感相较于对比例4或5有所改善，但是由于不完全酶解和酶解时间的延长，导致相比对于实施例口感风味下降。[0142]上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。
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