白木香叶高效液相色谱分析方法的建立及其方法学考察

中图分类号 R927

文献标志码 A

文章编号 1672-2124( 2019) 06-0659-08DOI 10. 14009/j.—/. 1672-2124. 2019. 06. 006

摘 要 目的：建立白木香叶的高效液相分析方法并对其进行方法学考察，为白木香叶指纹图谱研究提供依据#方法：分别对检 测波长、流动相系统、流动相洗脱梯度、供试品溶液进样体积、流速及色谱柱柱温进行考察，确定最终色谱条件#从专属性、仪器精

密度、重复性及方法耐用性等方面考察所建立的分析方法#结果：白木香叶的最终色谱条件如下，色谱柱为Shiseido CAP Cell MG (C18柱(250 mmX4. 6 mm,5 &ni)，流速为1. 0 ml/min,检测波长为280 nm,柱温为30 °C，进样体积为10 流动相为乙腈-0. 1%磷酸水溶液，梯度洗脱#方法学考察结果表明，本方法专属性好、仪器精密度符合要求、重复性符合要求且耐用性稳定#结论：建

立的白木香叶高效液相色谱分析方法能满足方法学考察要求，且操作简便，可应用于白木香叶的高效液相指纹图谱分析#

关键词 白木香叶'高效液相色谱法'方法学研究Establishment of HPLC Method for Aquilaria Sinensis Leaves and its Methodological Investigation^ CHEN Jianhua, LIANG Linyuan ( Dept, of Pharmacy, Maoming People' e Hospital, Guangdong Maoming 525000, China)OBJECTIAE: To establish the HPLC method for aquilaria sinensis leovee and ite mohodo/giylinvestiaation, to as ta provide bais for the study of fingerprint of aquilaria einenei /eves. METHODS： The detection wavelength, mobile phase system, mobile phase elution gradient, sample solution injection volume, flow rate and column temperature weo nKstioated to determine the fna chromatooraphiy conditions. The analysis method was nKstiaated from Oic aspects of specificity, instrument precision, repeatability and meeiod durability. RESULTS: The chromatovI■aphic conditions of HPLC analysis of aquilaria sinensis leeves wero finHy determined, the column was Shiseido CAP Cell MG ( column (250 mmX4. 6 mm, 5 &m) witi flow rate of 1. 0 ml/min, detection wavelength of 280 nm, column temperatura of30 C , injection volume of 10 &, and mobi phass of acetonithie -0. 1% aqueous phosphorio acid and gadient elution. The results of tee methodo/vicyi inestiaation showed that tee method had good specificity, the precision of tee instrument met the requirements, the repeatability met the requirements and the durability was stable. CONCLUSIANS: The established HPLC mettod foe aquilaria sinensis leavee con med the requirements of methodolovicyl investiaation, and is csy te operate, which con be applied te HPLC analysis of aquilaria sinensis lecves.KEYWORDS Aquilaria sinensis leavee; HPLC; Methodolovicol investiaationABSTRACT

白木香叶为瑞香科植物白木香（Aquilaria sinensis （ Loue）

香叶的指纹图谱研究提供依据。Gi/］的非药用部位，含有黄酮、挥发油、昔类及酚类等有效成

分（16］，每年可采摘2次，产量大。杨晓娟等灼利用高效液相 色谱法（high performance liquiO chromatooraphy, HPLC ）测定白 木香叶中有效成分的含量,发现白木香叶富含芒果昔,提示今

1材料1.1仪器HWS 24型电热恒温水浴锅（上海一恒科技有限公司）；

ME 204型万分之一电子天平、MS 105型十万分之一电子天平 （METTLER TOLEOD公司）；安捷伦1200 RRLC型高效液相色 谱仪［安捷伦科技（中国）有限公司］;Waters 2695/2988型高 效液相色谱仪［沃特世科技（上海）有限公司］;Thermo U 3000

后应深入开展对药用植物非药用部位的综合开发和利用’相

关研究结果发现，白木香叶的醇提取物具有降血糖、平喘及抗 炎等作用，其效果与白木香药材相当，甚至略优（661］'上述研

究结果均表明了白木香叶的巨大开发利用价值，因此，建立白 木香叶的指纹图谱及质量评价体系尤为重要。本研究旨在建

型高效液相色谱仪（赛默飞世尔科技公司）&KQ-700DE型数控 超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。1.2药品与试剂立白木香叶HPLC分析方法并对其进行方法学考察,为白木

!基金项目：广东省药学会医院药学基金项目（Nv.2018A21 ）*副主任中药师。研究方向：中药现代应用。E-mail: jianuac@163.com芒果苷对照品（中国食品药品检定研究院，批号：111607-

201704）；白木香叶（广东君元药业有限公司，批号: 20180703 ）;乙腈、甲醇（色谱纯,德国Merck公司）；磷酸、甲酸中国医院用药评价与分析2019年第19卷第6期Evaluation and analysis of drug-use in hospitals of China 2019 Vol.19 No.6 • 659 •(分析纯，广州化学试剂厂)；自制超纯水。280 nm；柱温为30 °C ;进样体积10 &/2方法与结果2.1溶液的制备表1白木香叶指纹图谱分析的梯度洗脱程序Tab 1 The elution gradient of fingerprint analysis of

2.1.1供试品溶液:取白木香叶粉末0.5 g,精密称定,置于具 塞锥形瓶中，加入甲醇50 ml,称定质量，超声(功率250 W,频

aquilaria sinensis leaves时间'/min0303545率40 kHz)提取40 min,放冷,用提取溶剂补足减失的质量，摇 匀,0.22 &m滤膜滤过，取续滤液,即得。2.1.2对照品溶液:取芒果苷对照品适量,精密称定,加甲醇 制成每1 ml含芒果苷0. 2 mg的溶液，即得。2.2色谱条件考察乙腈/%840880.1%磷酸水溶液/%926092922.2.2检测波长考察:对供试品溶液进行全波长扫描，从其

3D图中选择最佳检测波长。在其他色谱条件不变的情况下,

2.2. 1 色谱条件：色谱柱为Shiseido CAP Cell MG ( C18柱 记录供试品溶液不同波长下的色谱图，见图1'结果表明，在 280 nm处，白木香叶中色谱峰信息量大,且各峰响应值分布更

(250 mmX4. 6 mm,5 &m)；流动相为乙腈6 1%磷酸水溶液, 梯度洗脱(洗脱程序见表1)；流速为1.0 ml/min；检测波长为均匀，最终选择280 nm作为白木香叶指纹图谱分析的波长。IjjL _ . —J ^ji . ---012345678 9101112131415161718192021222324252627282930313233343536373839404142434445

时间/min［「一—… ________

o\"l 23 4 5~6 7 8 9101112131415^617181920212223242526272829303?3233343536373839404142434445

时间/minDA.供试品3D吸收图；Y.波长为280 nm；C.波长为300 nm；D.波长为330 nmA. 3D absorption diagram of the test sample； B. wavelength of 280 nm； C. wavelength of 300 nm； D. wavelength of 330 nm图1白木香叶供试品3D吸收图及不同波长下的色谱图Fig 1 3D absorption diagram of aquilaria sinensis leaves and chromatograms ai differeni wavelengths2.2.3流动相系统考察:依次考察下列流动相系统分析供试

为选择标准。结果表明，采用流动相(5)乙腈-0.1%磷酸水溶 液得到的供试品溶液的峰信息较多,基线较平稳,分离度、峰 形较好，故最终确定流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液，见图2。品的效果。(1)甲醇(A)冰(B)；( 2)乙腈(A)冰(B)；

(3)甲醇(A) -0.1%磷酸水溶液(B)；( 4)屮醇(A) -0.1%甲酸

水溶液(B)；( 5)乙腈(A) -0.1%磷酸水溶液(B)；( 6)乙腈 (A) -0. 1%甲酸水溶液(B)。流动相洗脱梯度：0〜20~25~

2. 2. 4流动相梯度洗脱程序优化:在其他色谱条件不变的情

况下,考察不同梯度洗脱程序对白木香叶分离效果的差异(见 表2),以样品谱图岀峰数目多、峰分布均匀,且主成分峰基本

35 min，乙腈含量变化8% ~ 40%〜8%〜8%。其他色谱条件不

变的情况下，比较不同洗脱系统对白木香叶的分离效果,以 谱图的岀峰数目多、峰分布均匀、峰分离效果好和基线平稳

分开为选择标准。结果显示，各梯度的岀峰数目基本一致，但 梯度6的基线平稳，峰分布均匀，且主成分峰分开效果最佳,中国医院用药评价与分析2019年第19卷第6期• 660 • Evaluation and analysis ot drug-use in hospitalo ot China 2019 Vol.19 No.6即®

2

2222222221111111111

9OO8OO7OO6OO5OO4OO3OO2OO1OO0OO9OO8OO7OO6OO5OO4OO3OO2OO1OO0OO9OO8OO7OO6OO5OO4OO3OO2OO1OOO

乙if-水乙ffi-i%磷酸水溶液图2白木香叶指纹图谱分析-流动相系统考察色谱图Fig 2 Fingerprint analysis of aquilaria sinensis leaves-investigation of the chromatogram of the mobile phase system表2梯度洗脱程序考察Tab 2 Gradient elution procedures was investigated梯度时间0.1%磷酸水溶液# B)乙腈# A)梯度1梯度20~60 min0~ 10~25~30~40 min0~ 10~ 15~25~30~40 minAm、乙J®-i%甲酸水溶液甲醇-水甲醇-1%磷酸水溶液甲醇-1%甲酸水溶液012345678 9101112131415161718192021222324252627282930313233343536373839404142434445时间/min对白木香叶分离效果的影响，以样品色谱图中峰的响应度高且

分离度好作为选择标准。结果显示，不同进样体积的色谱图无

5%~100%8%~24%~40%~8%~8%8%~24%~24%〜40%~8%~8%95%~0%92%~76%~60%~92%~92%明显差异,随着进样体积的增加,各峰之间的分离效果逐渐降 低,最终选择进样体积为10 &,见图4。2. 2.6流速的考察:在其他色谱条件不变的情况下,考察供试 品溶液洗脱流速分别为0. 8*0. 9*1. 0*1. 1及1.2 ml/min时对

梯度3梯度492%~76%~76%〜60%~92%~92%92%~92%~60%〜92%~92%92%~92%~60%~92%~92%92%~60%~92%~92%0~10~30~35~45 min8%~8%~40%〜8%~8%8%~8%~40%~8%~8%8%~40%~8%~8%白木香叶分离效果的影响，以样品谱图岀峰时间适中，主成分 峰分离度高、分布均匀作为选择标准。结果显示，当流动相的

梯度5梯度60~5~25~30~40 min流速为1. 0 m/min时,供试品的谱图岀峰时间适中，峰分离度 较高、分布均匀，为最佳流速，见图5。0~30~35~45 min2. 2. 7色谱柱柱温的考察:在其他色谱条件不变的情况下，考

故选择梯度6,见图3。察柱温分别为25*30及35 q时对白木香叶分离效果的影响, 以期通过柱温优化进一步提高峰分离度。结果显示,柱温为

2.2.5供试品溶液进样体积的考察:在其他色谱条件不变的 情况下，考察供试品溶液进样体积分别为5*10*15及20 &时

20〜30 q时,各主要色谱峰的分离度差异不大;结合实验实0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 2? 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40

时间/min时间/mmA.梯度1；B.梯度2；C.梯度3；D.梯度4；E.梯度5；F.梯度6A.gradient 1 ； B.gradient 2 ； C.gradient 3 ； D.gradient 4 ；E.gradient 5 ；F.gradient 6图3白木香叶指纹图谱分析-流动相梯度优化色谱图Fig 3 Fingerprint analysis of aquilaria sinensis leaves-the optimized chromatogram of mobile phase gradient中国医院用药评价与分析2019年第19卷第6期Evaluation and analysis of drug-use in hospitals of China 2019 Vol. 19 No.6 • 661 •申S

图4白木香叶指纹图谱分析-进样体积考察色谱图Fig 4 Fingerprint analysis of aquilaria sinensis leaves-the chromatogram of different injection volume4OO3OO2OO1OO0OO9OO8OO7OO6OO5OO4OO3OO2OO1OO0OO9OO8OO7OO6OO5OO4OO3OO2OO1OOO

AUI、7oo 6 o o o o5 4 o o 3 o o 2 o o 1 O O

012345678 9 101112131415161718192021222324252627282930313233343536373839404142434445

时间/min 日、nlns

图5白木香叶指纹图谱分析-流速考察色谱图Fig 5 Fingerprint analysis of aquilaria sinensis leaves-the chromatogram of different flow rathFig 6 Fingerprint analysis of aquilaria sinensis leaves-the chromatogram of different column temperathres际环境，最终选择30 °c作为最终的色谱柱温，见图6。2.3方法学考察2.3. 1专属性考察:取白木香叶样品,按“ 2. 1. 1”项下方法制 备供试品溶液，取等量洗脱溶剂作为空白供试品溶液。按 “2.2.1”项下色谱条件进样分析,记录色谱图。结果显示，空

白供试品溶液在色谱条件下基本无吸收,对供试品的色谱分析

无干扰，表明建立的方法专属性好，见图7。• 662 • Evaluation and analysis of drug-use in hospitals of China 2019 Vol.19 No.6A2.3.2仪器精密度考察:取白木香叶样品，按“ 2. 1. 1，项下方

法制备供试品溶液1份，连续进样6次，按“2. 2. 1，项下色谱条 件测定，记录色谱图。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系

统》（2012版）进行全谱相似度分析。结果显示,6张谱图相似

度均＞0. 996，主成分峰的相对保留时间及相对峰面积的RSD 均＜3%，表明仪器精密度符合要求，见表3、图K。2.3.3 重复性考察：取同一批次白木香叶样品（批号:中国医院用药评价与分析2019年第19卷第6期012345678 9 101112131415161718192021222324252627282930313233343536373839404142434445时间/min图7白木香叶指纹图谱分析-方法专属性考察色谱图Fig 7 Fingerprint analysis of aquilaria sinensis leaves-the chromatogram of specificity study32222222222111A1E11朋e1111

0OO9OO8OO7OO6OO5OO4OO3OO2OO1OO0OO9OO8OO7OO6OO5OO4OO3OO2OO1OO0OO9OO8OO7OO6OO5OO4OO3OO2OO1OO

„__________________________________________ 精密度6, 精密度5、一- ________________ 精密度4” ________________________________________ 精密度3“__________________________________________ 精密度2—___________________ 精密度］012345678 9 101112131415161718192021222324252627282930313233343536373839404142434445时间/min图8白木香叶指纹图谱分析-仪器精密度考察色谱图Fig 8 Fingerprint analysis of aquilaria sinensis leaves-the chromatogram of the investigation of instrpment precision表3仪器精密度考察色谱图的相似度Tab 3 Similarity of chromatograms investigated bynnshrumenhereinsnon谱图123456表4重复性考察色谱图的相似度Tab 4 Siimlarity of ceromatograms investicated by repatabSity谱图123456121.0000.9990.9991.0000.9981.0001.0000.9990.9960.9991.0000.99930.9981.0001.0000.9980.9991.00041.0000.9990.9981.0000.9971.00050.9960.9990.9990.9971.0000.99860.9991.0001.0001.0000.9981.000121.0001.0001.0001.0001.0001.0000.9990.9990.9980.9961.0000.99931.0001.0001.0000.9990.9970.99940.9990.9990.9991.0000.9931.00050.9980.9960.9970.9931.0000.99460.9991.0000.9991.0000.9941.000积的&S9均＜3%,表明供试品溶液在24 h内基本稳定，见表5、图 10。20180703)，精密称定6份，按“2. 1. 1”项下方法制备供试品溶

液6份，按“2.2.1 ”项下色谱条件进样分析,记录色谱图。结 果显示,6张谱图相似度均＞0. 993,主成分峰的相对保留时间 及相对峰面积的RSD均＜3%,表明方法的重复性符合要求，见

2.3.5方法耐用性考察：(1)不同色谱柱考察。取白木香叶 样品，按“2.1.1 ”项下方法制备供试品溶液1份，分别采用

Phenomenex C18柱(5 jjim,250 mmX4. 6 mm) *YMC-Triart C18柱

(5 &m,250 mmX4. 6 mm) * Agilent Zorbrx SB-Tq C18 柱(5 &m,

表4、图9。2.3.4稳定性考察:取白木香叶样品,按“ 2. 1. 1，项下方法制 备供试品溶液1份，按“2. 2. 1，项下色谱条件，分别于放置0、 2*4*8*12及24 h时进样分析,记录色谱图。结果显示,6张谱 图相似度均＞0. 998,主成分峰的相对保留时间及相对峰面中国医院用药评价与分析2019年第19卷第6期250 mmx4. 6 mm)和 Shiseido CAP Cell MG ( C18 柱(5 &m, 250 mmx4. 6 mm)，按“2. 2. 1，项下色谱条件进样分析,记录色

谱图。结果显示,4张谱图相似度均＞0.992,表明本方法基本 适用于不同的色谱柱，见表6*图11。但考察结果提示，不同Evaluation and analysis of drug-use in hospitals of Chinr 2019 Vol. 19 No.6 • 663 •3 000­2 900­2 800：2 700­2 600­2 5002 400­2 300­2 2002 100­2 000­1 900：1 800A1 700：E

/1 600­1 500即s1 400：1 3001 200­1 100：1 000­900-800：700­600500400300200-100：重复性6I L __ _______L_______a______ - __

Lt

一.._重复性5重复性4亠L L)

_ 一亠』A _ .」„ 1A

重复性3.重复性2 M ▲重复性1012345678 9101112131415161718192021222324252627282930313233343536373839404142434445时间/min图9白木香叶指纹图谱分析•方法重复性考察色谱图Fig 9 Fingerprint analysis of aquilaria sinensis leaves-the chromatogram of the investigation of method reneatability表5稳定性考察图谱的相似度Tab 5 Similarity of chromatograms investigated by tesS stability谱图0h2h4h8h12h24 h0h1.0001.0001.0000.9981.0000.9992h1.0001.0001.0000.9981.0001.0000O9O8O7O6O5O4O3O2O1O0O9O8O7O6O5O4O3O2O1O0O9O8O7O6O5O4O3O2O1O

4h1.0001.0001.0000.9981.0001.0008h0.9980.9980.9981.0000.9980.99912h1.0001.0001.0000.9981.0001.00024 h0.9991.0001.0000.9991.0001.000表6不同色谱柱考察图谱的相似度Tab 6 Similarity of chromatograms investigated by different

hoiumns谱图Agilent Zorbax SB-Aq C18Waters Altantis-A18Phenomenex-A]8Shieido CAP Cell MG( C18Agilent ZorbaxSBAAq C181.0000.9960.9920.998WatersAetantseAC180.9961.0000.9960.997Phenomenex-C18ShsesdoCAPCell MG(C180.9980.9970.9940.9920.9961.0000.9941.00024h

12h

AE/

申s

Li012345678 9101112131415161718192021222324252627282930313233343536373839404142434445时间/minh

图10白木香叶指纹图谱分析•供试品稳定性考察色谱图Fig 10 Fingerprint analysis of aquilaria sinensis leaves-the chromatogram of the investigation of test stability色谱柱的分离效果仍存在一定差异，Shiseido CAP Cell MG ( C$8柱(5 &m,250 mmX4. 6 mm)的分析效果最好,建议指纹图谱

显示,3张谱图相似度均＞0. 995，表明本方法基本适用于不同 的液相色谱仪分析,见表7、图12。但考察结果提示,不同的

分析样品时使用 Shiseido CAP Cell MG( C18 ( 5 &m, 250 mmX

4.6mm)色谱柱。(2 )不同仪器考察。取白木香叶样品，按

仪器所得图谱仍存在一定的差异，建议指纹图谱分析样品时 固定使用同一台液相色谱仪,减小仪器差异造成的样品质量

“2.1.1”项下方法制备供试品溶液1份，分别采用Waters 2695/2998 型、Agile/t RRLC 1200 型和 Thermo U3000 型液相色

评价误差。方法学考察结果表明，本研究所建立的白木香叶HPLC分

谱仪，按“2.2.1”项下色谱条件进样分析,记录色谱图。结果 析方法能满足方法学考察要求，且操作简便，可应用于白木中国医院用药评价与分析2019年第19卷第6期• 664 • Evaluation and analysis of drug-use in hospitale of China 2019 Vol. 19 No.6AE/

OZ- 11 11 11 11 11 11 1± 1± 1± 1±

0OO9OO8OO7OO6OO5OO4OO3OO2OO1OO0OO9OO8OO7OO6OO5OO4OO3OO2OO1OO O

Shiseido CAPCell MGIII C18uPlienomenex-C18申S

YMC-Triart C18Agilent ZorbaxSB-AqC18012345678 9101112131415161718192021222324252627282930313233343536373839404142434445时间/min图11白木香叶指纹图谱分析-不同色谱柱考察色谱图Fig 11 Fingerprint analysis of aquilaria sinensis leaves-the chromatogram of the investigation of different columnsnull

25O20O15O10O05O00O95O90O85O80O75OAE/

70O65O60O55O50O45O40O35O30O25O20O15O10O 5OO

Waters2695/2998 型申逆

TliennoU3000型AgilentRRLC1200型012345678 9 101112131415161718192021222324252627282930313233343536373839404142434445时间/min图12白木香叶指纹图谱分析-不同仪器考察色谱图Fig 12 Fingerprint analysis of aquilaria sinensis leaves-the chromatogram of investigation of different instrements表7不同仪器考察图谱的相似度Tab 7 Similarity of chromatograms investigated bydifferent instrpments谱图3讨论目前对白木香叶的研究主要集中在其化学成分上，对其有 效成分的指纹图谱研究很少。杨锦玲等（12］通过对国产沉香建 立指纹图谱研究，为其科学鉴定和质量控制提供了依据。因此,

Agileni RRLC1200 型1.0000.995Thermo U3000 型0.995Waterr 2695/2998 型1.000Agileni RRLC1200 型Thermo U3000 型Waterr 2695/2998 型1.0000.9961.000建立白木香叶的指纹图谱研究对其开发应用具有指导意义。本研究主要通过HPLC法建立白木香叶指纹图谱分析方 法并进行方法学考察，为白木香叶指纹图谱研究提供依据,（1.0000.996香叶的HPLC指纹图谱分析。中国医院用药评价与分析2019年第19卷第6期下转第669页）Evaluation and analysis of drug-use in hospitals of China 2019 Vol.19 No.6 • 665 •状态，可有效改善眼部病情’neoeetabeoaengih an paiaeniswaih iepe1 ooiepe2 daabeiesmeaaius

综上所述，复明片可以降低糖尿病性干眼大鼠结膜上皮 TGF-pi的表达，降低泪液炎性因子水平，进而改善干眼 症状。[9]

[ J] .JDaabeiesCompaacaiaons,2014,28( 5) %658-661.陈向东，彭清华,颜家朝，等•复明片治疗糖尿病视网膜病变视

网膜光凝术后临床观察[J] •湖南中医药大学学报,2016,36 ( 1) %63-65.参考文献[1]

Tan X,Sun S,Liu Y,et al.Analysis of Thl7-associate0 cytokines in

[10] 甘国菊•复明片和复方丹参片治疗轻、中度非增殖性糖尿病视

网膜病变的效果对比[J] •中外医学研究,2017,15(9)%26-27.tears cf patients witO dry eye syndrome [ J ]. Eye ( Lond) , 2014,28 (5) %608-613.[2]

[ 11] !Shah KC, Lam KS, TongL.A sesiemaiacoeeaew on iheampaciot

daabeiesmeaaiuson iheocuaaosuotace[ J] .NuioDaabeies, 2017, 7

沈乎醒，高卫萍E型糖尿病发生干眼的相关因素分析[J] •国际 眼科杂志,2018,18( 1) : 126-129.( 3) %e251.[3] 李琰，杨炜E型糖尿病患者的干眼患病情况及其相关影响指标

[J]•国际眼科杂志,2016,16(3) %508-510.[12] Li YG, Ji DF, Zhong S, et al. Hypoglycemic effect ot deoxynojiv-myciv-polysaccharide on high fat diet and streptozotocia-induced diabeic mice via reeulation ot hepatc glucose metabolism[ J] .Chem

[4] 邓显峰，朱峰，陈伟，等E型糖尿病与干眼症的相关性研究及其

危险因素分析[J] •现代生物医学进展,2016,16(13):2503-2506.[5]

Bid Interact, 2015,225 : 70-79王金华E型糖尿病干眼症患者发病机制的研究进展[J] •江西 医药,2015,50(2) % 185-187.[13 ]韩治华,杨淑焕，郭卫民，等介导的Smad信号通路在增

生型糖尿病视网膜病变中的作用和意义[J] •眼科新进展,

2016,36( 10) %957-960.[6] 王志玉，史爱云•丹参川芎嗪联合复明片治疗糖尿病视网膜病 变疗效分析]J] •医学研究杂志,2009,38(3) %81-83.[14] Li B, Sheng M, Li J, et aL Tear proteomic analysis ot Sjogrensyndrome patienis with de eye syndrome by two-dimensional-nano­

[7] Najafi L,Malek M,Valojerdi AE,et al.Dry eye and its correlation to

diabetes microvasculao complications in people with type 2 diabetes mellituy[ J] .J Diabetes ComplicaOons,2013,27( 5) %459-462.[8]

liquid chromatovraphy coupled with tandem mass spectrometry [ J]. Sci Rep,2014,4：5772.Stem MS,Hussain M,Lentz SI,et al.Eifferenyal reduction in corneal(收稿日期：2019-03-08)(上接第665页)研究[J] •今日药学,2013,23(6) %346-347.[8]

进一步为其鉴定及质量控制提供标准。参照相关研究建立的 沉香高效液相特征图谱分析方法[13\"],本研究分别对检测波

林焕泽，李红念,梅全喜•沉香叶与沉香药材抗炎作用的对比研 究[J] •中华中医药学刊,2013,31(3) %548-549.长、流动相系统、流动相梯度洗脱程序、供试品溶液进样体积、

[9] Huo HX, Zhu ZX, Song YL, et aa Anti-inaammatora Dimeric 2-( 2-

流速及色谱柱柱温进行考察，以确定最终的色谱条件;分别从 专属性、仪器精密度、重复性、稳定性及方法耐用性考察建立的 分析方法，以确保白木香叶HPLC分析方法能够满足方法学考

Phenylethyl) chromones from the Resinous Wood ot Aquilaria sine­nsis [ J] .J Nat Prod,2018,81(3) %543-553.[10] Liao G, Mei WL, Kong FD, et aL 5, 6, 7, 8-Teyahydre-2-( 2-

phenyaeehya) choomonestoom aoeatacaaaagaowood otaquaaaoaasanensas

察需求。参考文献[1 ]

and eheaoanhabaeooyaceaeaeyagaanseaceeyachoaaneseeoase[ J] [11] Xia F, Sun J, Jiang Y, et al. Furtheeinvestiaation of leaves

Speed Couneeo-Cu oeneChoomaeogoapheAppaoaeus[ J] .JChoomaeogo Sci,2018,56( 1) %18-24.[2]

o AquaaaoaaSanensas [ J] .ZhongguoZhongYaoZaZha, 2013, 38 ( 19) % 3299-3303.[12]

冯洁,杨秀伟•白木香叶化学成分的研究[J] •中国中药杂志，

2012, 37( 2) % 230-234.杨锦玲，梅文莉,余海谦，等•国产沉香HPLC指纹图谱研究[J]. 中草药,2014,45(23) %3456-3461.[3] Sun J,Xia F, Wang S, Wang KY,et al.Stmctural elucidafon of tio newmegasiigmanegaecosidesioom iheaeaeesoiAquiaaoiasinensis

[13] 尚丽丽，陈媛，晏婷婷，等•沉香高效液相特征图谱[J]・林业科 学,2018,57( 7) %104-111.[ J] .Chan JNaiMed,2015,13( 4) %290-294.[ 4] YangL, GuoP, Lau A, eiaa.AquaaaoaaenesA-H, eaghinew daieo-

penoadstoom Chaneseeagaewood[ J] .Faioieoapaa,2019,133%180-185.[5]

[14] Ite T,Kakino M, Tazawa S,et al.Quantification of Polyphenols and

Pharmacolovical Analysis of Watee and Ethanol-Based Extracts of

Cultivated Agarwood Leaves [ J ] .J NuZs Sci Vitaminol ( Tokye ), 2012,58( 2) %136-142.杨晓娟，邹萍萍，周观燊，等-HPLC法测定白木香叶和远志地 上部分芒果苷的含量[J] •药物分析杂志,2012,32( 7)%1175-

1178.[15 ] Yu Q, Qi J, Yu HX, eS al.Qua0ta0ve and quantitative analysis of

phenolic compounds in the leaves of aquilawa sinensis using liquid

[6] 梅全喜，李红念,林焕泽，等•沉香叶与沉香药材降血糖作用的比 较研究[J] •时珍国医国药,2013,24(7) % 1606-1607.chromatovraphy-mass spectrometo [ J ]. Phytochem Anal, 2013,24 ( 4) % 349-356.( 收稿日 期%2019-03-12)[7] 吴秀荣，李红念,梅全喜,等•沉香叶与沉香药材平喘作用的对比

中国医院用药评价与分析2019年第19卷第6期Evaluation and analysis of dog-use i hospitals of China 2019 Vol.19 No.6 • 669 •