・２５７８・ 现代中西医结合杂志Ｍｏｄｅｒｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ ａｎｄ Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２０１４ Ａｕｇ，２３（２３） 血清Ｓ—ＩＯＯＢ蛋白和Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ联合检测在 新生儿缺氧缺血性脑病中的临床意义 徐 明，洪 菲 （江苏省南通市第一人民医院，江苏南通２２６０００） ［摘要］ 目的 研究血清Ｓ一１００Ｂ蛋白和Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ联合检测在新生儿缺氧缺血性脑病（ＨＩＥ）中的临床意 义。方法 选择３２例新生儿ＨＩＥ（ＨＩＥ组），３０例非ＨＩＥ的窒息新生儿（非ＨＩＥ组）和ｌ２例健康新生儿（正常组），检 测３组出生后２４ ｈ血清Ｓ一１００Ｂ蛋白和Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ表达量，并比较３组实验指标阳性者与阴性者生后２８ ｄ新生儿 神经行为测定（ＮＢＮＡ）变化。结果 出生２４ ｈ ＨＩＥ组Ｓ—ＩＯＯＢ蛋白和Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ表达量阳性率显著高于其他２组 （Ｐ均＜０．０５），ＨＩＥ组中两者同时阳性对ＨＩＥ诊断特异性最高（Ｐ＜０．０５），且２８ ｄ ＮＢＮＡ评分低于单项阳性的２组（Ｐ 均＜０．０５）。结论 出生２４ ｈ血清Ｓ—ＩＯＯＢ蛋白和Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ表达量与ＨＩＥ患儿的脑部损伤程度相关，联合检测 特异性更高。 【关键词］ 缺氧缺血性脑病；Ｓ一１００Ｂ蛋白；Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ；新生儿 ｄｏｉ：１０．３９６９／ｉ．ｉｓｓｎ．１００８—８８４９．２０１４．２３．０２９ ［中图分类号］ Ｒ７２２．１ ［文献标识码］ Ｂ ［文章编号］ １００８—８８４９（２０１４）２３—２５７８—０２ 新生儿缺氧缺血性脑病（ＨＩＥ）是由于各种围生期因素引 胶扫描系统进行扫描，以目的条带Ｐａｒ一４的Ａ值占内参照 起的脑缺氧和血流减少或暂停而致胎儿和新生儿脑损伤，是 ＧＡＰＤＨ的Ａ值百分比（％）表示Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ表达水平，分 儿童神经系统伤残的主要原因之一。早期诊断及正确评估其 别统计Ｓ—ＩＯＯＢ蛋白阳性、Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ表达量阳性及两者 脑细胞损伤的严重程度对降低新生儿死亡和减轻神经系统后 同时阳性的例数，并计算各自敏感性，特异性。在室温（２２～ 遗症有十分重要意义，目前ＨＩＥ早期诊断的指标较多，包括 ２７ ｏＣ）、半暗的安静环境中，由经过训练不知道分组的主治医 脑电图、脑ＣＴ、实验室指标等，但大多数文献对其单独检测在 师对ＨＩＥ组患儿进行新生儿神经行为测定（ＮＢＮＡ），判断其 ＨＩＥ中的临床意义有报道。本文旨在探讨联合检测血清Ｓ一 神经系统功能及估计预后情况。ＮＢＮＡ是由鲍秀兰等 制定 １００Ｂ蛋白和Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ在诊断和判断ＨＩＥ预后方面的意 的２０项新生ＪＬ＊０经测查法，内容包括行为能力６项、被动肌 义，现报道如下。 张力４项、主动肌张力４项、原始反射３项和一般评价３项， １ 临床资料 每项评分有３个度（０，１，２分），满分４０分，≥３５分为正常， １．１一般资料 选取本院新生儿科２０１１年１—１２月６２例 ＜３５分为异常。 生后２４ ｈ内以窒息住院新生儿，ＨＩＥ诊断标准及临床分度依 １．３统计学方法使用Ｓｔａｔａ １１ ０版本软件对资料进行统 据《新生儿缺氧缺血性脑病诊断标准》…。根据有无ＨＩＥ分 计学处理，计量资料数据以ｉ±ｓ表示，行ｔ检验；计数资料用 组，其中ＨＩＥ组３２例，男１８例，女１４例；胎龄３６．５—３９．５ 率表示，行ｘ 检验。Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。 （３８．５±２．１）周；出生体质量２．５６～４．Ｏ１（３．３６±０．２３）ｋｇ。非 ２结 果 ＨＩＥ组３０例，男ｌ６例，女１４例；胎龄３６．２～４０．１（３８．６± ２．１ ３组Ｓ一１００Ｂ蛋白及Ｐａｒ一４ｍＲＮＡ阳性表达情况比较 ２．４）周；出生体质量２．６７～３．９７（３．３９±０．１９）ｋｇ。并选择同 ３组间Ｓ一１００Ｂ蛋白阳性率、Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ表达量阳性率、两 期本院产科出生２４ ｈ内的健康新生儿１２例为正常组，男７ 者同时阳性的阳性率比较均有显著性差异（Ｐ均＜０．０５）。 例，女５例；胎龄３６．６—４０．３（３９±２．５）周；出生体质量２．６１～ ＨＩＥ组与非ＨＩＥ组内Ｓ—ＩＯＯＢ蛋白阳性率与Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ ４．０３（３．４１±０．２７）ｋｇ，并排除颅内出血、各种先天畸形、遗传 表达量阳性率比较无显著性差异（Ｐ＞０．０５），两者同时阳性 代谢病及失访等。３组胎龄、体质量、男女构成均无显著性差 率均显著低于两者单独阳性的阳性率，均有显著性差异（Ｐ均＜ 异（Ｐ均＞０．０５）。 ０．０５）。见表１。 １．２方法对ＨＩＥ组、非ＨＩＥ组及正常组的新生儿均在出 表１ ３组血清Ｓ—ＩＯＯＢ、Ｐａｒ一４ｍＲＮＡ阳性率比较 ％ 生２４ ｈ抽取静脉血３ ｍＬ，其中２ ｍＬ用低温离心后于一７Ｏ℃ 储存待测，采用酶联免疫吸附试验，检测Ｓ一１００Ｂ蛋白；其中 １ ｍＬ分离外周血中淋巴细胞，用Ｔｒｉｚｏｌ抽提总ＲＮＡ，用Ｍ— ＭＬＶ逆转录酶合成ｃＤＮＡ，进行ＰＣＲ扩增，引物为正义：５’一 ＡＴＣＣＣＣＧＡＡＣＡＧＡＴＡＧＡＡＧＴ一３’，反义：５’一ＡＡＡＡＧＣＡＧ— 注：①与ＨＩＥ组比较，Ｐ＜０．０５；②与Ｓ一１００Ｂ蛋白阳性比较，Ｐ＜ ＧＴＴＴＣＣＣＡＣＡＣ一３’，ＰＣＲ产物进行琼脂糖凝胶电泳，ＵＶＰ凝 ０．０５；③与Ｓ一１００Ｂ蛋白阳性比较，Ｐ＞０．０５。 现代中西医结合杂志Ｍｏｄｅｒｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ ａｎｄ Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２０１４ Ａｕｇ，２３（２３） ２．２ ＨＩＥ组Ｓ—ＩＯＯＢ蛋白阳性、Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ表达量阳性、 ’２５７９・ 血淋巴细胞Ｐａｒ一４的基因转录，所以ＨＩＥ患ＪＬ＃Ｉ－周血淋巴细 胞中Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ表达量显著上调，且与ＨＩＥ的严重程度一 两者同时阳性的敏感性、特异性的比较ＨＩＥ组ｓ—ＩＯＯＢ蛋 白敏感性最高，两者同时阳性的特异性最高（Ｐ均＜０．０５）。 致 ］。既往临床中单独检测上述指标敏感性较高，但有一定 见表２。 表２ ＨＩＥ组Ｓ一１００Ｂ蛋白阳性、Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ表达量 阳性、两者同时阳性的敏感性及特异性比较 ％ 注：①与Ｓ一１００Ｂ蛋白比较，Ｐ＜０．０５；②与Ｐａｒ一４ｍＲＮＡ比较，Ｐ＜ ０．０５。 ２．３ ＨＩＥ组中Ｓ一１００Ｂ阳性、Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ阳性及两者同阳 性的患儿生后２８ ｄ ＮＢＮＡ评分比较 两种实验指标中阳性和 阴性患儿生后２８ ｄ ＮＢＮＡ评分比较有显著性差异（Ｐ＜ ０．０５），Ｓ一１００Ｂ蛋白阳性患ＪＬＪ－７ Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ阳性患儿比较 无显著性差异（Ｐ＞０．０５），但分别与两者均阳性的患儿比较 有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。见表３。 表３ ＨＩＥ组中Ｓ一１００Ｂ阳性或Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ表达量 阳性、两者同时阳性患儿生后２８ ｄ ＮＢＮＡ评分比较（ ±ｓ，分） 注：①表示Ｓ一１００Ｂ与Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ表达量同时阴性和两者之 一阴性；②与阴性比较，Ｐ＜０．０５；③与Ｓ—ＩＯＯＢ比较，Ｐ＞ ０．０５；④与Ｓ—ＩＯＯＢ比较，Ｐ＜０．０５。 ３讨 论 ＨＩＥ是围生期窒息缺氧导致的缺氧缺血性脑损伤，其发 病率高，重症患儿将会发生脑瘫、癫痫等严重后遗症，故早期 诊断、早期干预、判断预后对降低儿童致残率有重要意义。Ｓ— ＩＯＯＢ蛋白和Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ对ＨＩＥ的早期诊断、程度和预后的 判断均有较高的临床价值 “ ， Ｓ—ＩＯＯＢ蛋白于１９６５年由Ｍｏｏｒｅ等 在牛脑组织中发 现。Ｓ—ＩＯＯＢ蛋白主要分布于中枢神经系统的神经胶质细胞 中，当中枢神经系统损伤，Ｓ一１００Ｂ蛋白从胞液中渗出进入脑 脊液，再经受损的血一脑脊液屏障进入血液，Ｓ—ＩＯＯＢ蛋白增 高是中枢神经系统损伤特异和灵敏的生化指标 。Ｓ一１００Ｂ 蛋白可作为星形细胞的特异性蛋白，在缺氧缺血性脑损伤时 有不同程度的升高，其升高程度与病情严重程度及预后密切 相关。国外研究发现，足月新生儿在发生窒息后２４ ｈ内血清 Ｓ一１００Ｂ蛋白水平升高，且达到高峰 －ｓ］。Ｐａｒ～４基因在缺 血性脑损害的发病机制中占重要地位，缺氧缺血诱导了外周 的假阳性率，对临床分析病情带来一定误导。 在本研究中，生后２４ ｈ ＨＩＥ组新生儿血清Ｓ一１００Ｂ蛋白 和Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ表达量阳性率比非ＨＩＥ组和正常组均升高， 非ＨＩＥ组与正常组比较无显著性差异，说明血清Ｓ一１００Ｂ蛋 白和Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ表达量能明显预示脑组织损伤的发生。 而对ＨＩＥ诊断的敏感性和特异性评价，Ｓ一１００Ｂ蛋白的敏感 性最高，但其特异性最差，而两者同时阳性的特异性最高，故 两者同时阳性对诊断ＨＩＥ更有意义。新生儿神经行为测定 评分法是我国儿科早教专家鲍秀兰教授修订的筛查标准，对 筛查脑损伤高危儿及早期评估有较好的价值。ＮＢＮＡ评分可 早期发现新生儿因脑损伤所致的神经行为异常，为临床医生 进行早期诊断提供依据。且早期对ＨＩＥ患儿进行ＮＢＮＡ评 分可以协助判断ＨＩＥ患儿颅脑损伤的程度。本研究中ｓ一 １００Ｂ蛋白阳性患儿与Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ表达量阳性患儿生后２８ ｄ ＮＢＮＡ评分比较无显著性差异，但分别与两者同时阳性的 患儿比较有显著性差异，提示血清Ｓ一１００Ｂ蛋白和Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ表达量同时阳性的患儿预后相对较差。所以两者同时 阳性能更好地反映ＨＩＥ脑损伤的程度且对预后判断有一定 价值。 综上所述，联合检测ＨＩＥ患儿血清Ｓ一１００Ｂ蛋白及Ｐａｒ一４ ｍＲＮＡ水平对早期判断新生儿缺血后脑损伤特异性更高，且 对早期判断预后有一定价值，据此可早期干预以期改善预后， 减少后遗症的发生。 ［ 参 考 文 献 ］ ［１］ 中华医学会儿科学分会新生儿学组．新生儿缺氧缺血性脑病诊 断标准［Ｊ］．中华儿科杂志，２００５，４３（８）：５８４ ［２］鲍秀兰，孙淑英，新生儿行为和０—３岁教育［Ｍ］．北京：中国 商业出版社，２００１：１０３—１０５ ［３］ 柳和华，李芳君．Ｓ～ＩＯＯＢ蛋白在新生儿缺氧缺血性脑病中的 临床应用进展［Ｊ］．现代生物医学进展，２０１０，１０（３）：５９０—５９２ ［４］ 陆超，陈吉庆，吴升华，等．新生儿ＨＩＥ外周血淋巴细胞中前列 腺凋亡反应基因４ ｍＲＮＡ检测的临床意义［Ｊ］．实用儿科临床 杂志，２００５，２０（４）：３３０—３３２ ［５］ Ｍｏｏｒｅ ＢＷ．Ａ ｓｏｌｕｂｌｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｏｆ ｔｈｅ ｎｅｒｖｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓｃｏｍｍｕｍ，１９６５，１９（６）：７３９—７４４ ［６］杨花芳，李清华，王克玲．Ｓ～ＩＯＯＢ和ＮＳＥ对新生儿ＨＩＥ诊断 和预后的意义［Ｊ］．河北医药，２００９，３１（１）：１７—１８ ［７］ 黄献文，曾鸿毅．新生儿缺氧缺血性脑病血清Ｓ—ＩＯＯＢ蛋白动 态变化及ｌ临床意义［Ｊ］．实用医学杂志，２００８，２４（１７）：２９９４— ２９９５ ［８］ 叶磊，陈礼刚．神经生化标志物Ｓ—ＩＯＯＢ的研究进展［Ｊ］．泸州 医学院学报，２００９，３２（３）：３０９—３ｌｌ ［收稿日期］２０１３—０８—１０
