艾滋病试验记录表格

附件1 河北省 初筛实验室HIV抗体检测标本登记表初筛标本编号性姓名别龄年地 址试剂及结初筛日期果检验者报备注告日期附件2 标本姓编名号河北省 初筛中心实验室HIV抗体检测接收标本登记表送检联初初筛日期送方告筛试剂检日法及结日及结果电话期果期系人及验收人报性年地别龄址 单位附件3 HIV抗体检测试验记录 编号试验方法：室温： 孵育温度： 标本数：试剂名称：生物梅里埃批号： 实验日期：试验起始时间：试验结束时间：实验步骤：效期：标本人群： 送检单位： 检测者： 复核者：1.样品、试剂、酶标板条室温平衡 分钟。2.取 条板条，放在板架上，撕去板条上的封条。3.在所有板孔中加入100µL的样品稀释液，包括要做质控的板孔。4.在确定的板孔中加入50µL的标本或质控。设3个阴性对照和1个HIV1阳性对照、1个HIV2阳性对照。在加入标本之后加入质控，并填写加样顺序表(见下表)。5.在微板上盖上贴膜，洗板前撕去贴膜，37℃孵育60分钟。6.在进行孵育的过程中，准备以下试剂：（1）洗液（1:25）：浓磷酸盐缓冲液 ml，加蒸馏水 ml 。（2）TMB底物液（1:1）：TMB ml，尿过氧化物 ml。（临用前配制）（3）1M硫酸：取 浓硫酸（98%浓硫酸相当于18M），加蒸馏水 ml。7.磷酸盐缓冲液浸泡板孔60秒，洗板机洗板，洗6次。8.每孔加入100µLTMB底物液，不要混匀或振荡，弃去多余的TMB底物液。9.室温 ℃环境中孵育30分钟，闭光显色。10.每孔加入100µL 1M硫酸，终止反应。11.在450nm和620nm双波长读取每孔的吸光度，并打印结果。 10 11 ABCDEFGH121 2 3 4 5 6 7 8 9 结果分析： 呈阳性反应，需复检；其余均为阴性反应。河北省性病艾滋病预防监测中心HIV抗体检测试验记录 编号试剂名称：金豪批号： 实验日期：试验起始时间：试验结束时间：实验步骤：效期：试验方法：室温： 孵育温度： 标本数：标本人群： 送检单位： 检测者： 复核者：1．样品、试剂、酶标板条室温平衡30分钟。2．将酶联反应板从密封袋中取出，取下 条板条，放在板架上。按顺序编号，设一个空白对照孔，两个阳性对照孔，两个阴性对照孔。 3．每孔加入50µl样品稀释液，取阳性对照和阴性对照分别充分混匀后各50µl加入对照孔中，空白对照孔只加样品稀释液，其余每个孔加待检血清50µl，（要先加样品，后加对照）轻轻振荡，充分混匀。并填写加样顺序表(见 表)。4．用不干胶封片封盖反应板，置37℃温育30分钟。5．温育期间配制洗涤液：取20×洗涤液 ml，加蒸馏水 ml。6．撕去贴膜，用洗涤液洗5次，然后在吸水纸上拍干。7．除空白孔外每孔加酶标抗原100µl，用不干胶片封盖反应板。37℃温育30分钟。8. 洗板5次(同步骤6)，拍干。9．每孔加显色剂A50µl ，显色剂B50µl，轻轻振荡后置37℃暗处显色10分钟，每孔加终止剂50µl。10．选择酶标仪450nm和620 nm双波长测定，用空白孔调零点，测定各孔的吸光度。并打印结果。 10 11 ABCDEFGH121 2 3 4 5 6 7 8 9 结果分析： 呈阳性反应，需复检；其余均为阴性反应。河北省性病艾滋病预防监测中心HIV抗体检测试验记录 试剂名称：上海科华批号： 实验日期：试验起始时间：试验结束时间：实验步骤：效期：试验方法：室温： 孵育温度： 标本数：编号标本人群： 送检单位：检测者： 复核者：1．将试剂盒、样本室温平衡30分钟；

2．取 条板条，固定于支架，按顺序编号，设2个空白对照，3个阴性对照和2个HIV阳性对照。空白对照孔不加样品和酶结合物，只加底物和终止液。在确定的板孔中加入100µL的标本或质控（要先加样品，后加对照）。并填写加样顺序表(见表)；

3．覆盖粘胶纸，置37℃孵育60分钟；

4．按1：25的比例稀释洗涤液，取 ml洗涤液，加入

ml蒸馏水；

5．取出已孵育完毕的反应板，弃去粘胶纸，吸干板内液体；

6．将洗涤液注满每孔(约300µl／孔)，吸干，反复5次，在干净纱布上将板拍干；

7．每孔加酶结合物1OOµl，取新粘胶纸覆盖反应板，置37℃孵育30分钟；

8．洗涤同步骤5、6；

9．每孔加入底物缓冲液50µl、TMB50µl，混匀，置37℃显色lO分钟；10．加终止液50µl振荡反应板5秒钟，使之充分混匀；

11．在酶标读数仪中，取波长450nm(建议使用双波长酶标仪比色，参考波长630nm), 以空白对照孔校零，读取每孔吸收值(加终止液后，务必在15分钟内读数完毕)。 10 11

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ABCDEFGH结果分析： 呈阳性反应，需复检；其余均为阴性反应。附件4HIV抗体检测试验记录 试剂名称：万泰批号： 实验日期：试验起始时间：试验结束时间：实验步骤：12.样品、试剂、酶标板条室温平衡15- 30 分钟。编号试验方法：酶联免疫效期：室温：25°C °C 标本人群： 送检单位： 检测者： 复核者：标本数：孵育温度：3713.取 条板条，放在板架上，撕去板条上的封条。14.在每孔中加入100µl酶标试剂，空白孔除外 。15.在确定的板孔中加入20µl的标本或阴阳性对照，震荡混匀。设1个空白对照，3个阴性对照和2个HIV 阳性对照 ，并填写加样顺序表(见下表)。16.在微板上盖上贴膜（洗板前撕去贴膜），37℃孵育60分钟。 17.配制洗涤液，取10Ⅹ浓缩洗涤液 ml，加去离子水 ml（1:10稀释）备用。18.磷酸盐缓冲液浸泡板孔60秒，洗板机洗板，每孔6次（程序已编号）。19.每孔加入显色剂A、B各50µl，轻轻振荡混匀 。20.封板膜封板后37℃闭光显色30分钟 。21.每孔加入100µl终止液，轻轻振荡混匀，终止反应。22.在450nm和620nm双波长读取每孔的吸光度，并打印结果。 10 11 ABCD121 2 3 4 5 6 7 8 9 0EFGH结果分析： 呈阳性反应，需复检；其余均为阴性反应。附件5HIV抗体检测试验记录 28 29 30 20 21 22 23 24 25 26 27 次 数1 图： Vironostika HIV Uni-Form II plus O 质控图 表： 用质控图监测每次试验的结果记录表质控Cut--off值S/CO值次数日期血清OD212223242526272