浅谈 急性心肌梗死(ami)的初期、准确、快速诊断对患者的及时救治和再灌注医治,减少心肌坏死,避免心脏突发事件,改善预后有着重要意义1。心肌梗死三项心肌肌钙蛋白i(ctni)、肌红蛋白(myo)、肌酸激酶同工酶(ck-mb)在ami 的检测中各有其优势,联合检测对临床诊治ami 具有很高的指导作用目前有许多联合测定心梗三项的方式,各方式测定结果是不是具有可比性,为此,本组实验以强生公司提供的vtros5600 全自动化学发光分析仪及其配套心肌标志物检测试剂为比较方式,上海贝西生物科技公司提供的美国原装入口的nano-check 心肌三联检测试剂板及配套检测系统为实验方式.观看nano-check 检测系统的灵敏度,特异性及总符合率,以评判两种方式测定ctni结果是不是具有一致可比性。现报告如下。
1 材料与方法
研究对象
2011 年1~2 月份来自本院病人的新鲜标本33 份,男性23 名,女性10 名,平均年龄69 岁。vtros5600 采用新鲜edta-k2 抗凝血浆测定,nano-check 采用病人的edta-k2 抗凝全血检测。
检测方法
1.2.1 nano-checktm poct 法
检测系统采用双抗体夹心法进行半定量测定,阳性时,出现紫红色检测线,颜色深浅与物质含量呈正比。试剂由上海贝西生物科技公司提供的美国原装进口的nano-check 心肌三联检测试剂板及配套检测系统同时检测ctni、myo、ck-mb. 每天进行室内质控。
vtros5600 化学发光法
测定系统用具有化学发光反应的物质标记抗原或抗体,标记后的抗原或抗体与待测物经过一系列的免疫反应和理化步骤,然后再加入酶底物或氧化剂,最后以测定发光强度形式测定待测物的含量。每天对仪器进行室内质控,试剂和质控均由强生公司提供。
判断标准
各项目参考值由试剂厂家提供。vtros5600:ctni 的参考值0~ ng/l,myo 的参考值0~101ng/l,ck-mb 的参考值0~ ng/l。nano-check:ctni 的参考值0~ ng/l,myo 的参考值0~107ng/l ,ck-mb 的参考值 ng/l。
统计学方法
数据分析采用chiss 统计软件包对数据进行卡方检验,得出p 值,以p< 差异具有统计学意义.同时计算nano-check 的灵敏度、特异度及总符合率。
2 结果
肌钙蛋白i 检测结果比较
表1 所示nano-check 比对vtros5600 的结果,nano-check 的灵敏度26%,特异度100%,总符合率58%。、
肌红蛋白检测结果比较
表2 所示 nano-check 比对vtros5600 的结果, nano-check 的灵敏度86%, 特异度%,总符合率88%。
ck-mb 检测结果比较
表3 所示 nano-check 比对vtros5600 的结果,nano-check 的灵敏度38%,特异度100%,总符合率76%。
3 讨论
ctn 只在心肌中表达,仅少量游离于胞浆内(3~5%),当心肌损伤时,游离于胞浆内的ctn快速释放入血循环引起血清ctn 水平升高2。心肌肌钙蛋白包括三个亚单位:ctnc、ctni、ctnt。心肌和骨骼肌的tnc 结构相同。tnt 和tni 在心肌和骨骼肌中的氨基酸序列分别有40%的差异,其异质体分别有不同基因编码,具有不同的氨基酸序列,有独特的抗原性,现在普遍应用到临床的测定方法基本建立在对ctni 和ctnt 的测定。本组研究结果显示两种方法所得结果p<,有显著统计学差异。nano-check 比对vtros5600 的结果, 其灵敏度(26%)、总符合率(28%)都比较差,特异性(100%)很好,主要是因为两种方法的灵敏度相差较多。化学发光具有很高的灵敏度,检出限为l,比免疫固相层析法中的双抗夹心法检测限降低一个数量级3。从原始数据得出vtros5600 测得阳性数值在 ng/l 以下的标本由nano-check 检测结果均为阴性,所以只有当血中ctni 明显升高时,两者所得结果才一致呈阳性。除此之外ctni 检测方法尚未标准化,ctni 浓度的检测也受到某些疾病的干
扰,其中包括,高血压、过度紧张、糖尿病、心率不齐、肺栓塞、败血症、药物中毒,淀粉样变等等,易造成假阳性结果。因此在实际诊断过程中,因注意此种现象;血清中的一些非特异性物质如:类风湿因子、抗属抗体、嗜异性抗体等均会造成ctni 假阳性。有时ctni 检测还会受到体内物质如血红蛋白和血红素的干扰4。上述影响因素对各仪器系统影响程度不同。
mb 存在于心肌和骨骼肌中,而且仅从肾小球滤液中清除,所以各种原因引起的肌病患者,长时间的休克,急慢性肾功能不全时mb 都会升高,致使mb 特异性差。由于mb 得分子量小,可以很快从破损的细胞中释放出来,在ami 发病后1~3 小时血中浓度迅速上升,可以作为ami 的早期标志。
本组数据显示nano-check 比对vtros5600 的结果,其具有较高的灵敏度(86%)、特异性(%)及总符合率(88%),两种方法测定mb 的结果统计学无明显差异(p>)。
ck-mb 是心肌中重要的能量调节酶,由于诊断窗较窄,无法对发病较长时间的ami 进行诊断,临床上可以利用这一点对再梗死进行诊断。同样由于测定方法灵敏度不同造成两种测定结果总符合率(76%)、灵敏度(38%)较低,结果差异(p<)具有统计学意义。
由原始数据发现vtros5600 测得阳性值小于 的标本,nano-check 测定结果均为阴性。ami起病急骤,必须及时诊断赢得宝贵治疗时间,采用poct 法测定心梗三项,检测快速、操作简便,尤其适合床边检测的需要。化学发光法因其具有灵敏度高、线性范围宽、标记物有效期长等特点4,备受广大实验室的青睐。应用不同方法检测血清标志物时,各实验室应根据自身情况设置各自的参考范围。尽量使操作标准化,避免干扰因素,注重与患者临床表现和其他实验结果进行综合分析。
参考文献
1 金宏伟,陈振胜,黄回滨,易火春.快速固相免疫层析法测定心肌肌钙蛋白i 及在ami 诊断中的应用j.标记免疫与临床,2008,15:11-13.
2 李华宇,刘傲雪,彭钰茹.两种心肌肌钙蛋白测定结果临床应用价值探讨j.吉林医学,2010(19):3031-3032.
3 王金良.心肌肌钙蛋白虽为金标准,尚需标准化j.中国实验诊断学,2004,10:8(5):6-7.
4 kricka l j. bibiography. luminescence literature. chemiluminescent and bioluminescent immunoassaysj. laminescence,2002,17:343-353.
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