土壤硝态氮和铵态氮的测定方法

土壤硝态氮测定方法

一、原理：

过滤后的样品经过一个开放的镀铜镉还原器通道后，根被还原成亚根，亚根通过磺胺处理后，与N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐偶联，形成深红色的偶氮染料，然后在550nm或者520nm比色分析。

二、样品处理

土壤鲜样采取四分法处理，根据实验用量进行过筛（比目大小视样品含水量而定）。过筛后的土样，取出5g土样放入离心管，加入25ml氯化钾提取液（2moL/L），震荡2小时后进行离心（8000 g ，15min），静置后过滤，取上清液测定。若不能及时测定，放入4℃冰箱保存。

三、试剂配制：

试剂用水：蒸馏水或去离子水。

（1）显色试剂：（棕色玻璃瓶，避光保存）

150ml水，加入25ml浓磷酸▲，冷却至室温后，加入10g磺胺，再加入0.5g N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐溶解。用水定容至250ml。加入2.0ml浓缩探针清洗液（表面活性剂）。 （2）氯化铵-EDTA缓冲液（ammonium chloride-EDTA）：

把85g氯化铵和0.1g 乙二胺四乙酸二钠盐（EDTA-Na2）溶解于水，定容至1L。用浓氨水▲调节PH至8.5。

（3）硝化组件缓冲液：{用来清洗OTCR(镀铜镉还原器通道)} 取100ml的氯化铵-EDTA缓冲液，稀释至1L。调节PH至8.5。 （4）2%硫酸铜：

10g 五水硫酸铜（CuSO4.5H2O）溶于水，定容至500ml。 （5）5mol/L盐酸：

小心慢慢加入50.69ml浓盐酸▲于水中，冷却后定容至100ml。 （6）盐存储溶液(1g/L)：（溶液6个月内有效）

7.218g钾溶于水，定容至1L，加入1ml氯仿▲（防腐剂）。 （7）比色管清洗液：（定容时缓慢，防止出现泡沫，室温保存,两个

月内有效）取50ml比色管清洗液，加水定容至1L。

（8）进样针清洗液：（定容时缓慢，防止出现泡沫，室温保存，两

个月内有效。）

取0.5ml进样针清洗液，加水定容至1L。 四、测定方法：

土壤硝态氮测定采用SmartChem全自动间断化学分析仪。

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土壤铵态氮测定方法

一、样品处理

土壤鲜样采取四分法处理，根据实验用量进行过筛（比目大小视样品含水量而定）。过筛后的土样，取出5g放入离心管，加入25ml KCL提取液（2moL/L），震荡2小时后进行离心（8000 g ，15min），静置后过滤，取上清液测定。若不能及时测定，放入4℃冰箱保存(最长保存期限28天)。

二、试剂配制：

试剂用水：蒸馏水或去离子水。空气中存在氨，易被吸收，故试剂用水不宜久放。

（1）苯酚钠溶液：（棕色玻璃瓶，避光保存，可稳定两周）

称取8g氢氧化钠▲，溶于水，待冷却到室温后，加入20.75g苯酚▲，定容至250ml。

（2）次氯酸钠溶液：（每日新鲜配制）

取25ml的安替福民（次氯酸钠溶液）▲，定容至50ml。 加入0.5ml浓缩的进样针清洗液，反转5次混合均匀。 （3）乙二胺四乙酸二钠盐（5%）：

溶解25g乙二胺四乙酸二钠盐，加入3粒氢氧化钠▲，稀释定容至500ml。加入3ml浓缩的进样针清洗液，反转5次混合均匀。 （4）硝普钠溶液：（棕色玻璃瓶，冷藏保存，每周更新）

溶解0.075g 二水合硝普钠▲（亚硝基铁），稀释定容至100ml。加入1.0ml浓缩的进样针清洗液，并反复5次混匀。 （5）储备溶液(1g/L，1000ppm)：溶解3.819g无水氯化铵，稀释定容至1L。 （6）比色管清洗液：

取50ml比色管清洗液，加水定容至1L。室温保存。

（定容时缓慢，防止出现泡沫,室温保存,两个月内有效。） （7）进样针清洗液：

取0.5ml进样针清洗液，加水定容至1L。

（定容时缓慢，防止出现泡沫,室温保存,两个月内有效。） 三、测定方法：

土壤铵态氮测定采用SmartChem全自动间断化学分析仪。 1、先用样品将样品杯润洗三次，再加入样品。

2、在相应试剂位加入相应试剂，将试剂倒入试剂瓶时要缓慢，防

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止气泡产生。

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