穿刺菌保存条件1001无标题
载体在含有冷冻保护剂的穿刺菌中保存，并于室温运输。收到穿刺菌后，可以直接置于-80℃。中长期保存。如需备份，则需要重新制备甘油菌。若短期储存，则可直接置于4℃。
穿刺菌来源于单克隆。建议客户收到穿刺菌后，请先在含有相应抗生素的LB平板上划线，然后挑取一个新鲜的单克隆于含有抗生素的LB液体培养基中进行培养。操作如下：取一个干净的移液器枪头，沿着穿刺管中淡黄色的大肠杆菌生长线插入，来回反复操作几次，每次都轻微改变枪头的方向，以尽可能的增加枪头与菌的接触面。将沾了菌的枪头在含有相应抗生素的LB平板上划线，将平板置于37℃培养箱中过夜培养。次日从LB平板上挑取一个单克隆接种到含有相应抗生素的LB液体培养基中，37℃摇床过夜培养。
可以直接将穿刺菌接种到含有抗生素的LB液体培养基中进行培养。但在极少数情况下，这种操作处理方式会导致从过夜培养物中提取出来的质粒DNA产量很低。划线挑取单克隆的方法可以很好地避免这种问题。
含有大片段、重复序列或者是不寻常的GC含量等序列的载体，可能会存在序列重组的潜在风险。将LB平板或LB液体培养基置于30℃培养可以降低这类载体的不稳定性。
因篇幅问题不能全部显示，请点此查看更多更全内容