第２８卷第１８期 甘肃科技 Ｇａｎｓｕ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｆ．２８ Ⅳ０．１８ ｓｅｐ． ２０１２ ２０１２年９月 丙肝病毒核心抗原检测临床应用研究 李 军 （青海省西宁市第二人民医院检验科，青海西宁８１０００３） 摘要：应用酶联免疫法分别检测丙肝病毒核心抗原（ＨＣＶ—ｃＡｇ）和抗体（ＨＣＶ—Ａｂ），了解丙肝病毒核心抗原检测 的意义。采用湖南康润公司生产的ＨＣＶ游离核心抗原试剂盒，对来自门诊或手术前筛查的８５０例临床样本进行了 ｔｆＣＶ—ｃＡｇ和ＨＣＶ—Ａｂ检测，阳性者用反转录多聚酶链反应（ＲＴ—ＲＮＡ）证实。８５０例筛查样本ＨＣＶ—Ａｂ阳性２２ 例，其中ＨＣＶ—ｃＡｇ阳性１４例，ｌｉｔ—ＲＮＡ阳性１６例；８２８例ＨＣＶ—Ａｂ阴性的样本检出ＨＣＶ—ｔＡｇ阳性４例，其中 ＲＴ—ＲＮＡ阳性３例。ＨＣＶ—ｃＡｇ与ＲＴ—ＲＮＡ符合率为８３．３３％（１５／１８）。ＨＣＶ核心抗原检出时间早于抗体，ＨＣＶ —ｃＡｇ检测试剂盒可作为ＨＣＶ抗体检测的补充试剂，敏感性高、特异性好、费用低廉。 关键词：丙肝病毒抗体；丙肝病毒核心抗原；反转录多聚酶链反应 中图分类号：Ｒ３７３．２ 丙型肝炎是由丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染引起 的一种重要的世界性传染病¨Ｊ，主要通过血液传 播。据统计全球已有１．７亿人受到感染，我国的丙 肝感染率大约为３．２％，而多数ＨＣＶ感染都是无症 状性的，少数引起急性肝炎的患者，其症状也比甲型 剂盒，按说明书上的方法操作，阳性结果经二次复 检。 １．２．２ ＨＣＶ—ｃＡｇ检测 采用湖南康润公司生产的商业化ＨＣＶ游离核 心抗原试剂，按说明书上的方法操作，阳性结果经二 次复检。 和乙型急性肝炎的症状轻。不幸的是，感染丙肝病 毒后形成慢性感染的机率很高，且有相当比例患者 以上２项均使用本科室ＮＥＸＧＥＮ—ＦＯＵＲ全自 会发展成肝硬化、肝癌。为此，较早检出丙肝病毒感 染，及时有效的阻断ＨＣＶ的传播是非常重要的。当 前国内外许多研究机构正在开发ＨＣＶ核心抗原 ＥＬＩＳＡ检测试剂盒，以替代窗口期较长的抗一ＨＣＶ 检测试剂盒。以便在血液筛查中缩短窗口期、在临 动酶免分析仪检测，也可使用手工法检测。 １．２．３ ＨＣＶ—ＲＮＡ检测 采用中山大学达安基因股份有限公司生产 ＨＣＶ核酸扩增（ＰＣＲ）荧光检测试剂盒进行反转录 床上达到早期诊断的目的。 多聚酶链反应（ＲＴ—ＰＣＲ）检测，按说明书上的方法 操作。对ＨＣＶ—Ａｂ检测与ＨＣＶ—ｃＡｇ检测中的阳 性标本复检，仪器使用美国ＡＢＩ—ｓｔｅｐｏｎｅ ＲＴ—ＰＣＲ 分析系统。 １资料与方法 １．１ 研究对象 标本来源：来自２０１２年１月１日一５月３１日ｆ－ｊ 诊或手术前进行病毒筛查的血液标本，共计８５０例， 这部分病例同时检测ＨＣＶ—Ａｂ和ＨＣＶ—ｃＡｇ。 １．２方法与试剂 １．２．１ ＨＣＶ—Ａｂ检测 ２结果 ８５０例筛查样本ＨＣＶ—Ａｂ阳性２２例，其中 ＨＣＶ—ｃＡｇ阳性１４例，ＲＴ—ＲＮＡ阳性ｌ６例；８２８例 ＨＣＶ—Ａｂ阴性的样本检出ＨＣＶ—ｅＡｇ阳性４例，其 中ｌｉｔ—ＲＮＡ阳性３例。ＨＣＶ—ｃＡｇ与ＲＴ—ＲＮＡ符 合率８５％（１７／２０），见表１。 例 采用上海科华公司生产ＨＣＶ抗体ＥＬＩＳＡ测试 表１ ＨＣＶ—Ａｂ、ＨＣＶ—ｃＡｇ、ＲＴ—ＲＮＡ检测结果 １５６ 甘肃科技 第２８卷 ＨＣＶ—ｃＡｇ检出率低的原因，可能是由于有抗体的 ３ 讨论 ＨＣＶ感染通常是持续性的终生感染，抗体检测 是一个非常有效的法。但因感染ＨＣＶ后，抗ＨＣＶ 出现较慢，一般情况下，抗体的血清学转换可以延迟 到暴露后几个月才发生ｕ Ｊ，此时可发生抗ＨＣＶ的假 阴性（也就是说在抗体可检出之前或在血清学转换 存在，干扰了抗原的检测或样本中的ＨＣＶ抗体可能 与用于核心抗原检测的单克隆抗体竞争结合抗原而 造成ＨＣＶ—ｔＡｇ的假阴性，为避免这种干扰，需对单 克隆抗体作进一步筛选或作丙肝核心总抗原检 测 。５２８例ＨＣＶ—Ａｂ阴性中，检出ＨＣＶ—ｃＡｇ阳 性４例，ＰＣＲ阳性３例。表明仅用ＨＣＶ—Ａｂ检测 之中即所谓的“窗口期”），故在早期诊断丙肝感染 上有困难。本研究８２８例ＨＣＶ—Ａｂ检测阴性的ｌ临 床样本中，检出ＨＣＶ—ｃＡｇ阳性４例，经ＨＣＶ— 将有可能存在感染者漏诊的风险，尤其是对手术前 丙肝病毒筛查的病例，它涉及到术中感染责任和用 血安全等问题，丙肝核心抗原检测在一定程度上降 低了这些风险。因此，认为ＨＣＶ核心抗原检测窗口 ＲＮＡ确认其中有３例阳性。表明“窗口期”的患者 因测不出ＨＣＶ—Ａｂ易被漏诊。反转录多聚酶链反 期短、敏感性好、特异性高、操作简便、快速，不需要 特殊的仪器，费用低廉，能达到早期诊断的目的，在 临床上有很好的推广前景。 参考文献： ［１］ Ｂｕｘ—Ｇｅｗ￣ｈｒ Ｉ，Ｓｃｈｍａｎｄｔ Ｓ，Ｚｏｔｚ ＲＢ，ｅｔ ａｌ Ｌｏｎｇｔｅｒｍ 应（ＲＴ—ＰＣＲ）是一个很敏感的方法。ＨＣＶ—ＲＮＡ 可以在暴露后的１—２周被检出 。另外，在一些 ＨＣＶ感染后恢复期的人群中，抗ＨＣＶ可能会逐渐 降低到检测限之下 Ｊ，或免疫功能低下的ＨＣＶ感染 者，抗ＨＣＶ会持续阴性，这时，ＨＣＶ—ＲＮＡ的检测 是感染的唯一证据。故使用ＲＴ—ＰＣＲ技术检测 ＨＣＶ—ＲＮＡ是判断感染最有效的方法。但其技术 ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｓｅ ｒｏｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ ｉｎ ａ ｂｌｏｏｄ ｄｏｎｏｒ［Ｊ］．Ｔｒａｎｓｆｕ－ ｓｉｏｎ，２００１，４１：４２７． ［２］ ＢｕｓｃｈＭＰ，Ｋｌｅｉｎｍａｎ ＳＨ，Ｊａｃｋｓｏｎ Ｂ，ｅｔ ａｌ Ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ ａｍｐ ｌｉｉｆｃａｔｉｏｎｔｅｓｔｉｎｇ ｏｆ ｂｌｏｏｄ ｄｏｎｏｒｓ ｆｏｒ ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ— 复杂，环境、条件要求较高，不易被多数实验室接受 和推广。ＨＣＶ核心抗原是ＨＣＶ感染者体内出现的 早期感染标志，几乎与ＨＣＶ ＲＮＡ同时出现。有报 道，ＨＣＶ—ｃＡｇ检测可以较ＨＣＶ抗体检出时间提早 ２３～４６ｄ Ｌ４ Ｊ且ＥＩＡ法较ＰＣＲ法简便、快速，现有能 ，ｔｒａｎｍｉｔｔｅｄ ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｄｉｓｅａｓｅｓ［Ｊ］．Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ，２０００，４０： １４３－１５９． ［３］ Ａｌｔｅｒ ＨＪ，ＳｅｅｆｆＬＢ Ｒｅｃｏｖｅｒｙ，ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｃｅ，ａｎｄ ｓｅｑｕｅｌａｅ ｉｎ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ：ａ ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ ｏｎ ｌｏｎｇ—ｔｅｒｍ 开展ＥＬ ＩＳＡ检测的实验室无需增加特殊设备，均可 检测。其结果，在被测的２２例ＨＣＶ—Ａｂ阳性样本 中ＨＣＶ—ｃＡｇ阳性１４例，ＨＣＶ—ＲＮＡ阳性１６例， 符合率为８５％。因此，在不具备ＲＮＡ检测条件的 实验室开展ＨＣＶ—ｃＡｇ检测是很好的筛查方法。２２ 例ＨＣＶ—Ａｂ阳性仅检出１４例ＨＣＶ—ｃＡｇ阳性， （上接第１５２页） ｏｕｔｃｏｍｅ［Ｊ］．Ｓｅｍｉｎ Ｌｉｖｅｒ Ｄｉｓ，２０００，加：１７－３５． ［４］ 王国华，张贺秋，李少波，等．丙型肝炎核心抗原检测 试剂的研制及初步应用［Ｊ］．中国输血，２００４，１７（５）： １１Ｊ４． ［５］盂淑芳，李秀华，尹红章，等．丙型肝炎病毒抗原检测 方法的建立［Ｊ］．中华实验和临床病毒学，２００１，１５ （３）：２８７－２９Ｏ． 要求工程桩应进行桩身质量检验，可用动测法检验， 抽检桩数应为总桩数的１００％。 然后，提升重锤高出填料口，先反复夯填建筑垃圾， 再填ｔｉ－０．３５ｍ 干硬性混凝土反复夯实。承载体密 实后，实测最后三击贯人度，每击的贯人度不大于前 击贯入，三击总贯人度，应满足设计要求，如不满足 ６结束语 １）复合载体夯扩桩具有承载力高、施工高效、 质量易保障等特点。 设计要求应继续填料夯击。最后以满足三击贯入度 要求为收锤标准。进入下一道工序，放钢筋笼，浇灌 混凝土成桩。 ２）复合载体夯扩桩施工时由于填人了干硬性 混凝土，并在端部经夯击，故在一般情况下，低应变 复合载体夯扩桩的检测分为承载力检测和完整 性检测两个方面，承载力检测要求桩基施工前应进 行单桩静载试验以确定单桩竖向承载力，试桩数不 少于总桩数的１％，且不得少于３根。完整性检测 反射信号呈反向反射。 ３）与其他地基处理方案相比，采用复合载体夯 扩桩能有效降低成本，尤其对于多高层民用建筑，其 优势更加明显，具有大规模推广的价值。
