一、实验动物的基本技能和实验技术基础 1、 实验动物的标记
大、小鼠和白色家兔的标记常用3~5%黄色苦味酸溶液涂于皮毛上标号。常用的方法:
1号 ---左前腿 2号 ---左腰部 3号 ---左后腿 4号 ---头部 5号 ---正中 6号 ---尾根部 7号 ---右前腿 8号 ---右腰部 9号 ---右后腿 10号 ---不标记
2、实验动物的捉持(大、小鼠)
(1)小鼠的捉持 用右手提起鼠尾,放在粗糙物(如鼠笼盖)上面,向后轻拉鼠尾;用左手拇指和食指捏住其两耳颈背部皮肤,将小鼠固定在掌中,使其腹部朝上,然后以无名指和小指夹住鼠尾或小鼠的左后肢。
(2)大鼠的捉持 捉持和固定方法基本同小鼠,无经验者可戴上防护手套,并应动作轻柔。用右手捉住鼠尾,放在鼠笼盖上,向后轻拉鼠尾;左手掌面向鼠背,食指和中指压住鼠的头顶,拇指和无名指分别从鼠的两腋下插入,将鼠的两前肢卡住;或拽紧鼠后颈及后背皮肤即可。
3、实验动物的给药方法(大、小鼠)
(1)小鼠的给药方法
灌胃(ig):将小鼠固定后,使颈部拉直,右手持装有灌胃针头的注射器,自口角插入口腔,压其头部,使口腔与食道成一直线,沿上腭壁向鼠口腔的后下方轻轻插入食道。如遇阻力,可将针头抽出再插,以免刺破食管或误入气管。一般给药量为0.1~0.3ml/10g(体重)。
皮下注射(H或sc):常在背部皮下。轻轻捏起背部皮肤,将注射针头刺入皮下,稍稍摆动针头,若容易摆动则表明针尖位于皮下。然后注入药液。一般给药量为0.1~0.20ml/10g(体重)。
腹腔注射(ip):左手固定动物,右手持注射器,从下腹部外侧,呈45度角刺入腹腔,进针约3~5mm,一般给药量为0.1~0.3ml/10g(体重)。
肌内注射(im):多注射于后肢股部肌肉,一般每侧不超过0.1ml。
尾静脉注射(iv):将小鼠置于固定筒内,使尾部露在外面,用70%~75%的乙醇棉球擦尾部,或将鼠尾浸入45~59ºC温水中,待尾部左右侧静脉扩张后,左手拉尾,右手进针。一般给药量为0.1~0.2ml/10g (2)大鼠的给药方法
均同小鼠。一般情况下,灌胃剂量为1~2ml/100g,皮下注射、尾静脉注射<1ml /只,腹腔注射为1.5ml /只,肌内注射为0.1~0.2ml/只。此外大鼠尚有舌下静脉给药的方法。
4、实验动物给药量的计算
(1)药物浓度的表示方法
溶液的质量(g)
百分浓度(%)=————————— ×100% 溶液的体积(ml)
(2)实验动物给药剂量一般按mg/kg(或g/kg)计算。为了方便,大鼠和豚鼠可按每100g计算,小鼠可按每10g计算。 给药剂量=药物浓度×给药体积
(3)给药容量的计算:从已知药的浓度和已知给药剂量算出相当于每1kg体重应给药的毫升数(ml)。
例:小鼠体重22g,腹腔注射盐酸吗啡10mg/kg,药物浓度为0.1%,应注射多少毫升? 药物浓度:0.1%=0.1g/100ml=100mg/100ml=1mg/ml 给药剂量:10mg/kg=10ml/kg 小鼠体重:22g=0.022kg 10ml/kg×0.022kg=0.22ml
或换算成ml/10g来计算较为方便:10ml/kg=0.1ml/10g。这样再计算其他小鼠的给药量就很方便。
5、实验动物的处死方法
(1)颈椎脱臼法 此法常用于小鼠。用左手拇指、食指或镊子用力压住小鼠的后头部,同时用右手抓住鼠尾用力向后上方牵拉,使之颈椎脱臼,鼠立即死亡。
(2)空气栓塞法 此法常用于家兔的处死。用注射器将空气快速注入静脉,可使动物立即死亡。
(3)击打法 适用于较小的动物,如家兔、大鼠和小鼠等。提起动物的尾部,用力敲击动物头部,或用要木锤打击头部,致使动物死亡。
(4)断头法 此法适用于蛙、蟾蜍、小鼠和大鼠。用剪刀将动物头部剪断,由于脊髓娄离且大量出血,动物很快死亡。
二、实验记录的内容和实验报告的写作 1、 实验记录
实验记录是将实验内容如实地记录下来,长期保存备用。其基本原则是真实、及时、准确、完整,实验过程中应认真做好实验记录。内容一般应包括: (1)时间、天气、温度;
(2)实验标本:动物的种类、体重、标记和标号及如何分组等。 (3)实验药物:药物的来源、批号、剂型、浓度、剂量及给药途径。 (4)实验进程、步骤和方法的详细记录。 (5)观测指标的变化和原始的描记图纸。 2、实验报告的写作
实验报告要实事求事地反映实验的基本过程,并要对实际所得结果进行整理、计算、统计学处理,然后进行科学地分析讨论,进一步阐明实验的目的和意义。一般包括以下内容: [实验目的]
[实验材料] 包括仪器、药品和动物。要尽可能详细、具体、明确。 [实验方法] 可简明扼要地叙述,但关键环节或步骤必须写清楚。
[实验结果] 应根据实验获得的数据进行整理,并可对一个教学实验小组或全实验室的数据进行整理、归纳、分析和对比,尽量总结出图表。尤其有观察时效关系的,描出时效曲线,一目了然。数据须进行统计学处理,选择的统计学方法要恰如,检验效率要高。
[讨论]和[结论] 讨论与结论是报告的核心,应包括对实验结果的分析、思考题的探讨、实验、实验方法及实验中出现异常现象的分析、认识、体会和建议等。
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