专利名称:体外培养制备AFP单克隆抗体的方法及其应用专利类型:发明专利
发明人:孙静静,程雷显,周伟伟,周雷鸣,赵巧辉,李桂林,付光
宇,吴学炜
申请号:CN201910203409.6申请日:20190318公开号:CN109897880A公开日:20190618
摘要:本发明公开了一种体外培养制备AFP单克隆抗体的方法,首先复苏杂交瘤细胞,制备种子细胞;将无菌的中空纤维系统内循环系统的进液端和PBS/培养基供应瓶连接,出液端和废液瓶连接,将中空纤维系统外循环系统的进液端和PBS/培养基供应瓶连接,出端和废液瓶连接用PBS和培养基对其进行润洗;然后将种子细胞导入;培养过程中持续进行葡萄糖和乳酸的监测,去除代谢废物,同时不断补充新鲜的培养基,采用20L桶进行培养基的储备,减少操作频次;收获的培养上清进行亲和纯化后得到抗体浓度5mg/mL,纯度95%以上的单抗成品。本发明制备的单抗特异性好,灵敏度高且效价高,用于AFP化学发光检测试剂盒中,能大大提高试剂盒的灵敏度、特异性和稳定性。
申请人:郑州伊美诺生物技术有限公司
地址:450016 河南省郑州市经济技术开发区第六大街133号1号厂房
国籍:CN
代理机构:郑州异开专利事务所(普通合伙)
代理人:王霞
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