HPLC法测定胃炎康胶囊中芍药苷尧盐酸小檗碱及甘草酸的含量

饮食保健摘要院目的院以HPLC法同时测定胃炎康胶囊中芍药苷尧盐酸小檗碱及甘草酸的含量遥方法院采用Agilent-C18(250伊4.6mm,5um)色谱柱袁以乙腈要0.5%三乙胺水溶液渊磷酸调节PH3.0冤为流动相袁梯度洗脱袁流速1.0ml?min-1,检测波长238nm,柱温30益遥结果院芍药苷尧盐酸小檗碱及甘草酸线性范围分别为20.58耀164.6袁21.15耀169.2袁30.12耀240.9mg?L-1(r逸0.9995);平均回收率渊n=9冤分别为99.5%渊RSD=0.82%冤,98.8%(RSD=0.92%),98.9%(RSD=1.2%)遥结论院该方法操作简单袁快速准确袁回收率好袁线性范围宽袁可以作为胃炎康胶囊中芍药苷尧盐酸小檗碱及甘草酸的含量测定方法遥关键词院胃炎康胶囊曰芍药苷尧盐酸小檗碱曰甘草酸曰高效液相色谱法胃炎康胶囊由甘草尧白芍尧桂枝尧高良姜尧黄连尧柴胡6味中药组成[1]遥具有舒肝和胃尧缓急止痛的作用袁白芍具有抗菌养血作用袁其指标成分为芍药苷曰甘草具抗菌养血作用袁其指标成分为甘草酸曰黄连具有泻胃火作用袁其指标成分为盐酸小檗碱遥为了控制胃炎康胶囊的质量袁本文采用HPLC方法同时测定其三个指标成分袁结果表明袁该方法简便袁灵敏袁准确袁重现性好遥1仪器与试药Agilent1260高效液相色谱仪袁配有在线脱气尧四元泵尧DAD检测器尧自动进样器曰METTLERMS105DU电子天平曰KQ-500B型超声波清洗器遥乙腈为色谱纯袁磷酸为分析纯袁水为纯化水遥对照品芍药苷渊110736-20093冤尧盐酸小檗碱渊110713-200910冤尧甘草酸铵渊批号110731-200614冤均来自中国食品药品检定研究院曰胃炎康胶囊样品为河南仲景药业股份有限公司生产袁批号130306遥2溶液制备2.1对照品溶液取对照品芍药苷20.58mg,盐酸小檗碱21.15mg袁甘草酸铵30.12mg,分别置100ml量瓶中[2]袁加50%甲醇溶解并稀释至刻度袁摇匀袁即得对照品储备液遥分别精密量取上述储备液各5ml置于25ml量瓶中袁加50%甲醇溶解并稀释至刻度袁摇匀制得芍药苷浓度为41.16ug窑mL-1,盐酸小檗碱42.30ug窑mL-1袁甘草酸铵60.24ug窑mL-1,的混合溶液遥2.2供试品溶液取本品20粒袁精密称定袁精密称取内容物0.6g,置50ml量瓶中袁加1%盐酸的甲醇要水渊50:50冤50ml,超声渊功率500W袁频率40KHZ冤处理30min,放冷袁加1%盐酸的甲醇要水渊50:50冤至刻度袁摇匀袁滤过袁即得遥3色谱条件色谱柱曰流动相院乙腈渊A冤-0.5%三乙胺水溶液渊磷酸调节PH3.0冤[3]袁梯度洗脱渊0-5min,20%A曰5-20min,20%A寅50%A曰20-25min,50%A寅50%A曰25-30min,50%A寅20%A)袁流速1ml窑min-1,检测波长238nm,柱温30益曰进样量20ul遥在上述色谱条件下袁样品中的各组分达到基线分离袁样品中其他成分对芍药苷袁盐酸小檗碱袁甘草酸的测定无干扰袁证明此色谱条件可行遥4方法学考察4.1线性试验分别精密量取芍药苷袁盐酸小檗碱袁甘草酸铵的对照品储备液1袁2袁4袁5袁8ml袁置同一50ml量瓶中袁用50%甲醇稀释至刻度袁制成混合对照品溶液袁按照3项色谱条件进行测定袁以浓度为横坐标袁相应峰面积为纵坐标袁进行线性回归袁方程结果如下:芍药苷,A=2.506伊104C-76.23,r=0.9999,线性范围20.58耀164.6mg窑L-1袁盐酸小檗碱袁A=窑L-4.128伊104C-90.26袁,r=0.9999袁线性范围21.15耀169.2mg1

袁甘草酸袁A=1.126伊104C-45.68袁,r=0.9995袁线性范围30.12耀240.9mg窑L-1遥4.2精密度试验精密量取同一混合对照品溶液20ul,按3项色谱条件连续进样6次袁记录芍药苷袁盐酸小檗碱袁甘草酸的峰面积袁RSD(n=6)分别为0.24%袁0.48%袁0.65%袁表明精密度良好遥4.3稳定性试验将供试品溶液室温下放置袁精密量取同一批号的供试品溶液分别于0袁2袁4袁6袁8h,进行测定袁芍药苷袁盐酸小檗碱袁甘草酸峰面积的RSD分别为0.78%袁0.85%袁1.2%袁结果表明供试品溶液在8h内基本稳定遥4.4样品含量测定与重复性试验取样品内容物6份袁按2.2项下方法制备供试品溶液袁按3项色谱条件进行测定袁计算芍药苷袁盐酸小檗碱袁甘草酸的平均含量渊n=6冤分别为1.675袁1.262袁2.150mg窑粒-1

袁RSD分别为1.2%袁0.87%袁1.1%遥4.5回收率试验精密称定已知含量的样品9份袁分成三组袁每组三份袁分别精密加入对照品溶液2ml,4ml,8ml袁混匀袁制成低袁中袁高3个浓度的供试品溶液袁按2.2制得供试品溶液袁分别进行测定袁计算回收率遥芍药苷袁盐酸小檗碱袁甘草酸平均回收率渊n=9冤分别为99.5%袁98.8%袁98.9%遥见表1表1回收率试验结果/%5讨论5.1超声提取比较100%甲醇袁50%甲醇袁加入1%盐酸的50%甲醇溶液及乙醇的提取率袁结果表明加入1%盐酸的50%甲醇溶液各成分提取率较高袁超声选择30分钟比较稳定遥5.2文献报道可用多种不同组成的流动相袁本文选择乙腈-0.5%三乙胺水溶液渊磷酸调节PH3.0冤梯度洗脱袁芍药苷袁盐酸小檗碱袁甘草酸峰的分离度达到要求袁其他杂质峰在35分钟之内全部出完遥参考文献1卫生部药品标准中药成方制剂第十三册.WS3-B-2564-972中华人民共和国药典2010年版渊一部冤院96,80,2853王发袁郭欢迎袁HPLC法测定复方甘草麻黄碱片中盐酸麻黄碱和甘草酸的含量.药物分析杂志袁2010,30:541077