常见蛋白酶抑制剂

之吉白夕凡创作

时间：二O二一年七月二十九日 当前位置：生物帮 > 实验技巧 > 生物化学技术 > 正文 蛋白酶及蛋白酶抑制剂大全

日期：2012-06-13 来源：互联网 标签：

相关专题：解析蛋白酶活性测定聚焦蛋白酶研究新进展

摘要 : 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以坚持蛋白质不被降解.在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以避免蛋白水解.以下列举了5种经常使用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各类蛋白酶对不合蛋白质的敏理性各不相同,因此需要调整各类蛋白酶的浓度

恩必美生物新一轮2-5折生物试剂大促销！Ibidi细胞灌流培养系统-模拟血管血液流动状态下的细胞培养系统广州赛诚生物基因表达专题

蛋白酶抑制剂

破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以坚持蛋白质不被降解.在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以避免蛋白水解.以下列举了5种经常使用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各类蛋白酶对不合蛋白质的敏理性各不相同,因此需要调整各类蛋白酶的浓度.由于蛋白酶

时间：二O二一年七月二十九日

时间：二O二一年七月二十九日

抑制剂在液体中的溶解度极低,尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀.在宝灵曼公司的目录上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表.

经常使用抑制剂 PMSF

1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);

2)10mg/ml溶于异丙醇中; 3)在室温下可保管一年;

4)任务浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L);

5)在水液体溶液中不稳定,必须在每一别离和纯化步调中加入新鲜的PMSF.

EDTA

1)抑制金属蛋白水解酶; 2)0.5mol/L水溶液,pH8~9; 3)溶液在4℃稳定六个月以上;

4)任务浓度:0.5~1.5mmol/L. (0.2~0.5mg/ml); 5)加入NaOH调节溶液的pH值,不然EDTA不溶解. 胃蛋白酶抑制剂(pepstantin)

时间：二O二一年七月二十九日

时间：二O二一年七月二十九日

l)抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶,血管紧张肽原酶,组织蛋白酶D和凝乳酶;

2)1mg/ml溶于甲醇中;

3}储存液在4℃一周内稳定,-20℃稳定6个月; 4)1作浓度:0.7ug/ml(1umol/L) 5)在水中不溶解.

亮抑蛋白酶肽(leupeptin)

1)抑制丝氨酸和巯基蛋白酶,如木瓜蛋白酶,血浆酶和组织蛋白酶B;

2)lOmg/ml溶于水;

3)储存液4℃稳定一周,-20℃稳定6个月; 4)任务浓度0.5mg/ml. 胰蛋白酶抑制剂(aprotinin)

1)抑制丝氨酸蛋白酶,如血浆酶,血管舒缓素,胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶;

2)lOmg/ml溶于水,pH7~8

3}储存液4℃稳定一周,-20℃稳定6个月; 4)任务浓度:0.06~2.0ug/ml(0.01~0.3umol/L);

时间：二O二一年七月二十九日

时间：二O二一年七月二十九日

5)避免频频冻融: 6)在pH>12.8时失活. 蛋白酶抑制剂混合使用

35ug/ml PMSF…………………………………丝氨酸蛋白酶抑制剂

0.3mg/ml EDTA…………………………………金属蛋白酶抑制剂

0.7ug/ml胃蛋白酶抑制剂(Pepstatin)…………酸性蛋白酶抑制剂

0.5ug/ml亮抑蛋白肽酶(Leupeptin)……………广谱蛋白酶抑制剂

经常使用蛋白酶抑制剂表

抑制剂 Antipain APMSF 靶蛋白酶 木瓜酶和胰酶 胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶 有效浓度 50μg/ml 10-40μg/ml或10-20μM 储藏溶液 注解 1mg/ml水溶液 对胰凝蛋白酶,胃液素,纤溶酶无影响 100mmol/L水溶液 毒性比PMSF低,不克不及抑制胰凝蛋白酶或乙酰胆碱酯酶 10mg/mlPBS溶液 溶于甲醇 溶于乙醇 溶于DMSO 500mmol/L水溶液避免频频动冻融 不克不及抑制羧肽酶 可渗透薄膜 不含EDTA 抑肽酶 抑氨肽酶B 丝氨酸蛋白酶 氨基肽酶 0.06-2μg/ml 40μg/ml Ⅰ:17μg/ml Ⅱ:7μg/ml 6-60μg/ml Calpain抑制剂Ⅰ、Calpain (钙依赖性Ⅱ 半胱氨酸蛋白酶) 抑糜朊酶素 胰凝乳蛋白酶 B.M.综合酶片 丝氨酸,半胱氨酸和每10-50ml细胞提金属蛋白酶 取液内加一片 EDTA 金属蛋白酶 0.2-0.5mg/ml或时间：二O二一年七月二十九日

时间：二O二一年七月二十九日

0.5-1.3μmol/L 抑蛋白酶醛肽 丝氨酸蛋白酶,巯基蛋白酶 a2-巨球蛋白 Pefabloc SC(boe- hringer Mannheim) 胃蛋白酶抑制剂 PMSF TLCK 广谱 丝氨酸蛋白酶 酸性蛋白酶 丝氨酸蛋白酶 胰蛋白酶 0.5-2μg/ml 1∪/ml 0.1-1.0mg/ml或0.4-4mmol/L 0.7μg/ml pH=8.0 10mg/ml水溶液 100∪/ml PBS 溶液 避免接触还原剂 100mM水溶液 1mg/ml甲醇溶液 无毒,在中性pH下较PMSF 稳定 17-170μg/ml 10mg/ml异丙醇溶液 每一操纵步调时新鲜加入 37-50μg/ml 1mg/ml溶于对胰凝蛋白酶无影50mMmol/L醋酸盐响 溶液,pH=5.0 3mg/ml乙醇溶液 对胰蛋白酶无影响 TPCK 胰凝乳蛋白酶 70-100μg/ml 作者：青岚点击：次 来源于-生物秀知道

首页实验实验中心经常使用蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)和磷酸酶抑制剂的贮存与任务液浓度

经常使用蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)和磷酸酶抑制剂的

贮存与任务液浓度

2014-06-09 23:01:02 来源：浏览次数：119 网友评论 0 条 [经常使用蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)和磷酸酶抑制剂的贮存与任务液浓度] 在与蛋白相关的检测中,首先最关头的一步即是蛋白质的提取.蛋白质的提取过程中,我们要经常加和蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)以避免蛋白质的降解.另外在磷酸化蛋白的研究过程中,磷酸酶抑制剂也是必不成少的,本文总结了

经

常

使

用

的

蛋

白

酶

抑

制

剂

(protease inhibitor)PMSF,Leupeptin 亮肽素,Aprotinin抑肽

时间：二O二一年七月二十九日

时间：二O二一年七月二十九日

酶,Pepstatin胃蛋白酶抑制剂(proteas [蛋白酶抑制剂 份子量 溶解性 磷酸酶抑制剂 任务浓度 贮存液 胰蛋白酶 丝氨酸]

在与蛋白相关的检测中,首先最关头的一步即是蛋白质的提取.蛋白质的提取过程中,我们要经常加和蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)以避免蛋白质的降解.另外在磷酸化蛋白的研究过程中,磷酸酶抑制剂也是必不成少的,本文总结了经常使用的蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)PMSF,Leupeptin 亮肽素,Aprotinin抑肽酶,Pepstatin胃蛋白酶抑制剂(protease inhibitor),EDTA-Na2等以及磷酸酶抑制剂NaF氟化钠,Na3VO4 原矾酸钠 ,BETA-glycerophosphate甘油磷酸钠,Na2P2O4 焦磷酸钠等.对这些蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)的溶解配制,贮存液与任务液浓度,保管都做了详细的说明.

蛋白酶抑制剂(protease inhibitor) PMSF：

特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂(protease inhibitor),如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶和凝血酶,也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶（可逆的地面处理）.

溶解性：溶于异丙醇,乙醇,甲醇和丙二醇果>10mg/ml.在水溶液中不稳定.在100%异丙醇, +25℃时稳定至少9个月份子量：174.2 使用：贮存浓度：200mM,任务浓度：1mM

时间：二O二一年七月二十九日

时间：二O二一年七月二十九日

Leupeptin 亮肽素

特性：抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶,木瓜蛋白酶,纤溶酶,和组织蛋白酶B

溶解性：高度溶于水（1mg/ml）.4℃一周稳定,分红小份冷冻在-20℃至少6个月

份子量：C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4:475.6 C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 x H2O:493.6

使用：贮存浓度：1mg/ml,任务浓度0.5 ug/ml (1mM) Aprotinin抑肽酶

特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂(protease inhibitor),抑制纤维蛋白溶酶,激肽释放酶,胰蛋白酶,糜蛋白酶的高活性.不抑制凝血酶或因子X.

溶解性：易溶于水（10mg/ml）或缓冲液（例如,tris,0.1M,pH8.0）.pH约7-8的溶液在4℃可保管1周,分装保管在-20℃可至少保管6个月.避免频频冻融, pH>12.8的碱性环境可使其灭活. 份子量：6,512

使用：贮存浓度:1mg/ml, 任务浓度：0.06–2.0 ug/ml(0.01–0.3 uM)

Pepstatin胃蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)

时间：二O二一年七月二十九日

时间：二O二一年七月二十九日

特性：抑制天冬氨酸（酸）蛋白酶如胃蛋白酶,肾素,组织蛋白酶D,凝乳酶,许多微生物酸性蛋白酶

溶解性：溶于甲醇约1mg/ml；可溶于乙醇,过夜溶解可达到1 mg/ml；在6当量乙酸中溶解度为300ug/ml.4℃稳定一周,分装储存于-20℃时可保管1个月 份子量： 685.9

使用：贮存浓度：1mg/ml,使用浓度：0.7 μg/ml(1 μM) EDTA-Na2

特性：金属蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)

溶解性：溶于水至0.5M,在pH8-9的条件下,4℃稳定至少6个月份子量: 372.24

使用：任务浓度：0.2–0.5 mg/ml(0.5–1.3 mM),不需现用现配,在溶液pH值调至8-9时再加入. 磷酸酶抑制剂 NaF氟化钠 溶解性：溶于水 份子量： 41.99

使用： 贮存液：5M 任务浓度：10-20mM Na3VO4 原矾酸钠

时间：二O二一年七月二十九日

时间：二O二一年七月二十九日

份子量：183.91

溶解性：溶于水,我们采办过来的是原矾酸钠.原矾酸钠需要经过处理以后才干成为激活的矾酸钠,激活的矾酸钠才具有抑制去磷酸化的作用.原矾酸钠酿成激活的矾酸钠的过程是:100mM原矾酸钠激活储存液配制

(1).取0.183克的原矾酸钠溶解于10ml的双蒸水中,加酸调节PH至10(颜色变黄) (2).煮至无色 (3).室温冷却 (4).重调PH至10

(5)重复（１）（２）（３）（４）直至溶液坚持无色,并且ＰＨ稳定于10,分装100ul/管,每10ml裂解液加一管.(终浓度为1mM),-20度保管.

使用： 贮存液：100mM 任务浓度：1mM BETA-glycerophosphate 甘油磷酸钠 溶解性：溶于水 份子量：306.11

使用：贮存液：100mM 任务浓度：25mM Na2P2O4 焦磷酸钠 溶解性：溶于水

时间：二O二一年七月二十九日

时间：二O二一年七月二十九日

份子量：265.9 贮存液：100mM, 任务浓度：1-2 mM 关头词：蛋白酶抑制剂份子量溶解性磷酸酶抑制剂任务浓度贮存液胰蛋白酶丝氨酸 时间：二O二一年七月二十九日 时间：二O二一年七月二十九日