第３６卷 第３期 ２ ０ １ ５年６月 渔业科学进展 Ｖ＿０ｌ＿３６．ＮＯ．３ Ｊｕｎ．。２０１５ ＰＲ０ＧＲＥＳ Ｓ ＩＮ ＦＩＳＨＥＲＹ ＳＣＩＥＮＣＥＳ ＤＯＩ：１０．１１７５８／ｙｙｋｘｊｚ．２０１５０３２１ ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｙｙｋｘｊｚ．ｃｎ／ 水产品中氯霉素 甲砜霉素、氟苯尼考、 氟苯尼考胺多残留的同时测定一ＧＣ／ＭＳ法木 邵 会２ 冷凯良 周明莹 高 华 孙伟红 邢丽红 苗钧魁 刘 坤 ① （１．中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛 ２６６０７１；２．山东协和学院医学院青岛 ２６６００３） 济南２５０１００； ３．青岛大学医学院摘要 采用气相色谱一质谱法建立基质加标标准曲线，对中国对虾、大菱鲆、鲫鱼、鳗鱼、蟹、 甲鱼６种主要养殖水产品肌肉组织中氯霉素类药物：氯霉素（ＣＡＰ）、甲砜霉素（ＴＡＰ）、氟苯尼考（ＦＦ） 及其代谢物氟苯尼考胺（ＦＦＡ）的多残留同时进行检测。结果显示，ＣＡＰ在２－２００ ｎｇ／ｍｌ浓度范围内， 线性关系良好；ＴＡＰ、ＦＦ和ＦＦＡ在５－２００ ｎｇ／ｍｌ浓度范围内，线性关系良好，其相关系数均大于 ０．９９０。加标回收率在７６．４％ｒ９４．３％之间，相对标准偏差在５．７％一１３．９％之间。检出限：ＣＡＰ为０．２￣ｔｇ／ｋｇ， ＴＡＰ、ＦＦ和ＦＦＡ均为１．０￣ｔｇ／ｋｇ。定量限：ＣＡＰ为０．５￣ｇ／ｋｇ，ＴＡＰ、ＦＦ和ＦＦＡ均为３．０￣ｇ／ｋｇ。研 究表明，该方法具有准确、高效、灵敏、特异性强的特点，可以满足水产品中ＣＡＰ、ＴＡＰ、ＦＦ和 ＦＦＡ多残留的同时检测的要求。 关键词 气相色谱一质谱法；氯霉素；甲砜霉素；氟苯尼考；氟苯尼考胺；水产品；多残留 Ａ 文章编号２０９５．９８６９（２０１５）０３．０１３７．０５ 中图分类号Ｘ８３６ 文献标识码氯霉素类药物是一类在兽医临床上用于治疗畜 禽以及水产动物细菌性疾病的广谱抗生素（陶昕晨等， ２０１２），主要包括氯霉素（ＣＡＰ）、氟苯尼考（ＦＦ）和甲砜 霉素（ＴＡＰ）。氯霉素虽有良好的抑菌作用，但会对人 体产生严重的毒副作用，使人体产生再生障碍性贫血 （李鹏等，２００６）。目前，氯霉素已被很多国家禁用于 食源性动物中。甲砜霉素是氯霉素的同类药物，抗菌 机制和抗菌谱均与氯霉素相似，但不会使人体产生再 生障碍性贫血，将逐步成为氯霉素的替代药（刘智宏 ２００２；栾鹏等，２０１２）。食品中氯霉素类药物残留不但 严重危害人类健康，也较大限制了我国水产品的出 口，水产品中氯霉素类药物残留问题一直备受人们关 注。氯霉素类药物残留的检测方法有较多报道，主要 包括气相色谱法（钟惠英等，２００６；刘永涛等，２００７）、 气相色谱一质谱法（李鹏等，２００６；冷凯良等，２００７）、高 效液相色谱法（张立军等，２００７；林荆等，２０１２）、液相 色谱一串联质谱法（张小军等，２０ １ ０）、酶联免疫法（张胜 帮等，２００６）、超临界流体萃取法（Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ，２０１０）等， 大多集中于检测一种或两种药物，同时检测可食性动 等，２０１０）。氟苯尼考作为氯霉素类广谱抗菌药的一种 新型药物，也是动物专用的抗生素类药物，具有广谱 抑菌作用，且毒副作用明显降低。氟苯尼考在动物体 内有多种代谢产物，其重要产物是氟苯尼考胺（ＦＦＡ）。 目前已有许多国家将氟苯尼考胺作为氟苯尼考的残 留标示物（Ｘｉｅ ｅｔ ａｌ，２０１１；丰培金，２０１０；Ｎｅｕｈａｕｓ ｅｔ ａｌ， 物组织中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺 残留的方法国内外报道较少（Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ，２００８；Ｓｈｅｎ ｅｔ ａｌ，２００９）。本研究建立了水产品中氯霉素类药物及 其代谢物氟苯尼考胺残留量同时检测的ＧＣ／ＭＳ法， 为可食性水产品中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考、氟 “十二五”国家科技支撑计划（２０１２ＢＡＤ２９Ｂ０６）资助。邵 会，Ｅ—ｍａｉｌ：ｓｈａｏｈｕｉ０９０４＠１６３．ｃｏｒｎ ①通讯作者：刘坤，教授，Ｅ－ｍａｉｌ：ｋｕｎｌｉｕ＠１２６．ｔｏｍ 收稿日期：２０１４—０４－２２，收修改稿日期：２０１４—０７—１１ 渔 业 科 学 进 展 第３６卷 苯尼考胺残留量的同时检测提供了准确性高、灵敏度 好、特异性强的检测方法。 外壳），取其可食部分匀浆，称取５．０ ｇ样品于５０ ｍｌ 离心管中，加乙酸乙酯一氨水（９８：２）２０ ｍｌ，涡旋１ ｍｉｎ， 超声提取２０ ｍｉｎ，４０００ ｒ／ｍｉｎ离心５ ｍｉｎ，取上清液 １材料与方法 １．１主要试剂与材料 于１００ ｍｌ鸡心瓶中，残渣中加乙酸乙酯一氨水（９８：２） ２０ ｍｌ，重复提取１次。合并两次上清液，加入５％乙 酸溶液３ ｍ１，振荡混匀，４０￣Ｃ下旋转蒸发至约１．５ ｍ１， 转入ｌ５ ｍｌ的离心管中，用１．５ ｍｌ ５％乙酸洗涤鸡心瓶 合并于离心管，加正己烷５ ｍｌ，涡旋混合，４０００ ｒ／ｍｉｎ 离心３ ｍｉｎ，弃掉上层正己烷相。下层水相再加正己 ＣＡＰ、ＴＡＰ、ＦＦ和ＦＦＡ标准品（含量均≥９９％） （Ｓｉｇｍａ公司）；衍生化试剂：Ｎ，Ｏ．双（三甲基硅烷基） 三氟乙酰胺（ＢＳＴＦＡ）：三甲基氯硅烷（ＴＭＣＳ）（９９：１）； 甲醇、甲苯、乙酸乙酯、正己烷、乙腈等试剂均为色 烷５ ｍｌ，重复脱脂１次。 谱纯；不含待测物残留的鲫鱼、大菱鲆、河鳗、中国 对虾、甲鱼和蟹６种水产品。 混合标准溶液配制：先用甲醇配制浓度为２００￣ｇ／ｍｌ 的标准混合贮备溶液，使用时再稀释成浓度为１￣ｇ／ｍｌ 的标准工作液。 １．２仪器与设备 气相色谱／质谱联用仪（Ａｇｉｌｅｎｔ公司，７８９０Ａ／ ５９７５Ｃ）；旋转蒸发设备（日本Ｔｏｋｙｏ Ｒｉｋａｋｉｋａｉ公司）； 超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；旋涡振荡 器（德国ＩＫＡ仪器公司）；Ｍｉｌｌｉ．Ｑ超纯水仪（美国密理博 公司）；离心机（德国Ｓｉｇｍａ公司），Ｏａｓｉｓ ＭＣＸ固相萃 取柱（Ｗａｔｅｒｓ，６０ ｍｇ，３ ｍ１），氮吹仪（美国Ｏｒｇａｎｏｍａｔｉｏｎ 公司）。 １．３样品检测条件 色谱条件：ＤＢ．５ ｍｓ石英毛细管柱（３０ ｍ￣０．２５ ｒｎｎｌ￣ ０．２５ ｒｕｎ）；载气：氦气（纯度／＞９９．９９９％）；流量：１．０ ｍｌ／ｍｉｎ； 进样量：ｌ ｌ；进样方式：无分流进样；进样口温度： ２２０℃；柱温：程序升温模式：初始柱温５０℃（保持 ｌ ｍｉｎ），以２５℃／ｍｉｎ升至２８０℃ｆ保持５ ｍｉｎ）。 质谱条件：负化学源 ＣＩ源）；离子源温度：１５０￣Ｃ； 接口温度：２５０℃；反应气：甲烷（纯度≥９９．９９％）；检 测模式：特征离子￣ｔＪ（ＳＩＭ）。各待测物特征离子见表１。 表１ ＣＡＰ、ＴＡＰ、ＦＦ和ＦＦＡ硅烷化衍生物 特征离子质荷￣（ｍ／ｚ） Ｔａｂ．１ Ｔｈｅ ｍａｓｓ—ｔｏ—ｃｈａｒｇｅ ｒａｔｉｏ（ｍ／ｚ）ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｉｏｎｓ ｏｆ ｔｈｅ ｓｉｌａｎｉｚａｔｉｏｎ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ ｏｆ ＣＡＰ，ＴＡＰ，ＦＦ ａｎｄ ＦＦＡ 为定量离子 Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｉｏｎ １．４提取与净化 鱼、虾、蟹等水产品去头部及鱼鳞（虾、蟹等去 固相萃取柱依次用甲醇３ ｍ１、水３ ｍ１活化，将 经正己烷脱脂后的提取液过柱，用５％乙酸溶液３ ｍｌ 淋洗离心管和小柱，弃去淋洗液，小柱抽干后用甲醇一 氨水（９０：１０）６ ｍｌ洗脱，收集洗脱液于１０ ｍｌ玻璃离 心管中。于５０—５５℃的砂浴中氮气吹至近干，再依次 用甲醇１ ｍｌ、乙酸乙酯１ ｍｌ洗涤离心管壁，氮气吹干。 １．５衍生化 在氮气吹干的提取物中加入乙腈２００ ｕｌ复溶，再加 入衍生化试剂１００ ，盖塞并涡旋混合１０ Ｓ，在６０￣Ｃ烘 箱中反应３０ ｍｉｎ。取出冷却至室温，在５０—５５℃的砂 浴中氮气吹干，准确加入甲苯０．５ ｍｌ，涡旋混匀，供 气相色谱一质谱测定。 １・６基质匹配标准曲线的绘制 准确移取１￣ｇ／ｍｌ氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考、 氟苯尼考胺标准混合工作液适量，分别加入６份经提 取、净化后的空白试料残渣中，混匀，按衍生化步骤 处理，配制成浓度为２、５、１０、５０、１００、２００ ｎｇ／ｍｌ 的基质匹配系列混合标准溶液，供气相色谱．质谱仪 测定。以测得定量离子峰面积为纵坐标，对应的标准 溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。 ２结果与讨论 ２．１样品提取溶剂的选择 氯霉素类药物微溶于水，易溶于有机溶剂如甲 醇、乙醇、乙腈、丁醇、丙酮、乙酸乙酯等，微溶于 苯与石油醚。水产品检测中有用乙酸乙酯一氨水（９８： ２，ｖ／ｖ）、三氯乙酸和乙酸乙酯等作为氯霉素类药物的 提取溶剂（刘智宏等，２０１０；刘永涛等，２００７；李鹏等， ２００６；王志杰等，２００９；殷平等，２００７）。但丙酮和乙腈 对人体的危害比较大，并且乙腈、丙酮挥干时间长、 容易冒泡（陶昕晨等，２０１２；康继韬等，２００５）。本研究 比较了乙酸乙酯、乙酸乙酯．氨水（９８：２，ｖ／ｖ）两种提 取溶剂，结果显示，乙酸乙酯．氨水（９８：２，ｖ／ｖ）对４ 第３’期 邵会等：水产品中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考、氟苯尼考胺多残留的同时测定一Ｇｃ／Ｍｓ法 １３９ 种药物的同时提取效率更高，且稳定性更强。所以确 定本方法提取剂为９８：２（ｖ／ｖ）的乙酸乙酯一氨水。 ２．２样品净化方法选择 水产品中残留药物的净化一般采用液．液萃取 （ＬＰＥ）和固相萃取（ＳＰＥ）两种方法（康继韬等，２００５）。氯 霉素、甲砜霉素、氟苯尼考脂溶性强，而代谢物氟苯 尼考胺极性强。由于极性的差异，普通固相萃取柱对 ４种药物同时净化效果均不理想。本研究比较了阳离 子交换固相萃取柱ＰＣＸ、ＭＣＸ柱以及反相吸附萃取 柱ＨＬＢ柱的净化效果，结果表明，Ｗａｔｅｒｓ Ｏａｓｉｓ ＭＣＸ 柱净化效果较好，这与已有的研究结果（Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ， ２００８；张伟玮等，２０１２；郭霞，２００７）相符。Ｏａｓｉｓ ＭＣＸ 固相萃取柱具有强阳离子交换和反相吸附的双重吸 附模式，ＣＡＰ、ＴＡＰ、ＦＦ具有脂溶性，可通过反相交 换机理保留在ＭＣＸ柱上；ＦＦＡ在酸性条件下呈离子 状态，可通过阳离子交换作用保留在ＭＣＸ柱上。 ＭＣＸ柱可同时满足以上两种吸附要求，从而达到净 化效果。 如 如 加＝２ ｍ ∞∞∞∞∞∞∞∞∞ ２．３衍生化方式及定容试剂的选择 本研究比较了以下４种方式：（１）乙腈复溶，衍 生化反应后，用０．５ ｍｌ甲苯定容后上机检测；（２）乙 腈复溶，衍生化反应后，再加０．５ ｍｌ甲苯和１．０ ｍｌ ０．５ ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ，混匀后离心，取有机层甲苯上机检测。 （３）乙腈复溶，衍生化反应后，用０．５ ｍｌ正己烷定容 后上机检测；（４）不加乙腈复溶，衍生化反应后，用 ０．５ ｍｌ正己烷定容后上机检测。从（３）、（４）的结果看出： 不加衍生化介质乙腈，ＦＦＡ响应值较低，ＣＡＰ、ＴＡＰ、 ＦＦ、ＦＦＡ ４种物质的线性都较差；从（１）、（３）的结果看 出：用乙腈作为衍生化介质，对４种物质而言，用甲 苯定容都较用正己烷定容响应值更高。所以本实验采 用方式（１）进行衍生化及定容。 沈美芳等（２００５）研究表明，当样品中含水量超过 １％时，衍生化试剂即可失效。故在加入衍生化试剂 之前，如果不能保证样品完全干燥，可将样品先置于 ８０℃烘箱中干燥２０ ｍｉｎ，再进行衍生化反应，以保证 衍生化试剂的高效性。 ２．４仪器条件选择 为了使４种物质的峰能够完全分开，本研究采用 程序升温法：初始柱温５０￣Ｃ（保持１ ｍｉｎ）以２５￣Ｃ／ｍｉｎ 升至２８０￣Ｃ（保持５ ｍｉｎ），可以实现４种物质的良好分 离，且峰形良好。参考国家标准（农业部９８５公告 １４．２００７），经多次试验，确定质谱条件为：负化学源； 接口温度：２５０℃；离子源温度：１５０￣Ｃ；反应气：甲 烷（纯度≥９９．９９％）。 由以上条件得到４种物质总离子流见图１。 赵 ＊ 蕊 器 ｌｏ．５ ｌ１．ｏ ｌ１．５ ｌ２．ｏ ｌ２。５ １３．０ １３．５ １４．０ ｌ４．５ １５．０ 时间Ｔｉｍｅ／ａｒｉｎ 图ｌ ＣＡＰ、ＴＡＰ、ＦＦ和ＦＦＡ标准品衍生物总离子流 Ｆｉｇ．１ Ｔｏｔａｌ ｉｏｎ ｄｉａｇｒａｍ ｏｆＣＡＰ，ＴＡＰ，ＦＦ ａｎｄ ＦＦＡ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ２．５监测离子的确定 卤素原子具有较强的电负性，故氯霉素类物质采 用负化学源检测，不仅可避免样品基质的干扰，且灵 敏度高，可得到峰形良好的色谱峰。方法将四极杆及 离子源温度均设为１５０￣Ｃ，得到的质谱图特征明显、 分子离子和碎片离子的丰度较大。 对ＣＡＰ、ＦＦ、ＴＡＰ、ＦＦＡ标准品硅烷化衍生物进 行全扫描，每种物质选择４个特征离子，其中ＣＡＰ： ｍ／ｚ ３７６、３７８、４６６、４６８ ＴＡＰ ｍ／ｚ４０９、４１１ ４９９、 ５０１；ＦＦ：ｍ／ｚ ３３９、３４１、４２９、４３１。与已有研究结果 （李鹏等，２００６；冷凯良等，２００７）相符。ＦＦＡ：ｍ／ｚ ２０９、 １９４、２１０、１０９，与郭霞（２００７）所述ＦＦＡ的４个特征 离子（ｍ／ｚ １９４、２０９、２１０、２２９）不同，在研究过程中 发现ＦＦＡ：ｍ／ｚ ２０９、１９４、２１０、１０９，受其他杂质的 干扰较小，定性准确，所以本研究确定ＦＦＡ的特征 离子为２０９、１９４、２１０、１０９。实验分别以ｍ／ｚ ４６６、 ４０９、３３９、２０９分别作为ＣＡＰ、ＴＡＰ、ＦＦ、ＦＦＡ的定 量离子，标准曲线效果最好，因此分别以４６６、３３９、 ４０９、２０９作为４种药物的定量离子。 ２．６方法线性范围 选择阴性水产品样品各６份，每种水产品中分别 加人ＣＡＰ、ＴＡＰ、ＦＦ、ＦＦＡ的０．１ ｇｇ／ｍｌ混合标准中 间液１０、２５、５０、２５０、５００、１０００ ｐｌ（即浓缩浓度分 别为２、５、１０、５０、１００、２００ ｎｇ／ｍ１），按照方法１．４ 进行前处理，衍生化后ＧＣ／ＭＳ法测定。以被测物色 谱峰响应值为纵坐标，被测物浓度为横坐标，建立基 质加标标准曲线，可有效消除基质效应的影响。ＣＡＰ 在２－２００ ｎｇ／ｍｌ，ＴＡＰ、ＦＦ和ＦＦＡ在５－２００ ｎｇ／ｍｌ浓 度范围内，其色谱峰响应值与其浓度均呈良好线性关 １４０ 渔 业 科 学 进 展 第３６卷 系，相关系数均大于０．９９０。 ２．７方法回收率、检出限和定量限 为考察方法的重现性和准确度，本研究以阴性水 产品为检测对象，进行了加标回收率和精密度实验。分 别按照组织中药物浓度ＣＡＰ为０．２、０．５、２．５、５．０ ｇｇ／ｋｇ， ＴＡＰ、ＦＦ和ＦＦＡ为１．０、３．０、１５．０、３Ｏ．０ ｐｇ／ｋｇ进行 添加，每个浓度设６个平行，混匀，静置１５ ｍｉｎ后， 按照方法１．４和１．５进行处理，取１．０ ｇｌ ＧＣ—ＭＳ测定。 实验结果显示，在上述加标浓度下，鲫鱼、大菱鲆、 河鳗、甲鱼、蟹、中国对虾６种水产品中氯霉素的平 均回收率在８５．２％一９９．６％之间；甲砜霉素、氟苯尼考 和氟苯尼考胺的平均回收率分别为８１．１％一９８．４％、 ８０．１％一９７．８％、７７．１％一９６．６％，且变异系数均小于 １５％，结果重复性好，添加回收率高，方法的准确度 和精密度可以满足药残检测的要求。 通过阴性水产品样品中添加标准品的方法进行 检出限和定量限实验。结果显示，ＣＡＰ添加水平为 ０．２ ｐ，ｇ／ｋｇ时，平均信噪比ＳＡＶ＝３．９，由此可以确定，本方 法氯霉素的检出限为０．２￣ｔｇ／ｋｇ；当添加水平为０．５￣ｔｇ／ｋｇ 时，本方法可定量检出，Ｓ／Ｎ＝１２．５，由此可以确定本 方法ＣＡＰ的定量限为０．５ ｇｇ／ｋｇ。ＴＡＰ、ＦＦ和ＦＦＡ添 加水平为１．０￣ｇ／ｋｇ时，本方法仍可定性检出，３种药 物的Ｓ／Ｎ分别是４．９、５．６和４．０，由此可以确定本方 法ＴＡＰ、ＦＦ和ＦＦＡ的检出限为１．０ ｇｇ／ｋｇ；当添加水 平为３．０￣ｔｇ／ｋｇ时，本方法可定量检出，３种药物的 Ｓ／Ｎ均大于１０，由此可以确定本方法ＴＡＰ、ＦＦ和ＦＦＡ 的定量限为３．０］ｘｇ／ｋｇ。 ３ 结语 在阴性鲫鱼、大菱鲆、河鳗、甲鱼、蟹、中国对 虾６种水产品样品中采用添加法进行实测，ＣＡＰ在２— ２００ ｎｇ／ｍｌ浓度范围内，ＴＡＰ、ＦＦ和ＦＦＡ在５－２００ ｎｇ／ｍｌ 浓度范围内具有良好的线性关系，其相关系数均大于 ０．９９０。加标回收率在７６．４％一９４．３％之间，相对标准偏 差在５．７％一１３．９％之间。检出限：ＣＡＰ为０．２ ｇｇ／ｋｇ，ＴＡＰ、 ＦＦ和ＦＦＡ均为１．０ ｇｇ／ｋｇ。定量限：ＣＡＰ为０．５ ｇｇ／ｋｇ， ＴＡＰ、ＦＦ和ＦＦＡ均为３．０￣ｇ／ｋｇ。结果重复性好，添 加回收率高，可以满足水产品中ＣＡＰ、ＴＡＰ、ＦＦ和 ＦＦＡ多残留的同时检测的要求。 参 考 文 献 中华人民共和国国家标准．农业部９５８号公告．１４．２００７．水产 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ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ— ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ．Ｊ Ｃｈｒｏ． ｗｉｔｈ ｆｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ．Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ｂ，２０ １ １，８７９（２３）： ２３５１＿２３５４ Ｚｈａｎｇ Ｓ，Ｌｉｕ Ｚ，Ｇｕｏ Ｘ，ｅｔ ａ１．Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｏｎｆｉｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ，ｔｈｉａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ，ｆｌｏｒｆｅｎｉｃｏｌ ａｎｄ ｆｌｏｒｆｅｎｉｃｏｌ ａｍｉｎｅ ｉｎ ｃｈｉｃｋｅｎ ｍｕｓｃｌｅ ｂｙ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏ— ｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ｔａｎｄｅｍ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ．Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ｂ， ｍａｔｏｇｒ Ｂ，２００９，８７７（１４）：１５２３—１５２９ ２００８，８７５（２）：３９９－４０４ （编辑刘丛力） Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ，Ｔｈｉａｍｐｈｅｎｉｅｏｌ， Ｆｌｏｒｆｅｎｉｃｏｌ ａｎｄ Ｆｌｏｒｆｅｎｉｃｏｌ Ａｍｉｎｅ Ｒｅｓｉｄｕｅｓ ｉｎ Ａｑｕａｔｉｃ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｗｉｔｈ Ｇａｓ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ／Ｍａｓｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ ＳＨＡＯ Ｈｕｉ ，ＬＥＮＧ Ｋａｉｌｉａｎｇ ，ＺＨＯＵ Ｍｉｎｇｙｉｎｇ ，ＧＡＯ Ｈｕａ３ＳＵＮ Ｗｅｉｈｏｎｇ ， ，ＸＩＮＧ Ｌｉｈｏｎｇ ，ＭＩＡＯ Ｊｕｎｋｕｉ ，ＬＩＵ Ｋｕｎ ① （１．Ｙｅｌｌｏｗ Ｓｅａ Ｆｉｓｈｅｒｉｅｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙ ｏｆＦｉｓｈｅｒｙ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｑｉｎｇｄａｏ ２６６０７１；２．ＳｈａｎｄｏｎｇＸｉｅｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｊｉｎａｎ ２５０１００；３．Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆＱｉｎｇｄａｏ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｙｔ，Ｑｉｎｇｄａｏ ２６６００３） Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｗｅ ｕｓｅｄ ｍａｊｏｒ ａｑｕａｔｉｃ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｉｎ ｃｈｉｎａ（Ｐｅｎａｅｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ，ｔｕｒｂｏｔ，ｃａｒｐ，ｒｉｖｅｒ ｅｅｌｓ。ｃｒａｂｓ ａｎｄ ｔｕｒｔｌｅｓ）ａｓ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａ１ ｍａｔｅｒｉａｌｓ ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｒｅｓｉｄｕｅｓ ｏｆ ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ ｄｒｕｇｓ［Ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ（ＣＡＰ），Ｔｈｉａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ（ＴＡＰ），Ｆｌｏｒｆｅｎｉｃｏｌ（ＦＦ）ａｎｄ ｉｔｓ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ．Ｆｌｏｒｆｅｎｉｃｏｌ ａｍｉｎｅ（ＦＦＡ）１ ｉｎ ｔｈｅ ｍｕｓｃｌｅ ｔｉｓｓｕｅｓ ｏｆ ａｑｕａｔｉｃ ｐｒｏｄｕｃｔｓ，ａｎｄ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ Ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．Ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．Ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ ａｎｄ ａｍｍｏｎｉｕｍ ｈｙｄｒｏｘｉｄｅ ｆ１，：１，＝９８：２ ，ｄｅｇｒｅａｓｅｄ ｗｉｔｈ ｎ－ｈｅｘａｎｅ，ａｎｄ ｆｕｒｔｈｅｒ ｄｅｆａｔｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ Ｏａｓｉｓ ＭＣＸ ｓｏｌｉｄ ｐｈａｓｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃａｒｔｒｉｄｇｅ．Ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｚｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｓｉｌａｎｉｚａｔｉｏｎ ｒｅａｇｅｎｔ ａｎｄ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ（ＮＣＩ）．Ｔｈｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｉｏｎ ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ ｍｏｄｅ（ＳＩＭ）ｗａｓ ａｐｐｌｉｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．Ｔｈｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｉｏｎｓ ｏｆ ｔｈｅ ｆｏｕｒ ｄｒｕｇｓ ｗｅｒｅ ａｓ ｂｅｌｏｗ：ＣＡＰ ｍ／ｚ ３７６．３７８ ４６６＊ ４６８； Ｐ ｍ／ｚ ４０９ ，４１ｌ，４９９，４１１；ＦＦ ｍ／ｚ ３３９ ，３４１，４２９，３４１；ＦＦＡ ｍ／ｚ ２０９ ，１９４，２１０，１９４（ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｉｏｎ）．Ｔｈｅ ｍａｔｉｘ ｓｐｉｒｋｅｄ ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ ｃｕｒｖｅ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．Ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ａ ｃｌｅａｒ ｌｉｎｅａｒ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅｓ ｏｆ ２－２００ ｎｇ／ｍ１ ｆｏｒ ＣＡＰ ａｎｄ ５－２００ ｎｇ／ｍｌ ｆｏｒ ＴＡＰ，ＦＦ ａｎｄ ＦＦＡ．ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｍｏｒｅ ｆｔｈａｎ ０．９９０．Ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ ７５％－１ １０％．ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎ ｗａｓ ５．７％－１３．９％．Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｌｉｍｉｔ ｗａｓ ０．２ ｇｇ／ｋｇ ｆｏｒ ＣＡＰ，ａｎｄ １．０￣ｇ／ｋｇ ｆｏｒ ＴＡＰ，ＦＦ ａｎｄ ＦＦＡ．Ｔｈｅｓｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ＧＣ Ｓ ｍｅｔｈｏｄ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ａｃｃｕｒａｔｅ．ｅｆｊｆｉｃｉｅｎｔ．ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ａｎｄ ｈｉｇｈｌｙ ｓｐｅｃｉｉｃ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ ｆｉｔ ｍａｙ ｓａｔｉｓｆｙ ｔｈｅ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｆｏｕｒ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｉｎ ａｑｕａｔｉｃ ｐｒｏｄｕｃｔｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ Ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ印ｈｙ／ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ（ＧＣ／ＭＳ）；Ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ；Ｔｈｉａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ； Ｆｌｏｒｆｅｎｉｃｏｌ；Ｆｌｏｒｆｅｎｉｃｏｌ ａｍｉｎｅ；Ａｑｕａｔｉｃ ｐｒｏｄｕｃｔｓ；Ｍｕｌｔｉ．ｒｅｓｉｄｕｅ ①Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：ＬＩＵ Ｋｕｎ，Ｅ．ｍａｉｌ：ｋｕｎｌｉｕ＠１２６．ｅｏｍ
