第７期（总第３５８期） ２０１４年７月 农产品加工（学刊） Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｅｒｉｏｄｉｃａｌ ｏｆ Ｆａｒｍ Ｐｒｄｕｃｔｓｏ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ Ｎｏ．７ Ｊｕ１． 文章编号：１６７１—９６４６（２０１４）０７ａ一００６８—０３ 葡萄籽蛋白的研究进展 牛红军 ，李建文。，李 军 ， 杨官娥 （１．天津现代职业技术学院，天津３００３５０；２．山西医科大学药学院，山西太原０３０００１） 摘要：葡萄籽蛋白是优质的蛋白质资源，是具有特有生物活性的蛋白质和多肽的重要来源。对葡萄籽蛋白的理化性 质、生物活性、制备方法和葡萄籽多肽进行总结分析，为葡萄籽蛋白产品的进一步开发和应用提供借鉴与参考。 关键词：葡萄籽；蛋白质；生物活性；生产工艺；多肽 中图分类号：ＴＱ９３６．１ 文献标志码：Ａ ｄｏＪ：１０．３９６９／ｊｉｓｓｎ．１６７１—９６４６（Ｘ）．２０１４．０７．０２１ Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｆ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｎ Ｇｒａｐｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ ＮＩＵ Ｈｏｎｇ－ｊｕｎ ，ＬＩ Ｊｉａｎ－ｗｅｎ２，ＬＩ Ｊｕｎ２，＊ＹＡＮＧ Ｇｕａｎ－ｅ （１．Ｔｉａｎｊｉｎ Ｍｏｄｅｒｎ Ｖｏｃａｔｉｏｎａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｔｉａｎｊｉｎ ３００３５０，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ Ｓｈａｎｘｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔａｉｙｕａｎ，Ｓｈａｎｘｉ ０３０００１，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｇｒａｐｅ ｓｅｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｓ ａ ｈｉｇｈ－ｑｕａｌｉｔｙ ｐｒｏｔｅｉｎ ｒｅｓｏｇｒｃｅｓ，ａｎｄ ａｌｌ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｓｏｕｒｃｅ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｄ ｐｏｌｙｐｅｐｆｉｄｅ ｈａｓ ｕｎｉｑｕｅ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ ｓｕｍｍａｒｉｚｅｓ ｔｈｅ ｐｈｙｓｉｅｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｇｒａｐｅ ｓｅｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ，ａｓ ｗｅｌｌ ａｓ ｇｅｎｅｒａｌ ｓｉｔｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｒａｐｅ ｓｅｅｄ ｐｏｌｇｙｐｅｐｔｉｄｅ，ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ａｄｖａｎｃｅ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｒａｐｅ ｓｅｅｄ ｇｐｒｏｔｅｉｎ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｇｒａｐｅ ｓｅｅｄ；ｐｒｏｔｅｉｎ；ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ；ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ；ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ ０引言 １葡萄籽蛋白概况 我国是世界上重要的葡萄种植和葡萄类产品生 １．１理化性质 产国之一，每年食用和生产加工会产生大量的葡萄籽 和葡萄皮等副产物。葡萄籽占鲜果质量的４％ ７％ｔ”， 其含有丰富的脂类、多酚类和蛋白质类化学物质， 具有抗肿瘤、抗氧化、抗辐射和保护心血管等药理 学活性。葡萄籽中粗蛋白含量达８．９０％，是优质的蛋 白质资源。葡萄籽蛋白质中各种氨基酸含量明显高 于中国居民膳食营养素参考摄入量的建议服用量［２－３１， 缬氨酸、精氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸含量都相当于 大豆蛋白中的含量，可用于生产强化食品、滋补剂、 保健药物等。此外，谷氨酸含量为１９．６２％，较大豆 高，可用于生产味精州。葡萄籽蛋白质水解后可生成 大量易被人体消化吸收的多肽，这些生物活性肽具 有许多独特生理功能 。目前，关于葡萄籽的研究 和应用多集中于脂类和多酚类，而关于葡萄籽蛋白 质的报道较少，本文对葡萄籽中蛋白质类成分予以 介绍，为促进葡萄籽的综合利用，增加经济效益和 社会效益提供理论支持。 葡萄籽蛋白质由１８种氨基酸组成，其中包括人 体必需的全部８种氨基酸。葡萄籽蛋白质的等电点 为ｐＨ值３．８。大部分葡萄籽蛋白质的分子量范围在 ４Ｏ～７０ ｋＤａ，在约４０，５０和７０ ｋＤａ分子量附近存在 较明显的条带用。 葡萄籽蛋白起泡性和泡沫稳定性：起泡性是食 物蛋白质的一种重要功能性质，影响着食品的品质； 泡沫稳定性是评价蛋白质起泡性的重要指标。影响 葡萄籽蛋白起泡性的主要因素有：①葡萄籽蛋白浓 度。质量分数为０．２％～０．８％时，随着质量分数增大， 蛋白质发泡力总体上呈现增加的趋势，泡沫稳定性 也随之增强；但当质量分数达０．６％～０．８％时，泡沫 稳定性趋于稳定。②ｐＨ值。在ｐＨ值２．０～４．０，随 ｐＨ值增大时，蛋白质发泡力下降，泡沫稳定性增 加，达到最高；在ｐＨ值４．０～８．０，随ｐＨ值增大时， 发泡力明显提高，而泡沫稳定性相对于ｐＨ值４．０时 有所下降。③ＮａＣ１质量分数。ＮａＣ１质量分数在 收稿日期：２０１４—０４—３０ 基金项目：国家自然科学基金（３０６７２６２１，８１１７３４７３）；山西省自然科学基金（２０１００１１０４８—２）； 天津现代职业技术学院科研课题（２０１４１９）；山西医科大学青年基金（０２２０１１２４，０２２０１１２８）。 作者简介：牛红军（１９８１一），男，硕士，讲师，研究方向为生物制药。 通讯作者：杨官娥（１９６７～），女，博士，教授，研究方向为中药药效物质。 ２０１４年第７期 牛红军，等：葡萄籽蛋白的研究进展 ・６９・ ０．４％ ０．８％和１．６％一２．０％这２个区间时，发泡力变 中提取蛋白质的工艺，并利用正交试验优化工艺参 化不大，泡沫稳定性总体上呈先降低后升高的趋势。 数，发现提取葡萄籽蛋白的最佳工艺参数为葡萄籽 ④蔗糖浓度。蔗糖浓度增加时，葡萄籽蛋白的发泡 力会先下降，稳定后又表现下降趋势；泡沫稳定性 不断增加『８１。 １．２生理活性 葡萄籽蛋白提取物能诱导白血病细胞凋亡。首 先，在葡萄籽蛋白的刺激下，将产生负责调节细胞 生命周期的ＪＮＫ激酶，接着ＪＮＫ激酶调节细胞死亡 的信号传输路径，最终引发白血病细胞凋亡翻。王 芍㈣利用Ｍｒｒｒ实验检测了葡萄籽糖蛋白对脾细胞增 粉４Ｏ目，用ｐＨ值１０的ＮａＯＨ溶液，按１：１０的料 液比，在５５℃条件下搅拌浸提４５ ｍｉｎ，该条件下的 葡萄籽蛋白提取率为６７．１４％。但考虑经济性因素和 工业化生产操作的可行性，提取条件调整为ｐＨ值 ９，按１：１０的料液比，在５０℃条件下浸提４５ ｍｉｎ， 此时蛋白质提取率为６２．９ｌ％。 ２．３．２盐提酸沉法 将葡萄籽粕倒人适当浓度的ＮａＣ１溶液中搅拌， 控制浸提温度和料液比，浸提一定时间后，离心或 殖的影响，结果表明葡萄籽粗品糖蛋白有增强免疫 的功能，当质量浓度为３００ ｐ￣ｇ／ｍＬ时能显著促进脾 细胞增殖；分离纯化后，得到一种有较强免疫活性 的糖蛋白，该糖蛋白的多糖含量为９．２６％，蛋白质含 量为８５．６７％；单糖为鼠李糖、阿拉伯糖、木糖和半 乳糖，各种多糖比例为１：７．６：４．２：１．５。 ２葡萄籽蛋白生产工艺 ２．１工艺流程 葡萄籽蛋白的生产工艺流程： 葡萄籽一晒干一干葡萄籽一粉碎一葡萄籽粉一脱脂一脱 脂葡萄籽粉一浸提一葡萄籽蛋白提取液一等电点沉淀离心一 葡萄籽蛋白沉淀一干燥一葡萄籽蛋白。 ２．２葡萄籽的预处理 从酿酒厂或饲料加工企业处获得生产下脚料中 的葡萄籽，在日光下晒干至含水量小于１０％后用粉 碎机粉碎并过筛，筛子规格为４０目或５Ｏ目。加人 石油醚或乙醚，磁力搅拌脱脂，使用过滤或离心的 方法使固相和液相分离，即可得到葡萄籽油提取液 和脱脂葡萄籽粕。 在葡萄籽蛋白提取过程中可不进行脱脂操作， 但脱脂是综合利用葡萄籽，充分挖掘葡萄籽经济价 值和提高葡萄籽蛋白纯度的有效手段。葡萄籽油提 取液经脱酸、脱色和脱臭等处理后可制得富含亚油 酸的精制葡萄籽油『１１】。如原料为脱脂葡萄籽，则本工 艺中不再进行脱脂操作。 ２．３提取 ２．３．１碱溶酸沉法 将脱脂葡萄籽粕倒人适量的ＮａＯＨ溶液中，在 适当温度下浸提一定时间后，离心或过滤，取上清 液或滤液，即得葡萄籽蛋白提取液。夏辉等人㈣发现 采用碱溶酸沉法提取葡萄籽蛋白时，ＮａＯＨ浓度对提 取率的影响最大，其次为浸提时间、料液比和提取 温度。从脱脂葡萄籽中提取蛋白质的最佳浸提条 件是ＮａＯＨ溶液浓度０．１ ｍｏｌ／Ｌ，料液比１：２５，在 ４０℃条件下浸提３５ ｍｉｎ，该条件下蛋白质提取率达 ７０．６０％。赵毅敏＿ｌ３】采用碱溶酸沉法研究了从葡萄籽 过滤，上清液或滤液即为葡萄籽蛋白提取液。邹圣 冬等人『１４Ｊ研究表明，采用盐提酸沉法从脱脂葡萄籽中 提取蛋白质的最佳工艺条件为ＮａＣ１溶液的质量分数 １０％，料液比１：２５，浸提温度和时间４０℃，４０ ｍｉｎ， 此条件下蛋白质提取率为５７．２５％。李凤英等人【 ］采 用盐提酸沉法制备了葡萄籽蛋白质，并运用正交试 验优化了提取参数。结果表明，ＮａＣ１质量分数对蛋 白质提取率的影响最大，其次为浸提温度，而料液 比和浸提时间则影响较小。该法提取葡萄籽蛋白的 最佳条件是以１０％的ＮａＣ１溶液，按１：２５的料液 比，在３０℃条件下搅拌浸提３０ ｍｉｎ，该条件下蛋白 质提取率为５７．２５％。 ２．３．３酶法 按比例将一定ｐＨ值的磷酸氢二钠一磷酸二氢钠 缓冲液加入脱脂葡萄籽粕，并加人适量酶，恒温条 件下浸提一定时间后离心，可制得葡萄籽蛋白质提 取液。酶法具有提取时间短、条件温和，且无有害 废物生成等优点，尤其是木瓜蛋白酶，提取效果较 好。酶法提取时，应及时灭酶，避免葡萄籽蛋白被 酶过度地降解 。吴炳云等人【ｌ８］采用酶法提取葡萄 籽中蛋白质，并探讨了提取温度、料液比、ｐＨ值、 提取时间和木瓜蛋白酶用量等因素对葡萄籽蛋白提取 率的影响。试验表明，以上各因素的最佳工艺参数分 别为４０℃，１：２０，ｐＨ值７．００，４０ ｍｉｎ，０．８００ ０ ｇ。 ２．３．４酶辅助提取法 酶辅助提取法是先采用复合糖酶处理，再用碱 溶法提取的方法。复合糖酶能增强对细胞壁的半纤 维素和纤维素等成分的破坏度，经复合糖酶作用后， 只需用低浓度的碱液即可使蛋白质提取率达到较高 水平。叶润等人用研究得出的复合糖酶处理最佳条件 为加酶量７０ ｍＬ／１００ ｇ，ｐＨ值３．７，温度３０℃，时 间１．５ ｈ。该方法降低了葡萄籽中半纤维素的含量， 使蛋白质提取率和纯度得到提高，葡萄籽蛋白提取 率达８４．６％，与不经酶处理相比，蛋白质提取率有所 增加。 ２．４纯化 ２．４．１等电点沉淀法 农产品加工（学刊） ２０１４年第７期 用４ ｍｏｌ／Ｌ盐酸将葡萄籽蛋白质提取液的ｐＨ值 及一定的抑制脂质过氧化能力，总还原力与葡萄籽 分别调节为３．５Ｏ，３．６８，４．ｏ０，４．１０，４．２０，４．４０和 多肽有量效关系。此外，葡萄籽多肽有很好的乳化 ４．６０，使蛋白质沉淀。离心，取上清液进行比色测 性和乳化稳定性。葡萄籽蛋白的碱性蛋白酶酶解物 定，吸光度Ａ最小的即为等电点。试验表明，当 还有清除羟基自由基的能力［２３－２４］。 ｐＨ值为３．８０时，上清液的吸光度最小，因此葡萄籽 蛋白质的等电点ｐＩ值为３．８０［ ９１。 用盐酸将葡萄籽蛋白提取液调节至ｐＨ值３．８Ｏ， 我国葡萄籽的综合利用率还比较低，大量的葡 静置后离心，取沉淀物，采用烘干法或冷冻干燥法 萄籽直接作为饲料使用或被丢弃。若对这些葡萄籽 干燥后即得葡萄籽蛋白。 加以充分利用，提取具有生物功能活性的物质，将 ２．４．２膜分离法 能够提升葡萄籽的附加值，提高葡萄产业的经济效 膜分离技术具有操作简单、能耗低、分离效果 益。目前，葡萄籽提取物的研究和利用多集中于多 ４展望 好、分离过程中物质不发生相变和分离产物易于回 收等优点，已广泛应用于工业生产中产品的分离纯 化 。张喜峰等人＿２１１采用孔径为１００ ｎｍ的陶瓷复合 膜分离设备超滤葡萄籽蛋白提取液，浓缩葡萄籽蛋 白质，通过正交优化试验，得出最佳超滤工艺条件 为操作压力０．１ ＭＰａ，料液比ｌ：１２０，ｐＨ值８，此 条件下蛋白回收率、膜污染率、浓缩效率、膜通量分 别为８９．４５％，７－２６％，３３１．０７ Ｌ／ｍ２￣ｈ，３５０ Ｌ／ｍ ｈ。 ２．５葡萄籽蛋白的检测 采用凯氏定氮法测定葡萄籽粉中蛋白质的含量， 操作步骤参照ＧＢ ５００９．５—２０ｌ０食品中蛋白质的测定 实施，葡萄籽蛋白提取液中蛋白质的含量可采用考 马斯亮蓝Ｇ一２５０法测定，测定后即可计算蛋白质提 取率。 蛋白质提取率＝ 脱脂葡萄籽蛋白质含量×蘸誊｛ｌ 慧×样品量 １００％．‘ ３葡萄籽多肽的制备及其活性 选择适当的蛋白酶，并控制一定水解度，可以 把葡萄籽蛋白水解为易被人体消化吸收并具有生物 活性的多肽。以水解度为指标，商学兵等人Ｉ２２］通过 Ｂｏｘ—Ｂｅｈｎｋｅｎ试验优化了中性蛋白酶酶解葡萄籽蛋白 的工艺，试验表明ｐＨ值６．６，酶解温度４５－３℃和酶 解时间２．９ ｈ是最佳的工艺参数，此时水解度为 １８．４４％。活性试验表明，葡萄籽蛋白中性蛋白酶酶 解物有抗氧化活性，且存在明显的量效关系。在 １０４—５２０ Ｉｘｇ／ｍＬ内，其对ＤＰＰＨ自由基清除率为 ２４．３４％～３８．０２％；在１６６．６～８３３ ｐ￣ｇ／ｍＬ内，其对羟 基自由基的清除率达２７．７２％～８１．１９％。杨碧霞等人嘲 比较了风味蛋白酶及碱性蛋白酶酶解葡萄籽蛋白的 效果，发现碱性蛋白酶水解效果优于风味蛋白酶， 碱性蛋白酶最佳的酶解条件是ｐＨ值ｌ１．５，酶用量 ０．９％，水解时间１８ ｈ，该条件下水解度达４６．１６％。 该葡萄籽多肽对志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠 杆菌ｌ５１５、枯草芽孢杆菌、青霉和黑曲霉都有较强 抑制作用，且有较强清除ＤＰＰＨ・和Ｈ ０ 的能力，以 酚和葡萄籽油，关于葡萄籽蛋白质的研究较少。人 类不仅可以把葡萄籽蛋白质、多肽和氨基酸作为营 养物质的来源，还可以充分利用它们特有的生物活 性，开发功能性食品和生化药品。因此，应深入开 展葡萄籽蛋白的研发和应用工作，充分发挥葡萄籽 蛋白质的作用，生产出更多的葡萄籽蛋白制品。 参考文献： ［１］ 刁小琴，张有林，关海宁．天然活性多肽及其应用前 景［Ｊ］．粮食与油脂，２００６（５）：４３—４４． ［２】 张乐乐．葡萄籽在动物营养中的研究进展『Ｊ１．饲料工 业，２００９，３０（１９）：４６—４８． 【３】 李凤英，李润丰．葡萄籽中主要化学成分及其开发应 用『Ｊ］．河北职业技术师范学院学报，２００２，１６（２）： ６５－６７． ［４］ 周建华．葡萄籽中提取油和蛋白质的研究『Ｊ１．粮食与饲 料工业，２０００（１ｏ）：４８—４９． ［５】 杨碧霞，冯翠萍，张硕，等．葡萄籽多肽的制备及功能 研究【Ｊ】．山西农业大学（自然科学版），２０１１，３１（６）： 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８７４元。这类型 按照标准化养殖的绒山羊规模养殖户经济效益 养殖场要通过良种选育（产绒高的），加强饲养管 分析，１只基础母羊年盈利应为５７４—６７３元。在丘陵 理，不断提升养殖效益。 山区可通过选用产绒在１．２５ ｋｇ以上的种公羊，通过 ３肉羊集中育肥场户养殖效益分析 改良选育，提高基础母羊产绒量和科学饲养办法增 加收益。 肉羊育肥是引进架子羊从事集中集约化养殖的 种形式，一般是买进１５～２５ 羔羊，通过集中育 肥２～３个月出栏获取较高利润的养殖模式。其效益 是以规模的大小而定，一般年可育肥３批，如果实 行标准化生产出栏育肥羊可达到养殖规模的３．６倍， 是目前羊业发展中利润较高的养殖模式。 ３５－４０ ｋｇ。 按照建设的标准化肉羊育肥场（１００只育肥）， （１）岢岚县振丰养殖场，２０１３年存栏绒山羊 平均每只育肥羊净盈利１７４＿５元。这就需要引导育肥 ６００只（基础母羊４５０只，种公羊１０只，后备母羊 场规范育肥程序，完善饲养管理办法，以科学配方 １４０只），年出栏羊４０５只。年总收人４３２ ５８３元 提高羊的经济收入。 （山羊绒收入９９ ０００元、山羊毛收入６ ６３３元、出售 ４结语 羔羊收入１７２ ２５０元、出售菜羊收入１５４ ７００元），年 总支出２３７ ９２４元（饲料５９ ９０４元、饲草９３ １２０元、 要想有力促进以羊产业为主的畜牧业发展，就 放牧工资６４ ８００元、防疫费２０ １００元），年总收入 必须打破传统观念，确实抓好肉羊肥育工作。走规 １９４ ６５９元，基础母羊只均年收益４３２．６元。这类型 模养殖的路子，积极渗透科学养殖技术，规范育肥 养殖场是传统养殖和现代养殖的结合体，管理比较 程序，以良种繁育为主提升品质，大力引进优良品 种，采用现代化工业养殖理念，加强饲养管理，完 好，工业化生产观念不强。 （２）岢岚县云青绒山羊养殖场，２０１３年羊饲养 善饲养管理办法，进一步精准饲草料的配比，以科 量９１０只（基础母羊３６０只），年末存栏７００只，出 学配方提高羊的生产效益，建立羊疫病防控体系， 栏２１９只。年总收入３４０ ０００元（卖羊２５０ ０００元、 普及疫病防治知识，推行肉羊标准化生产，缩小实 卖羊绒９０ ０００元），年总支出２１６ ０００元（饲草 际养殖年盈利与理论年盈利之间的效益空间，增加 １２ ０００元、玉米８Ｏ ０００元、饲料１６ ０００元、人工费 农民收入，推动羊产业的积极健康发展。◇ 一２．２规模场（区） 该饲养模式主要是指存栏在２００只以上的绒山 羊养殖场，其养殖特点是母羊以放牧为主，羔羊以 舍饲为主，建有标准化羊场。１只母羊年均产羔 １．５只，羔羊２月断奶、１年出栏，平均出栏体质量 Ｅ ’ ｄ 孙、 、 、、 ｃ 心 ‘ 、’ 、’ ｅ ‘、、 ｕ‘ 、、 ｆ （上接第７０页） 【ｌ４】邹圣冬，蔡永梅，代绍娟，等．脱脂葡萄籽中蛋白的提 取工艺研究［Ｊ］．农业机械，２０１３（７）：５１—５５． 【１５】李凤英，权英．碱溶法提取葡萄籽中蛋白质的工艺［Ｊ１． 河北职业技术师范学院学报，２００３，１７（３）：２６—２９． ［１６］鞠慧萍，孙鹏翔，石建华．应用不同培养基检测金黄色葡 ［２ｏ］陈婷，余群力，赵莉，等．超滤膜分离技术回收乳清蛋 白的工艺研究【Ｊ】．食品工业科技，２０１０，３１（４）：２２６— ２２８． ［２１］张喜峰，孙亚莉，苏风贤，等．膜分离可溶性葡萄籽蛋 白质及膜清洗方案【Ｊ］．食品工业科技，２０１３，３４（１３）： ２４１—２４５． 萄球菌的结果比较［Ｊ］．农产品加工（学刊），２０１３（８）： １９－２０． 【２２］商学兵，李超，刘军军，等．葡萄籽蛋白的中性蛋白酶 酶解工艺及其产物抗氧化活性研究ｆＪ１．农业机械， ２０１ １（１Ｏ）：１４２—１４４． ［１７］仵昱舟，冯翠萍．酶法提取葡萄籽中蛋白质工艺优 化【Ｊ］．食品科学，２０１０，３１（２）：６３—６６． 【２３］李超．葡萄籽蛋白的碱性蛋白酶酶解工艺及其产物抗氧 化活性研究『Ｊ］．食品工业，２０１３，３４（２）：７９—８３． ［２４］史学伟，程卫东，肖婧，等．新疆脱脂葡萄籽天然蛋白 的研究现状ｆＪ］．农产品加工（学刊），２０１０（３）：７３— ７６．◇ 【１８］吴炳云，黄晓辉，杨振杰，等．酶法提取葡萄籽中蛋白 质的工艺研究『Ｊ１．化学工程与装备，２０１４（２）：３４—３８． 【１９】郝利平，郝林．黑大豆与扁豆活性蛋白质提取工艺的研 究［Ｊ］．农业工程学报，２００２，１８（３）：１１７—１１９．
