２０１ ３年第０４期 吉林农业 ＮＯ．０４．２０１３ （总第３０１期） ＪＩＬＩＮ ＡＧＲＩＣＵＬＴＵＲＥ （ＣｕｍｕｌａｔｉｖｅｔｙＮＯ．３０１） 凤尾鸡冠花的试管开花诱导研究 刘家富’，卞利权 ，马 珂’，王 霞 （１．吉林农业科技学院生物工程学院，吉林长春１３２１０１； ２．吉林天景食品有限公司，吉林长春１３０１２３） 摘要：以风尾鸡冠花带腋茅的茎段为材料，探讨不同外源激素及蔗糖浓度对鸡冠花试管成花的影响 结果表明：适量的６一ＢＡ和 ＮＡＡ能显著提高鸡冠花的开花率，当培养基中含有０．８ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ和Ｏ．１ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ时，一开花率最高为６０％；单因素试验中发现，适量的 ＧＡ３和蔗糖利于试管开花，当ＧＡ３和蔗糖浓度依次为０．８ｍｇ／Ｌ和４０ｍｇ／Ｌ时，鸡冠花开花率分别为６５．７１％和６０．００％。 关键词：鸡冠花；激素；蔗糖：试管开花 中图分类号：￥６８ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７４—０４３２（２０１３）一０４—００７５—２ 风尾鸡冠花，是宽科青箱属一年生草本植物，株高３０￣６０厘 ６一ＢＡ和０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ时，开花率最高为６０％，试管苗生长良好，单株 米，茎直立，叶卵状披针形，花序由多数小花序聚集呈穗状。试 花芽多，为最佳开花诱导培养基。 管开花是指用组织培养的方法，使植物开花的过程在培养基中完 表ｌ不同６－ＢＡ和ＮＡＡ浓度组合对试管苗开花诱导的影响 成。目前国内外对鸡冠花试管开花的研究很少，组培技术尚不成 熟 ，本文主要研究外源激素及蔗糖浓度对凤尾鸡冠花瓶内开花 序 ６一ＢＡ＋ＮＡＡ 接种 开花 开花 开花率 生长状况 的影响，为风尾鸡冠花试管花商品化生产提供理论指导。 号 （ｍｇ／Ｌ） 数 株数 期 （％） １材料与方法 １ ｏ．０＋０．０ ３５ ２ ７７ ５．７１ 生长慢，花小 ２ ０．４＋０．０５ ３５ ｌ２ ４５ ３４．２９ 生长一般 １．１材料 ３ ０．４＋０．１ ３５ １８ ４９ ５１．４３ 生长较好 风尾鸡冠花种子。 ４ ０．４＋０．２ ３５ ｌ１ ４２ ３１．４３ 不定根多，少量愈伤组织 １．２方法 ５ ０．８＋０．０５ ３５ １７ ４６ ４８．５７ 生长较好 １．２．１试管苗萌发选取籽粒饱满的鸡冠花种子，蒸馏水浸泡 １０ｈ，然后转移至超净工作台内，７０％酒精浸泡３０ｓ，无菌水清洗３ ６ ０．８＋０．１ ３５ ２１ ５３ ６０．００ 健壮，花芽多 次，０．１％升汞灭菌１ｌｍｉｎ，无菌水清洗５次，接种于Ｍｓ培养基中， ７ ０．８＋０．２ ３５ １３ ４５ ３７．１４ 生长较好，少量愈伤组织 ２５℃，２０００１ｘ，光照１２ｈ／ｄ，１４ｄ天后，统计种子萌发及试管苗生 ８ １．２＋０．０５ ３５ ｌ０ ４１ ２８．５７ 不定芽多，少量玻璃化苗 长情况。 ９ １．２＋０．１ ３５ １４ ４５ ４０．Ｏ０ 不定芽多，少量玻璃化苗 １．２．２不同６一ＢＡ和ＮＡＡ浓度组合对试管苗开花诱导的影响取试管 １Ｏ １．２＋０．２ ３５ ９ ３８ ２５．７１ 出现愈伤组织和玻璃化苗 苗上部带腋芽的茎段接种到Ｍｓ培养基中，蔗糖３０ｇ／Ｌ，６－ＢＡ和ＮＡＡ 的处理浓度见表１，每个处理接种３５瓶，每瓶接种１个试管苗。４５ｄ ２．２ ＧＡ３对试管苗开花诱导的影响 后统计无菌苗开花情况。 不同浓度ＧＡ３对试管苗开花诱导的影响如表３所示，当ＧＡ３浓 １．２．３ ＧＡ３对试管苗开花诱导的影响取试管苗上部带腋芽的茎段 度为０．４ｍｇ／Ｌ时，试管苗变高，长势较好，开化率为５１．４３％，当 接种到ＭＳ培养基中，蔗糖浓度为３０ｇ／Ｌ，６－ＢＡ和ＮＡＡ的处理浓度分 ＧＡ３浓度为０．８ｍｇ／Ｌ时，试管苗长势最好，花芽最多，开化率为 别为０．８ｍｇ／Ｌ和０．１ｍｇ／Ｌ，ＧＡ３的处理浓度见表３，每个处理接种３５ ６５．７１％，而且单株花芽数量最多，而当ＧＡ３浓度为１．２ｍｇ／Ｌ时，开 瓶，每瓶接种１个试管苗。４５ｄ后统计无菌苗开花情况。 花率则降为５４．２９％，可见，适量的ＧＡ３可促进风尾鸡冠花开花。 １．２．４蔗糖浓度对试管苗开花诱导的影响取试管苗上部带腋芽的 表２不同浓度ＧＡ３对试管苗开花诱导的影响 茎段接种到Ｍｓ培养基中，６一ＢＡ和ＮＡＡ的处理浓度分别为０．８ｍｇ／Ｌ和 序号 ＧＡ３ 接种数 开花株数 开花率 生长状况 ０．１ｍｇ／Ｌ，蔗糖浓度见表４，每个处理接种３５瓶，每瓶接种１个试管 （ｒａｇ／Ｌ） （％） 苗，４５ｄ后统计无菌苗开花情况。 ｌ Ｏ．４ ３５ １８ ５１．４３ 茎较长，长势较好 ２结果与分析 ２ Ｏ．８ ３５ ２３ ６５．７１ 健壮、茎较长、花芽多 ２．１不同６－ＢＡ和ＮＡＡ浓度组合对试管苗开花诱导的影响 ３ ｌ＿２ ３５ ｌ９ ５４．２９ 生长电好 不同６一ＢＡ和Ｎ从浓度组合对试管苗开花诱导的影响非常显著， 表３不同浓度蔗糖浓度对试管苗花芽诱导的影响 如表１所示：带腋芽的茎段在不含有激素的Ｍｓ培养基中可以缓慢 分化，形成不定根和不定芽，３５株鸡冠花中，有２株形成花芽并开 序号 蔗糖 接种数 开花株数 开花率 生长状况 花，开花率为５．７１％，但其花型小，花色暗淡，而在含有不同６－ＢＡ （ｍｇ／Ｌ） （％） 和ＮＡＡ浓度组合的ＭＳ培养基中，试管苗开花率均有明显提高。随 １ ２０ ３０ １ ３．３３ 淡绿色叶片，细弱 ＮＡＡ浓度升高，开花率呈现先升后降趋势，ＮＡＡ浓度为０．１ｍｇ／Ｌ时， ２ ３０ ３０ １６ ５３．３３ 生长较好 开花率相对较高，培养基中ＮＡＡ浓度达到Ｏ．２ｍｇ／Ｌ时，部分试管苗 ３ ４０ ３０ ｌ８ ６０出现愈伤组织，不利于观赏；同样，随６一ＢＡ浓度升高，开花率亦 ．Ｏ０ 粗壮、深绿色叶片，花色鲜 艳，不定根多 呈现先升后降趋势，６一ＢＡ浓度为０．１ｍｇ／Ｌ时，开花率相对较高，培 养基中６一ＢＡ浓度达到１．２ｍｇ／Ｌ时，个别试管苗出现局部组织肿胀、 ４ ５０ ３０ ４ １３．３３ 无菌苗矮小、生长缓慢 半透明、失绿等玻璃化现象。综合考虑，当培养基中添加Ｏ．８ｍｇ／Ｌ ２．３蔗糖浓度对试管苗开花诱导的影响 ＬＩＮ ＡＧＲＩＣＵＬＴＵＲＥ ７５ 如表４所示，不同蔗糖浓度对凤尾鸡冠花开花诱导的影响差异 菊瓶内开花影响一致。 综上，适量的外源激素和蔗糖浓度是提 显著，当蔗糖浓度为２０ｍｇ／Ｌ、３Ｏｍｇ几和４Ｏｍｇ几时，随蔗糖浓度升 高试管苗瓶内开花率所必需的。 高，开花率逐渐升高，依次为３．３３％、５３．３３％和６０．００％，试管苗叶 片颜色逐渐加深，茎段由纤弱变得粗壮，不定根数量逐渐增加， 参考文献 而当蔗糖浓度增）ＪＩＪ￣ｌＪ５０ｍｇ／Ｌ时，开花率骤降为１３．３３％，花芽由腋 ［１］房立晶，白志川，刘世尧．试管开花生物技术研究概况［Ｊ］． 芽直接抽出，试管苗矮小、生长缓慢、叶片变黄变小，有的叶片 南方农业，２００７（３）：７２—７４．甚至呈玻璃花状。 ［２］黄浅，赖钟雄，栾爱业，等．试管花卉的生产与应用［Ｊ］．亚 ３讨论 外源激素是影响外植体形态建成的关键因素。 本研究发 现，培养基中添加６一ＢＡ和ＮＡＡ能明显促进试管苗的瓶内开花，并且 热带农业研究，２００７（４）：３００—３０４． ［３］郑丽屏，王玲租，孙一丁，等．重瓣丝石竹试管花的诱导 ［Ｊ］．西南农业学报，２００４（１７）：５８—６１． ［４］赵子刚，曾丽，唐克轩，等．色素万寿菊叶片再生体系 随着６一ＢＡ和ＮＡＡ浓度的升高，开花率呈先升后降趋势，这与赵子刚 的建立及优化［Ｊ］．园艺学报，２０１Ｏ（４）：６５５—６６０． 等的研究成果一致。 ＧＡ３也是植物组织中的常用激素，本研究发 ［５］孙婵娟．万寿菊的快速繁殖及试管开花研究［Ｄ］．重庆：西 现适量浓度的ＧＡ３可促进试管苗的瓶内开花率，当培养基中含有 南大学硕士学位论文，２００９． ０．８ｍｇ／Ｌ ＧＡ３时，试管苗开花率最高，可达６５．７１％，而且单株花芽 数也最多，但培养基中ＧＡ３浓度为０．４ｍｇ／Ｌ和１．２ｍｇ／Ｌ时，开花率均 作者简介：刘家富（１９９０一），男，就读于吉林农业科技学 有所下降，说明过高或过低浓度的ＧＡ３能抑制开花率。蔗糖为外植 院。 体的生长提供探源和能源，本研究发现，风尾鸡冠花试管苗开花 通讯作者：王霞（１９７８一），女，江苏人，吉林农业科技学院 所需蔗糖的最佳浓度为４０％，并且随着蔗糖浓度的升高，鸡冠花叶 生物工程学院讲师，从事植物分子生物学方面研究工作。 片颜色加深，但当蔗糖浓度达￣Ｕ５Ｏｍｇ／Ｌ时，试管苗植株矮小，开 花率降低为１３．３３％，有的甚至出现玻璃化现象，这与蔗糖对万寿 量，计算每亩产量，计算时将调查取样的损失（拔节期、抽穗期 根据表２，３，可以看出超级稻Ｑ优６号实验组里面生长及产量 和成熟期测干物质取样各３穴，成熟期调查每穗总粒数取３穴，共 最高的为Ａ３Ｂ２组，产量每亩均产为７９５．８４ｋｇ；最低为Ａ２ＢＩ组，均 取样ｌ２穴）补回。 产为６５１．８ｋｇ。由此我们可以较精确的得出：对超级稻的管理采用 Ａ３Ｂ２的种植方式可以比其他方式获得更多的生产收获。 ３超级稻试验的结果 试验详细记载分蘖期分蘖数进展调查情况。记录内容包括拔 参考文献 节期、抽穗期和成熟期的叶面积测定、叶面积系数（ＬＡＩ）、有效 ［１］高广金．超级稻高产高效栽培技术［Ｍ］．武汉：湖北科学技 穗粒数、千粒重以及实收产量。将超级稻Ｑ优６号的８个处理，３组 术出版社，２０１２． 随机重复下的２４个小区记录数据进行对比分析。最终得出０优６号 ［２］陈丽华．蔡丽君．超级稻优质高产栽培技术［Ｊ］．福建农业 的平均生长情况和平均亩产情况，详细见表２，３。 科技．２０１１，（６）． 表２成熟期各组Ｏ优６号生育产量情况表 ［３］何金旺．桂北高寒山区超级稻＋儿菜高效种植模式栽培技 编号 ｌ ２ ３ 处理名称 叶面积（ｍ。） ＡｌＢ１ ＡＩＢ２ Ａ２Ｂ１ ０．１７】３ ０．２０４６ ０．１４８０ ＬＡＩ ４．１１ ４．９ｌ ４．４４ 有效穗数 千粒重（ｇ） １Ｏ．５ ｌ０．１ ９．１ ２８．４ｌ ２９．２７ ２８．８７ 术［Ｊ］．科学种养．２０１１，（１１）． ４ ５ ６ ７ ８ Ａ２Ｂ２ Ａ３Ｂ１ Ａ３Ｂ２ Ａ４Ｂ１ Ａ４Ｂ２ ０．１８６４ ０．１４９５ ０．１６８４ ０．１１３８ ０．Ｉ１７３ ５．５９ ５．３８ ６．Ｏ６ ４．７８ ６．０３ ９．１ ７．７ ８．５ ６．３ １１．８ ２８．３１ ２８．７８ ２７．３７ ２８．５５ ２８．００ ［４］吴单日，何金旺，潘德清，梁泽荣．高寒山区杂交中稻（超级 稻）新组合比较试验［Ｊ］．种子科技，２０１２，（０１）． ［５］黄荣昌，韦目阔．高寒山区甜玉米——超级稻轮作高产栽 培技术［Ｊ］．广西蓰学报，２０１２，（０３）． 作者简介：黄继魁（１９６２一），男，广西乐业县良种示范繁殖 农场，研究方向：水稻新品种高产栽培试验、示范与推广。 表３成熟期各组０优６号总平均产量情况表 处理 Ａ１Ｂｌ Ａ１Ｂ２ Ａ２Ｂｉ Ａ２Ｂ２ 小区平均产量 ｌ９．７４ １９．６Ｏ １９．５５ １９．７５ 平均亩产量单位（ｋｇ） ６８６．７ ６８１．６ ６５１．８ ６５８．３ Ａ３ＢＩ Ａ３Ｂ２ Ａ４Ｂ１ Ａ４Ｂ２ ２１．３８ ２３．８８ ２０．４４ ２Ｏ．２９ ７ｌ２．８ ７９５．８ ６８１．２ ６７６．２ ７６ ＪＩＬＩＮ ＡＧＲＩＣＵＬＴＵＲＥ
