生物学教学２０１３年（第３８卷）第１０期 ・５５・ “题’’说血细胞计数板 陆忠华 （江苏省南通市通州区二甲中学２２６３２１） 摘要通过例题介绍了血细胞计数板的使用范畴、结构和规格以及操作、计数和清洗方法。 关键词血细胞计数板使用方法习题 、 血细胞计数板（又称血球计数板）是高中生物学 ０．１ｍｍ３，即ｌｍｍｘｌｍｍ×０．１ｍｍ方格的计数板。 实验中重要的计数工具。血细胞计数板的使用操作注 计数室通常有两种规格：一种是２５×１６型，即大 意事项多，仅靠１次实验学生无法完全理解要领，故学 方格内分为２５中格，每一中格又分为ｌ６小格；另一种 生在做此类试题时失分较多。下面以相关例题可帮助 是１６×２５型，即大方格内分为１６中格，每一中格又分 学生更好掌握血细胞计数板的使用。 为２５小格。但是，不管计数室是哪一种结构，它们都 １血细胞计数板的结构和规格 有一个共同的特点，即每一大方格都是由４００个小方 例１ 下列关于血细胞计数板结构和使用方法的 格组成。 叙述，不正确的是（） 参考答案：Ａ。 Ａ．一块血细胞计数板的中央平台上有一个计数 ２血细胞计数板的使用操作 室 例２ 为了利用血细胞计数板进行红细胞密度统 Ｂ．血细胞计数板使用结束后，用清水冲洗、晾干 计，某同学的操作步骤如下：用吸管吸取混匀的红细胞 Ｃ．利用血细胞计数板计数微生物时，需尽量减少 悬浮液，向计数室中滴２滴悬浮液一加盖玻片一静置 微生物的结团现象 后在显微镜下观察、计数。上述实验操作统计的数据 Ｄ．利用血细胞计数板计数微生物时，需先盖上盖 与正确操作时统计的数据相比——。 玻片再滴加样液 解析：利用血细胞计数板进行动物血液中红细胞 解析：血细胞计数板是一块比普通载玻片厚的特制 密度的统计正确的步骤是：先将盖玻片放在计数室上， 玻片，玻片中有４条下凹的槽，构成３个平台。中间的平 用吸管吸取摇匀的红细胞悬液，滴于盖玻片边缘，让悬 台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面刻 浮液自行渗入，多余悬浮液用滤纸吸去。稍待片刻，待 有一个方格网，方格网上刻有９个大方格，其中只有中 红细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物台 间的一个大方格为计数室。故每一块血细胞计数板中 的中央进行计数。此过程中特别要注意将血细胞计数 间平台上有２个计数室。实验室常用的血细胞计数板 板载玻片周围多余的悬浮液吸去才能进行计数，否则 是大方格的长和宽各为ｌｍｍ，深度为０．１ｍｍ，其容积为 计数室底部与盖玻片之间距离大于０．１ ｍｍ，计数室内 是把葡萄榨汁瓶装发酵。用这种方法制作的葡萄酒， 在灭菌过程中葡萄、花瓣完整、但细胞死亡，大量的可 葡萄在榨汁中种子被打碎，导致发酵过程中葡萄酒的 溶性糖和花青素从细胞中流出，在发酵过程中，因不断 单宁含量较多。如果是家庭自制葡萄酒，没有较长时 产生酒精，花瓣中的芳香油被萃取到葡萄酒中，这样酿 间的存放，单宁没有得到充分的反应，这样的葡萄酒不 成的葡萄酒透明、色鲜、酒香。从而我校学生以“多色 但没有酒香的醇厚，反而苦涩味特别重。又因在榨汁 花香葡萄酒”为课题进行研究。 中葡萄有丰富的输导组织，纤维素被打碎，发酵后的酒 ３选题命名 汁比较浑浊。如果所用的葡萄是白葡萄，对葡萄酒的 如何在“科学ＤＶ”作品中给探究的课题取一个好 颜色有影响。用植物芳香油的提取法提取可用花瓣为 听、新颖的名字［ 。实践的经验是淡化专业术语，增加 材料，加以植物芳香油特别香，可用有机溶剂进行萃 拟人手法，让更多的人在视频观看中能轻松地理解科学 取。花瓣中还有丰富的花青素，细胞死亡后可溶解在 知识，就如本文探究案例三个课题的名称。 水中；②确定课题探究的设计思路：针对白葡萄制作酒 主要参考文献 的缺点，引导学生将葡萄酒的制作与植物芳香油的提 ［１］邱会涛，赵福赞．２０１２．留下科学探究的足迹——如何指导学生 取相结合进行实验改进设计。具体思路是将完整的葡 拍摄科学ＤＶ．中国科技教育，（３～４）：５４，５２ 萄与各种花茶混合装瓶、封盖。用手提式灭菌锅灭菌 ［２］邱会涛，赵福赞，黄文斌．２０１２．让探究之花完美绽放——青少年科 ２０ｒａｉｎ，待冷却至常温接上酵母菌发酵。这种方法保证 学ＤＶ活动作品的后期编辑．中国科技教育，（１１～１２）：５４，４８ ・５６・ 悬浮液的容积大于０．１ ｎｌｌｎ ，等红细胞沉降到计数室底 部后，计数大于正常操作结果。 参考答案：偏大。 ３血细胞计数板的计数 例３使用的血细胞计数板的规格如下图所示， 如果图中ａ，ｂ、ｃ、ｄ、ｅ ５个中格共有衣藻１００个，则藻液 中衣藻的浓度是——个／ｍＬ。 血球计数板外观图侧视图、俯视图）血球计数撮计数室放大囝 解析：由图可知一个计数室的边长为１ｍｍ，则面积 是Ｉｍｌ／１ ，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度 为０．１ｍｍ，计数室的容积为０．１ｍｍ 。ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ ５个 中方格共有衣藻１００个，则每个中方格里平均有衣藻 ２０个。一个计数室内有２５个中方格，所以０．１ｍｍ０中 共有衣藻５００个，换算成ｌｍＬ就有衣藻５ Ｘ１００个。 由于计数室有两种规格，所以计数的方法也有所 区别。以计数酵母细胞为例，２５ Ｘ １６型的计数板：一 般计数４个角和中央的５个中方格（８０个小方格）的 细胞数。对于压在方格界限上的细胞应当计数相邻两 边及其顶角上的细胞数（一般取上边及左边），加上方 格内的细胞数，作为该方格的细胞总数。如果一个方 格内细胞数过多，难以数清，应当对溶液进行适当稀 释，一般以方格内含４～５个细胞为宜。计数完毕后， 依下列公式计算：酵母细胞个数／ｌｍＬ：８０个小方格细 胞总数／８０ Ｘ４００ Ｘ １００００×稀释倍数；１６×２５型的计 数板，计数时一般取四角：１、４、１３、１６四个中方格（１００ 个小方格）计数。计数完毕后，依下列公式计算：酵母 细胞个数／ｌ ｍＬ＝１００个小方格细胞总数／１００×４００× １００００×稀释倍数。 参考答案：５ ｘ １００。 ４血细胞计数板的清洗 例４实验结束后，用试管刷蘸洗涤剂擦洗血细 胞计数板的做法是错误的，正确的方法是——。 解析：血细胞计数板使用后，用自来水冲洗，切勿 用硬物洗刷，洗后自行晾干或用电吹风吹干，也可以用 无水乙醇或９５％的乙醇或丙酮等有机溶剂脱水使其 干燥。通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉 淀物。若不干净，则必须重复清洗直到干净为止。 可见，对于血细胞计数板使用，如果只是单靠教师 课堂上的讲解，容易造成学生只知其一而不知其二，更 不能举一反三。为了避免学生在做这类试题中失分， 生物学教学２０１３年（第３８卷）第１０期 教师应该多鼓励、多指导学生使用血细胞计数板，让他 们体验其中的操作过程，找到失败的原因，最终能科学 规范地使用血细胞计数板，在千变万化的考题中从容 不迫，提高得分率。 参考答案：浸泡和冲洗。 ５血细胞计数板应用 例５ 在一定量的酵母菌培养液中放入活酵母菌 若干，抽样镜检，视野下如图甲所示（图中小点代表酵 母菌）。将容器放在适宜温度下恒温培养５ｈ后，稀释 １００倍，再抽样镜检，视野下如乙图所示。根据实验结 果判断，以下叙述正确的是（ ） Ａ．培养５ｈ后，酵母菌种群密度增加２００倍左右 Ｂ．探究酵母菌的种群数量变化可以用标记重捕法 ｃ．用血球计数板计数酵母菌数量时只统计方格内 菌体 Ｄ．培养５ｈ后，酵母菌种群数量已经达到Ｋ值 参考答案：Ａ。 例６下列对“探究培养液中酵母菌种群数量动 态变化”实验的叙述中，错误的是（ ） Ａ．从试管中吸出培养液之前应振荡试管，有利于 准确计数 Ｂ．先将培养液滴在计数板上，轻盖盖玻片防止气 泡产生 Ｃ．当一个小方格中酵母菌数量过多时，应将培养 液按比例稀释处理 ・ Ｄ．压在方格边上的酵母菌，只计数相邻两边及其 顶角的个体数 参考答案：Ｂ。 例７下列有关“探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化”实验的叙述，正确的是（多选） Ａ．在开始培养酵母菌之前必须通过显微镜观察 后估算１０ｍＬ培养液中酵母菌的初始数量 Ｂ．在连续培养的过程中，每天定期采用抽样检测 的方法估算培养液中的酵母菌总数 Ｃ．若用“边长ｌｍｍ，刻度为２５中格×１６小格”的 血球计数板计数，则计数时只需计数４个角上的４个 中格中的酵母菌数量 Ｄ．若一个小格中酵母菌过多，难以数清，可用自 来水进行稀释 参考答案：ＡＢ。