维普资讯 http://www.cqvip.com 第４ｌ卷２３０ 第３期 哈尔滨医科大学学报 ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＨＡＲＢＩＮＭＥＤＩＣＡＬＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ ｖｏＩ．４１．Ｎｏ．３ ２Ｏ０７年６月 Ｊｕｎ．，２ＯＯ７ 人脑星形胶质细胞瘤血管内皮生长因子表达、 血管生成及细胞增殖活性的研究 张淑杰 ，刘 明 ，王瑞芬 ，王正彩 ，王立峰 （１．哈尔滨医科大学第一临床医学院病理科；２．哈尔滨医科大学第四临床医学院 肿瘤治疗中心，黑龙江哈尔滨１５０００１） ［摘要］ 目的 研究血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）和增殖细胞核抗原（ＰｃＮＡ）在星形细胞瘤中的表达，探讨ＶＥＧＦ与肿 瘤血管生成和细胞增殖的关系。方法ｓＰ免疫组化法对６４例星形细胞瘤的ＶＥＧＦ和ＰＣＮＡ表达进行观察。ＣＤ３１ 单克隆抗体免疫组化染色显示微血管，用微血管计数（ＭＶＣ）测定肿瘤血管生成。结果 ＶＥＧＦ蛋白主要分布在高 级别胶质瘤组织的瘤细胞和内皮细胞，低级别胶质瘤呈低表达，且与ＰＣＮＡ的表达成显著正相关（ｒ＝０．９９１，Ｐ＜ ０．０１）；高级别胶质瘤ＭＶＣ显著高于低级别胶质瘤。结论起促进作用，ＰＣＮＡ较能客观地反映肿瘤的恶性程度。 ＶＥＧＦ可能参与胶质瘤血管生成，对胶质瘤的恶性进展 【关键词］星形细胞瘤；血管内皮生长因子；增殖细胞核抗原；微血管计数 ［中图分类号】Ｒ７３０．２６４ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１０００—１９０５（２００７）０３—０２３０—０４ ＶＥＧＦ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ，ａｎｄ ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｂｒａｉｎ ａｓｔｒｏｃｙｔｏｍａｓ ＺＨＡＮＧ Ｓｈｕ－ｊｉｅ，ＬＩＵ Ｍｉｎｇ，ＷＡＮＧ Ｒｕｉ—ｆｅｎ，ｅｔ ａｌ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ ，Ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｈａｒｂｉｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｒｂｉｎ １５０００１，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｏｆ ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ（ＶＥＧＦ）ａｎｄ ｐｒｏｌｉｆ－ ｅｒａｆｉｎｇ ｃｅｌｌ ｎｕｃｌｅａｒ ｎｔａｉｇｅｎ（ＰＣＮＡ）ｉｎ ｈｕｍａｎ ｂｒａｉｎ ａｓｔｒｏｃｙｔｏｍａｓ ａｎｄ ｉｔｓ ｒｅｌａｔｉｏｎ ｗｉｈｔ ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ ａｎｄ ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｏｆ ＶＥＧＦ ａｎｄ ＰＣＮＡ ｉｎ ６４ ａｓｔｒｏｃｙｔｏｍａｓ ｗｅｒｅ ｅｘａｍｉｎｅｄ ｂｙ Ｓ－Ｐ ｉｍｍｕ— ｎｏｈｉｓｏｔｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ，ｔｈｅ ｖａｓｃｕｌａｒ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｗａｓ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ｍｉｃｍｖｅｓｓｅｌ ｃｏｕｎｔｉｎｇ（ＭＶＣ）ｂｙ ｉｍｍｕｎｏｓ— ｔａｉｎｉｎｇ。ｗｉｔｈ ＣＤ３ １ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ ＩｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅⅡｌｉｃａｌ ｓｔａｉｎｉｎｇ ｆｏｒ ＶＥＧＦ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈｅ ｄｉｓｔｆｉｂｕ— ｉｔｏｎ ｏｆ ＶＥＧＦ ｐｒｏｔｅｉｎ ｗａｓ ｍａｉｎｌｙ ｉｎ ｔｕｌｎｏｒ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ｈｉｇｈ－ｇｒａｄｅ ｓＵｏｍａ，ｗｈｅｒｅａｓ ｉｔ Ｗａｓ ｏｎｌｙ ｗｅａｋｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ｌｏｗ－ｇｒａｄｅ ｇｌｉｏｍａ，ａｎｄ ＶＥＧＦ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｗａｓ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｄ ｗｅｉｔｈ ｔｈａｔ ｏｆ ＰＣＮＡ（ｒ＝Ｏ．９９１，Ｐ＜０．０１）．ＭＶＣ ｉｎ ｈｉｈ—ｇｇｒａｄｅ ｇｌｉｏｍａ Ｗａｓ ｃｏｎｓｉｄｅｒａｂｌｙ ｈｉｈｅｒ ｔｇｈｎ ｔａｈｏｓｅ ｉｎ ｌｏｗ－ ｇｒａｄｅ ｇｌｉｏｍａ（Ｐ＜Ｏ．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ＶＥＧＦ ｍａｙ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅ ｔｏ ｔｈｅ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｇｌｉｏｍａ ｎｄ ａｐｌａｙ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｒｏｌｅ ｉｎ ｌｅａｄｉｇ ｔｎｏ ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ．ＰＣＮＡ Ｗａｓ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｍａｌｉｇｎａｎｃｙ ｏｆ ａｓｔｒｏｃｙｔｏｍａ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ａｓｔｍｃｙｔｏｍａｓ；ＶＥＧＦ；ＰＣＮＡ：ｍｉｃｍｖｅｓｓｅｌ ｃｏｕｎｔｉｎｇ 血管内皮生长因子（ｖａｓｅｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｌａ ｇｒｏｗｔｈ 成能显著抑制肿瘤的生长［７］，抗血管生成治疗是不 同于常规的新的抗肿瘤策略，在一些实验性肿瘤治 疗中已经取得理想疗效 。 ｆａｃｔｏｒ，ＶＥＧＦ）是一类特异性作用于血管内皮细胞的 二聚糖蛋白，具有增加血管通透性…，促进血管内皮 细胞分裂增殖的作用，对活体血管生成具有强烈的 诱发作用 Ｊ。大量的研究证实，ＶＥＧＦ是肿瘤血管生 成的主要促进因子＿３ ］ 血管生成是肿瘤生长的关 键，对实体瘤的快速生长尤为重要［６］。阻断血管生 ［收稿日期】２ＯＯ６—０ｌ—ｌ５ 胶质瘤是人体血管最丰富的肿瘤之一，为探讨 ＶＥＧＦ在人脑胶质瘤中表达及其与肿瘤微血管计数 （ｍｉｃｍｖｅｓｓｅｌ ｃｏｕｎｔｉｎｇ，ＭＶＣ）和细胞增殖活性的关系， 以便为抗血管生成治疗胶质瘤提供理论依据，我们 应用ｓＰ免疫组化技术检测６４例人脑胶质瘤，６例 正常脑组织中ＶＥＧＦ表达，用ＣＤ３１免疫组化染色检 测胶质瘤中ＭＶＣ，应用增殖细胞核抗原评价胶质瘤 【作者简介】张淑杰（１９６９一），女、黑龙江哈尔滨人，副主任医师。 ＂１６通讯作者 维普资讯 http://www.cqvip.com 第３期 张淑杰，等．人脑星形胶质细胞瘤血管内皮生长因子表达、血管生成及细胞增殖活性的研究 ２３１ 细胞增殖活性，并分析ＶＥＧＦ、ＭＶＣ、增殖细胞核抗原 （ＰｃＮＡ）与胶质瘤细胞分化程度的关系，探讨ＶＥＧＦ 与ＭＶＣ、ＰＣＮＡ的相关关系。 １材料与方法 １．１材料 选取哈尔滨医科大学第一临床医学院１９９９～ ２０００年胶质瘤手术标本的存档蜡块６４例，其中毛细 胞性星形细胞瘤２例，星形细胞瘤Ⅱ级１９例，Ⅲ级 ２２例，Ⅳ级２１例，星形细胞瘤病理分级按ＷＨＯ分 类；正常脑组织标本６例，取自非脑病死亡的尸体解 剖脑标本的存档蜡块。 １．２试剂 鼠抗人ＶＥＧＦ蛋白的单克隆抗体ＪＨ１２１、鼠抗人 ＣＤ３１及ＰＣＮＡ的单克隆抗体和ＳＰ－Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ／Ｐｅｍｘ— ｉｄａｓｅ ｋｉｔ由福州迈新公司提供。 １．３方法 辣根过氧化酶标记的ｓＰ法进行免疫组化检测： 石蜡切片常规脱蜡至水，３％过氧化氢一甲醇封闭 ５ｍｉｎ，ＰＢＳ（ｐＨ７．２）漂洗后置ＥＥｒｒＡ（ｐＨ８．Ｏ）中，微波 炉抗原修复５ｍｉｎ，ＰＢＳ漂洗后依次滴加一抗４￣Ｃ过 夜，二抗３７￣Ｃ １５ｍｉｎ，辣根酶标记的链酶卵白素工作 液１５ｍｉｎ，ＰＢＳ漂洗后ＤＡＢ显色，自来水充分冲洗终 止反应，苏木素复染，脱水，透明，封片。以ＰＢＳ缓 冲液代替ＣＤ３１、ＰＣＮＡ和ＶＥＧＦ作为阴性对照。 １．４结果判定 ＶＥＧＦ的表达强度按组织切片中肿瘤细胞的显 色比例评分：“一”无阳性细胞，“＋”阳性细胞＜ ２５％，“＋＋”阳性细胞２５％～５０％，“＋＋＋”阳性细 胞＞７５％。 微血管计数参照Ｗｅｉｄｎｅｒ法【１ 。先用４０倍光 镜扫视整个切片，寻找高血管密度区，即热点区（ｈｏｔ ｓｐｏｔ），一般位于肿瘤组织包膜区域的纤维组织中，也 可见于肿瘤组织的任何部位，然后在２００倍视野下 计数热点区被ＣＤ３１染色的微血管数目，血管内皮 细胞被染成棕色，只要与邻近的微血管，肿瘤细胞或 结缔组织分开，就视为一个微血管，即使同一血管的 “头”和“尾”恰巧在同一平面上，也作为两个微血管 计数，血管腔的有无不作为判断血管的标准。Ｍ￣Ｃ 用单个２Ｏ０倍视野下最多的血管数目来表示，不用 多视野下血管数的均数表示，这是因为肿瘤的复发 和转移与热点区的微血管密度有良好的相关性，而 与平均微血管密度无相关性【１ 。 ＰＣＮＡ：ＰＣＮＡ以肿瘤细胞核棕褐色染定义为免 疫组化阳性。对于每一张切片，随机取３个高倍视 野（＜４Ｏ０），计数其阳性细胞数，并以其三者的平均 值定义为肿瘤的ＰＣＮＡ的阳性细胞率，即ＰＣＮＡ的 阳性率（阳性细胞数／计数肿瘤细胞数＜１００％，按组 织切片中肿瘤细胞的显色比例进行半定量：“一”无 阳性细胞，“＋”阳性细胞＜２５％，“＋＋”阳性细胞 ２５％ ５０％，“＋＋＋”阳性细胞＞７５％。 １．５统计学处理 用ＳＳＰＳ １０．０统计软件进行分析，计量资料采 用ｔ检验；计数资料采用 检验和Ｆｉｓｈｉｅｒ－ｅｘａｃｔ检 验；ＶＥＧＦ与ＭＶＣ，ＶＥＧＦ与ＰＣＮＡ两变量间关系采 用直线相关分析。 ２结果 ２．１人脑胶质细胞瘤中ＶＥＧＦ的表达 ＶＥＧＦ阳性染色局限于肿瘤细胞胞浆，偶见周 围结缔组织及血管内皮细胞呈阳性染色。图１为胶 质瘤Ⅳ级ＶＥＧＦ免疫组化染色结果，可见阳性细胞 明显增多，染色强度高，而正常脑组织中几乎无 ＶＥＧＦ阳性表达（表１）。ＶＥＧＦ的表达与星形胶质瘤 组织学分级之间显著相关（ ＝６５．９１６，Ｐ＝０．０００）。 表１胶质瘤及正常脑组织中ＶＥＧＦ的表达 正常脑组织（Ａ组） ６ ０ ０ ３ ２ ６ ０．０ 星形细胞瘤Ｉ一Ⅱ（Ｂ组） １６ ２ｌ ２３．８ｌ ０ ０ ０ 星形细胞瘤Ⅲ（Ｃ组）ｌ０ ２２ ５４．５５ｚｘ 星形细胞瘤Ⅳ（Ｄ组）４ ２ｌ ８ｏ．９５ ＊与Ｃ组ＶＥＧＦ的表达有差异（Ｐ＝０，０３９）； 与Ｄ组ＶＥＧＦ的表达 有显著差异（Ｐ＝０．ｏｏｏ）；ａ与Ｄ组ＶＥＧＦ的表达无差异（Ｐ＝０．０６３） ２．２人脑胶质瘤中微血管定量分析 ＣＤ３１免疫组化染色仅见于血管内皮细胞，正常 脑组织及胶质瘤Ｉ～Ⅱ级中微血管数量少，而胶质瘤 Ⅲ、Ⅳ中微血管数量明显增多（图２）。表２为不同病 理分级胶质瘤的ＭＶＣ结果，可见不同病理分级的胶 质瘤中ＭＶＣ差异有意义，恶性度越高，ＭＶＣ越高。 ２．３人脑胶质瘤中ＰＣＮＡ标记指数 ＰＣＮＡ阳性染色定位于肿瘤细胞核，图３为胶质 瘤Ⅱ级ＰＣＮＡ免疫组化染色结果，可见阳性细胞少， 染色强度低；正常脑组织中ＰＣＮＡ阳性表达率极低 （表３），ＰＣＮＡ的表达与星形胶质瘤组织学分级之间 显著相关（ ＝２６．１８２ Ｐ；０。１２０２）。 ２．４ ＶＥＧＦ表达与微血管计数、细胞增殖活性的关系 直线相关分析表明，ＶＥＧＦ表达水平与ＰＣＮＡ、 ＭＶＣ呈显著正相关（ｒ＝０。９９１，Ｐ＜０．０１，表４）。 维普资讯 http://www.cqvip.com 维普资讯 http://www.cqvip.com 第３期 张淑杰，等．人脑星形胶质细胞瘤血管内皮生长因子表达、血管生成及细胞增殖活性的研究 胞，定位于细胞浆，低恶性胶质瘤表达相对较低，正 常脑组织几乎检测不出。结合ＶＥＧＦ具有的特异性 刺激血管内皮细胞增殖及血管生成的生物学功能， 我们认为ＶＥＧＦ基因可能是人脑胶质瘤血管生成的 重要调节基因，ＶＥＧＦ参与脑胶质瘤的血管生成和 侵袭发展过程。 本研究应用ＣＤ３１抗体显示血管内皮细胞，发 中ＶＥＧＦ表达强度愈高，肿瘤细胞增殖活性也愈高， 说明血管生成旺盛的肿瘤，其细胞分裂活跃，细胞增 殖活性更高，提示ＶＥＧＦ通过刺激肿瘤微血管生长 而促进肿瘤细胞增殖和生长，预后不佳。 总之，ＶＥＧＦ的表达不仅与胶质瘤的发展密切 现ＣＤ３１免疫组化染色仅见于血管内皮细胞膜，形 成环状（横切面）或条状（纵切面）的棕色染色，正 常脑组织及胶质瘤Ｉ～Ⅱ级中新生微血管数量少， 相关：而且与ＭＶＣ、ＰＣＮＡ的表达有显著的相关性， 高表达的ＶＥＧＦ、ＮＶＣ及ＰＣＮＡ提示预后不良，深入 研究其血管生成与生物学行为的关系，可能为胶质 瘤的抗血管治疗提供理论依据。 而胶质瘤Ⅲ～Ⅳ级微血管数量显著增加，血管丧失 正常外形，扩张扭曲，管腔不规则。不同病理分级的 胶质瘤中的ＮＶＣ差异有显著性，恶性度愈高，ＮＶＣ ［参考文献］ ［１］ＳｅｎｇｅｒＤＲ，Ｇａｌｌｉ Ｓ】，ＤｖｏｒａｋＡＭ，ｄ ａ２．Ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌｓ ｓｅｃｌ￣ｔｅ ａ ｖａｓｃｕｌａｒ ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ ｆａｃｔｏｒ ｔｈａｔ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ａｓｃｉｔｅｓ ｔ］ｕｉａ［ｊ］．Ｓｃｉ— ｅｌ＇ｉＣｅ，１９８３，２１９（４５８７）：９８３－９８５． ［２］Ｃｏｎｎｏｌｌｙ ＤＴ，Ｈｅｕｖｅｌｍａｎ ＤＭ，Ｎｅｌｓｏｎ Ｒ，ｄ ａ／．Ｔｕｍｏｒ ｖａｓｃｕｌａｒ ｐｅｒｍｅ— 愈高。说明胶质瘤中１ＶＩＶＣ能较好反映病期进展，高 水平的ＮＶＣ预后不良，ＮＶＣ可以作为胶质瘤预后 ａｂｉｌｉｔｙｆａｃｔｏｒ ｓｔｉｍｕｌａｔｅｓ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ａｎｇｉｏｇｅｎ￣ｓ［Ｊ］．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ，１９８９，８４（５）：ｌ４７ ｌ４７８． 和肿瘤诊断的指标之一。人脑胶质细胞瘤ＶＥＧＦ蛋 白的表达水平与ＭＶＣ呈显著正相关性（ｒ＝０．９９１，Ｐ ＜０．Ｏ１），ＶＥＧＦ表达与ＮＶＣ有良好的相关性，说明 ＶＥＧＦ能较好地反映肿瘤微血管生成的活跃程度。 ３．２ ＶＥＧＦ与胶质瘤细胞增殖 【３ Ｊ Ｓｈｗｅｉｋｉ Ｄ，ｌｔｉｎ Ａ，Ｓｏｆｔｅｒ Ｄ，ｄⅡｚ．Ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｉｎｄｅｅｄ ｂｙ ｈｙｐｏｘｉａ ｍａｙ ８ｔｅ ｈｙｐｏｘｉａ—ｉｎｉｔｉａｔｅｄ ａｎｇｉｏｇ￣ｎｅｓｉｓ［Ｊ］．№一 ｔｕｒｅ，１９９２，３５９（６３９８）：８４３—８４５． ［４］Ｐｌａｔｅ ＫＨ，Ｂｉｅｉｅｒ Ｂ，Ｍｉｌｌａｕｅｒ Ｂ，ｄ ａ／．Ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄ０一 ｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ａｎｄ ｉｔｓ ｃｏｏａａｔｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｉｎ ａ ｒａｔ￣ｉｏｍ．ｍｏｄｄ ｏｆ 研究肿瘤增殖动力学的一个重要方面是检测肿 ｔｕｍｏｒ ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，１９９３，５３（２３）：５８２２－５８２７． ［５］ＰｌａｔｅＫＨ，Ｒｉｓａｕｗ．Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｍａｌｉｇｎａｎｔ ｇｌｉｏｍａｓ［Ｊ］．Ｇｌｉａ，１９９５， １５（３）：３３９．３４７． 【６ Ｊ Ｃ，ｕｉｄｉ ＡＪ，Ｆｉｓｈｅｒ Ｌ，ＨＩｔｌＴｉｓ Ｊ，ｄ ａ／．Ｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌ ｄｅｎｓｉｔｙ ａｎｄ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ 瘤细胞的增殖活性，细胞增殖活性可以判断肿瘤恶 性程度及评估肿瘤生物学特点，是判断肿瘤预后的 指标之一。目前用于检测肿瘤细胞增殖活性的方法 很多，其中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的检测方法简 单，结果可靠。ＰＣＮＡ是一种分子量为３８ｋＤ的酸性 ｉｎ ｄｕｃｔａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａｉｎ ｓｉｔｅ ｏｆｔｈｅ ｂｒ￣ｔ［Ｊ］．Ｊ Ｎａｉｌ ＣａｎｃｅｒＩｍｔ，１９９４， ８６（８）：６１４－６１９． ［７ Ｊ Ｋｉｍ ＫＪ，Ｌｉ Ｂ，Ｖ／ｉｎｅｒ Ｊ，ｄ ａ／．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ 核蛋白，它是ＤＮＡ多聚酶的辅助蛋白，为ＤＮＡ合成 所必需的细胞周期调节蛋白，在细胞周期是Ｇ．后期 及ｓ期合成期，ｃ２期浓度降低，在Ｇｏ期检测不到， 所以只有处于增殖状态的细胞才能检测到ＰＣＮＡ的 存在。ＰＣＮＡ的免疫活性较好地反映了细胞增殖活 ｆａｃｔｏｒ－ｉｎｄｅｅｄ ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓｌｌｌｍｏｌ－Ｏ￣Ｎｔｈ／ｎ ｖ／￣ｏ［ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ， １９９３，３６２（６４２３）：８４１—８４４． ［８］０’Ｒｅｉｌｌｙ ＭＳ，Ｂｏｅｈｍ Ｔ，Ｓｈｉｎｇ Ｙ，ｄ ａ／．Ｅｎｄｏ６ｔａｔｉｎ￣１ｔ／ｉ ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ ｉｎ ｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ ａｎｄ ｔｕｍｏｒ ２８５． ［Ｊ］．ｃｅⅡ，１９９７，８８（２）：２７７ ［９］Ｋａｂａｎ ＬＢ，ｌ￣ｌｕｌｉｋｅｎＪＢ，ＥｒｅｋｏｗｉｔｚＲＡ，ｄ ａ／．Ａｎｔｉａｎｇｉｏｇｅｎｉｅｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ 性，目前多用于评价肿瘤细胞增殖活性及肿瘤生物 学行为。 本研究结果表明，ＰＣＮＡ阳性染色定位于肿瘤 ａ ｒｃｃｕｒ￣ｎｔ＇ ｇｉａ．ｔ ｃｅｌｌｌｌｌｍＯｌ－ｏｆｔｈｅｍａｎｄｉｂｌｅｗｉｔｈｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ａｌｆａ－２ａ［Ｊ］． Ｐ。ｄｉａｔｒｉｃｓ，１９９９，１０３（６ Ｐｔ １）：ｌ１４５一ｌ１４９． ［１０］ＣａｏＹ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｐｏｔｅｎｔｉａｌｓ ｏｆ ａｎｇｉｏ６ｔａｔｉｎｉｎｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ（￣ｒｌｅｅｒ 【Ｊ］．ｎａｅｍａｔｏｌｏ￣ｉｅａ，１９９９，８４（７）：６４３－６５０．． ［１１］Ｗｅｉｄｎｅｒ Ｎ．Ｃｕｒｒｅｎｔ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃｍｅｔｈｏｄｓｆｏｒｍｅａｓｕｒ￣ｉｎｔｒａｔｕｍｏｒａｌｍｉ— 细胞核，细胞核被染成棕黄色，各级胶质瘤细胞中均 有不同程度的ＰＣＮＡ阳性表达，而正常脑组织中ＰＣ— ｅｒｏｖｅｓｓｅｌ ｄｅｎｓｉｔｙｗｉｔｈｉｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｒｅｉｎｏｎｎｍ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｓｏｌｉｄｔｕｍｏｒ￣［Ｊ］． Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ ＲｅｓＴｒｅａｓｔ，ｌ９９５，３６（２）：１６９一ｌ８０． ＮＡ阳性表达率极低。本组胶质瘤Ｉ、Ⅱ级ＰＣＮＡ免 疫组化染色阳性细胞较少，染色强度低；胶质瘤Ⅲ 级、Ⅳ级ＰＣＮＡ免疫组化染色阳性细胞明显增多，且 ［１２］Ｗｅｉｄｎｅｒ Ｎ．１ｎｔｒａｔｕｍｏｒ ｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌ ｄｅｎｓｉｔｙ ａｓ ｐｒｏ￣ｏｓｔｉｃ ｆａｃｔｏｒ ｉｎ ｃａｎｅｅｒ［Ｊ］．Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ，１９９５，１４７（１）：９－１９． １１３ Ｊ Ｋｅｍ ＭＡ，Ｆｅｉｓｅｌ ＫＤ，Ｆｒｉｅｓｅ Ｍ，ｄ越．Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ ａｃｔｉｖ ｏｆ ｍｉｃｒｏ Ｖｌ￣２１１１ａｌ＂ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａｓ ｄｏｅｓ ｎｏｔ ｅｏｎ＇ｅｌａｔｅ ｗｉｔｈ ｔｉｍｅ ｔｏ ｌ＇ｅＣｕｒ． 染色强度高。高恶性胶质瘤中ＰＣＮＡ表达与低恶性 胶质瘤比较差异有显著性。直线相关分析表明， ｒｅｎｃｅ［ＪＪ．Ｊ Ｎｅｕｒｏｏｎｃｏｌ，２ＯＯ３，６３（１）：９．１３． ＶＥＧＦ表达强度与ＰＣＮＡ阳性率呈正相关，即胶质瘤
