4%多聚甲醛的配制

4%多聚甲醛的配制:之蔡仲巾千创作

创作时间：二零二一年六月三十日

0.1M PBS配制 80g NaCl 2g KCl 14.4g Na2HPO4 2.7g KH2PO4

溶于800ml蒸馏水中, 用, 最后加蒸馏水定容至1L即可. 在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌（至少20分钟）, 保管存于室温或4℃冰箱中, 在放置磁力搅拌棒的容器中,将4克多聚甲醛(EM级)溶解于100ml PBS,加入数滴NaOH,在通风厨中60℃加热(翻开瓶盖)使溶解,冷却至室温, 用,使用前新鲜配制. 4%多聚甲醛固定液：用途：进行免疫组织化学方法研究时常选用该固定液.植物灌注固定及后固定（植物器官经该液灌注后, 然后取材, 再用该液浸泡2-24小时）也常选该固定液固定.试剂：多聚甲醛 40gPBS0.1 mol/L PH 7.4 500 ml 混合后加热至60℃, 搅拌并滴加1N NaOH 至清亮为止, 冷却后加PBS 至总量1000 ml.注固按时间24小时.

我们实验室一直沿用的4％多聚甲醛固定液（用于固定鼠或者兔的脑组织标本）的配方是：多聚甲醛（粉末状）：40g磷酸二氢钠：2.965g磷酸氢二钠：29g蒸馏水：1000ml然后一块放到三角

创作时间：二零二一年六月三十日

创作时间：二零二一年六月三十日

烧瓶中, 在磁力搅拌器上加热（60℃）振荡24小时.原来一直用的挺好, 配出来也很清亮.可是这几次也是用同样的方法配出来后, 在加热时是清亮的, 可是瓶底有很多不溶的杂质.等不再加热, 室温后, 溶液就混浊了.再加热到60度又清亮了.再冷却到室温后又混浊了. 不知道为啥？请高手指点一二, 不胜感激

4％多聚甲醛固定液里头的陪法有点小技巧:多聚甲醛是教易溶于碱性条件下的,先加多聚甲醛和氢二钠,直接在通风情况下加热溶解,一般15到20分钟就可以,年夜概放置20分钟后再加二氢钠,溶解后,调PH直到7.2左右即可,最后别忘记放DEPC.其实武汉博士德就有4％多聚甲醛固定液卖的,我们以前都是自己配,一是麻烦,二是要用到DEPC,有毒而且易挥发,还带香味,闻到后喉龙就不舒服.后来就直接找他们买了,方便廉价,省事,最主要的,他们专业点,工具好用!

你要考虑以下几过因素:1.蒸馏水洁净.2.三角烧瓶洁净.3.试剂没问题.

多聚甲醛就是很难溶解, 你把它放在37度温箱里若干天再去看它会有惊喜.以前用过磁力搅拌棒转一上午都不成, 放在一边过几天再看就溶解了.如果要求中性多聚甲醛就用pbs或者用磷酸氢二钠+二氢钠, 如果不要求中性用水就可以啦

我要做免疫组化实验.用ABC法, DAB显色.组织的固定液, 查外文资料用的都是4％多聚甲醛／0.1M PBS.可是实验室的老师说, 是用0.01M的PBS配制, 不知道是不是一样的？还有就是冲刷液,

创作时间：二零二一年六月三十日

创作时间：二零二一年六月三十日

我查的英文资料都是用0.1M PBS.可是实验室老师说是0.01M PBS.不知道年夜家对这个又没有经验.固定用0.1M PBS, 冲刷用0.01M PBS

pbs 0.1M的PBSNacl 8.5克Na2HPO4.12H2O 30.8克NaH2PO4.2H2O 2.8 克双蒸水 定容至1000ml

如果只纯真看看HE的话时间倒无所谓, 但如果实验还要做免疫组化、原位杂交等, 那么最好不要超越24小时, 否则就等着吧, 哈哈.

创作时间：二零二一年六月三十日 创作时间：二零二一年六月三十日