实验动物学习题总结

2.实验动物有那三大特点？ （1）人为遗传限定 人工培育 遗传背景明确 来源清楚

（2）携带的微生物与寄生虫得到控制

对动物自身的控制

对环境的控制 对饲料、水的控制

（3）应用于科学实验

第二章 实验动物的遗传学控制 5. 请叙述支系的概念。

（2）重组同类系：由两个近交系杂交后，子代与两个亲代近交系中的一个近交系进行数次回交（通常回交2次），在不对特殊基因进行选择的前提下，再近亲交配而育成的近交系。 7.试述实验动物传染病的预防与控制措施。

（1）预防措施

①从有资质的实验动物供应商处采购动物

②制定科学的饲养管理与操作规程，严格按操作规程进行饲养管理与动物实验

③定期进行微生物学监测

通过各种非自然繁育技术（包括：④彻底消灭饲养室内外的野鼠 人工哺乳、其它品系带奶、受精卵移植等、卵巢移植、冷冻保存）处理的品系称之为支系。

6. 请叙述重组近交系、重组同类系的概念

（1）重组近交系：由两个近交系杂交后，再经连续20代以上兄妹交配培育成的近交系，

⑤大动物接种疫苗 （2）控制措施

①重要传染病感染要及时捕杀、消毒、隔离

②大动物隔离治疗

③不明死亡原因要剖检明确诊断

第四章 实验动物环境控制 2.环境温度变化对实验动物有哪些影第 1 页

响？

实验动物的最适环境温度为18-29℃，大小鼠屏障系统控制温度为20-25 ℃ 。

恒温动物在一定的外界温度变化范围内能保持体温相对稳定。

环境温度偏离动物最适温度过大，或温度的突然升高或降低对动物的健康影响很大。

①影响代谢

②影响生长发育与繁殖 ③影响生理功能

④影响健康与抗感染能力

⑤影响实验结果：脏器重量、血液生化指标、药物反应

3.空气洁净度与换气次数的定义是什么？

（1）空气洁净度：以空气中粉尘的浓度与粒径大小为指标，并以达到多少级来表示，级数越小表示净化度越高。用每立方英尺空气中含有≥0.5um尘埃粒子数表示，如1万级指的是每立方英尺空气中≥0.5um尘

埃粒子数为10 000个。

一般分为10万级、1万级与100级。 屏障系统要求洁净度达到1万级。

（2）换气次数：单位时间的风量/室内容积

5.什么叫屏障环境？屏障环境是通过控制什么，避免各种可能的传染因子传入屏障环境内？

（1）屏障环境：是专门为清洁级、SPF级动物饲养与动物实验设计的环境。

（2）通过控制：气流、人流、物流与动物流，形成控制微生物进入的屏障。通过对温湿度、噪声与换气次数等各种理化因子的控制，给动物的生长营造良好的环境。

第五章 实验动物营养学

（2）8种必需氨基酸简易谐音记忆法：（一两色素，本来淡些）

异亮氨酸 亮氨酸 色氨酸 苏氨酸 苯丙氨酸 赖氨酸 蛋氨酸 缬氨酸 2.什么叫必需脂肪酸？实验动物所需

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要的必需脂肪酸有哪些？

（1）必需脂肪酸：在不饱与脂肪酸中，亚油酸、亚麻酸与花生四烯酸在

③能引起蛋白质变性，降低蛋白质溶解性，增强蛋白食感优良性。

⑵ 颗粒饲料加工过程中产生的热还

动物体内不能合成，必须由饲料供给，具有以下作用： 称为必需脂肪酸。

①杀菌作用，使颗粒饲料细菌数减少,

（2）必需脂肪酸：亚油酸、亚麻酸、烘干后提高了饲料质量与保存期，保花生四烯酸

4.什么叫全价营养配合饲料？

全价营养配合饲料：是将各种饲料原料粉碎后按一定比例混合，含有各种营养物质与能量均衡，能够完全满足动物的各种营养需要，不需添加任何其它成分就可以直接饲喂，并能获得

证了动物健康生长；

②加热能去除对生理代谢有害的物质。例如在未经煮烧过的豆类蛋白中含有胰蛋白酶抑制剂，对动物生长与生理代谢有影响；

③通过加热,可除去腥味而增加饲料的适口性。

最大的经济效益。目前，大鼠、小鼠、⑶ 颗粒饲料方便运输储存。能有效地家兔与豚鼠都采用全价营养配合饲料。

5.试述颗粒饲料的优点。

⑴颗粒饲料加工过程中营养素加热易于动物的消化吸收

①加热有烧煮作用，能将粉料湿润软

保证其分布均匀。 ⑷ 便于饲养管理。

因减少了饲料加工与饲喂工序，操作方便而减轻了劳动强度。颗粒饲料饲喂方便，一般大小鼠每两三天喂一次，兔每天喂一次即可，而且饲喂

化，并促使组织细胞破裂，纤维撕碎； 量容易掌握。饲喂过程中能避免动物②能使生淀粉糊化，容易被动物消化吸收；

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扒食而造成不必要的浪费。

第六章 常用实验动物

1.什么叫阴栓？检查阴拴有什么意义？

阴拴：雌雄小鼠交配后，在雌鼠阴道口形成白色的阴道拴，有防止精液流出，提高受孕率的作用。阴拴是确认小鼠受孕的标志，有阴拴的小鼠记为妊娠0.5天。

2.什么叫生长曲线？了解动物的生长曲线有什么意义？

生长曲线：以小鼠出生后不同周龄（一般为3-15周）为横轴线，相应体重为纵轴线，得到不同品系小鼠的生长曲线。

意义：在体成熟前，我们可以用体重表示动物的年龄，或用年龄估算动物的体重。

3.近交系小鼠Balb/c与C57BL，远交系小鼠KM与ICR的生物学特性与应用？

Balb/c：白化小鼠主要生物学特征：乳腺癌发病率低，对放射线敏感，有自发性心血管病变，主要用于免疫学研究与单克隆抗体的制备。

C57BL/6j：黑色主要生物学特性：乳腺癌自然发病率低，对放射线中度抵抗，对结核杆菌敏感，雌性经超排后，排卵数多，遗传背景清楚，基因组测序完成，常用于转基因小鼠的制备与肿瘤学、遗传学的研究。 昆明种KM：白化小鼠 主要生物学特征：繁殖率与存活率高，抗病率与适应性强，雌性小鼠乳腺肿瘤发病率25%，广泛用于药理、毒理、病毒与细菌学研究，以及药品、生物制品的检定。

ICR：白化小鼠 主要生物学特征：繁殖力强，母性好，体型较昆明种小鼠大，广泛用于药理、毒理、病毒与细菌学研究，以及药品、生物制品的检定，转基因小鼠的胚胎移植。 豚鼠习性与行为

草食性，喜群居，性情温顺，胆小怕惊，用叫声表达要求，不善于攀登与跳跃

豚鼠主要解剖学特点

1.外形：身形短粗，头大，身圆，耳

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廓大，四肢短小，无尾巴。前足有四趾，后足有三趾，脚形似豚，故名豚鼠。新生豚鼠体重一般在50-150g之间；成年豚鼠体长22.5-35.5cm，体重450-700g。

2.肠管较长，约为体长的10倍，其中盲肠特别膨大，约占整个腹腔的1/3，这是草食性动物的特征。 3.豚鼠的淋巴系统较为发达。 4.豚鼠的浅表静脉很少，不利于实验中采集血样与血管内给药。 豚鼠主要生理特点

1.生长发育 母鼠怀孕期较长，为65

左旋葡萄糖内酯氧化酶，不能合成维生素C。所需维生素C必须来源于饲料中。

4.呼吸系统与消化系统抗病能力较差，对抗生素敏感。 5. 自身体温调节能力较差

6. 抗缺氧能力强 豚鼠能耐低氧、抗缺氧能力比小鼠强4倍，比大鼠强2倍。

犬习性与行为

1.与人为伴，能服从人的命令。受到粗暴对待后丧失对人的信任，难以接近，甚至攻击人

（59～72）天，胎儿在母体发育完全，2.对外界环境适应性强 出生后即已完全长成，2月龄达到性成熟，体重在400g左右；3月龄达到体成熟，雌性豚鼠重700g，雄性豚鼠重750g左右。

2. 嗅觉、听觉较发达 豚鼠嗅觉、听觉较发达，对各种刺激均有极高的反应，如对音响、嗅味等均极敏感，并引起流产，受惊时亦易流产。 3.不能合成维生素C 豚鼠体内缺乏

3.合群欺弱 4.爱活动 5.肉食性 6.寿命：10-20年 犬主要解剖学特点

1.体型：属大型实验动物，根据其体重的差异，又分为大型犬（50kg以下）、中型犬（25kg以下）与小型犬（10kg以下）。

2.牙齿：犬齿、臼齿发达，撕咬力强，但咀嚼力差，是食肉动物牙齿的特征。

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根据犬齿可估计年龄。犬出生后10多天开始出乳牙，2个月后开始换恒牙，8-10个月恒牙出齐。

3.消化系统：肠道短，仅为体长的3倍。

4.视网膜上无黄斑，即无最清晰的视觉点。

5.生殖系统：雌性犬为双角子宫，乳头4-5对，分列腹中线两侧。雄性犬无精囊与尿道球腺，附睾很大，前列腺极发达，有特殊的阴茎骨。 6.神经系统：犬的神经系统发达，大脑特别发达。

7.皮肤汗腺极不发达，仅趾垫有少许汗腺。

犬主要生理学特点

1

粘液质（安静的）---均衡的迟钝型 胆汁质（不可抑制的）---不均衡，兴奋占优势的兴奋型

忧郁质（衰弱的）---兴奋与抑制均不发达

3. 嗅觉、听觉发达，视力较差，红绿色盲。

4. 生殖生理：春秋发情，发情后1-2天排卵。妊娠期60天，每胎产仔2-8只，哺乳期60天。

5. 有A、B、C、D、E五种血型。6. 汗腺不发达

5.小鼠、大鼠、豚鼠与兔的性成熟与体成熟年龄、妊娠期与哺乳期天数 小鼠 生长期短、成熟早、繁殖力强 0日龄：出生时1.5g，体长20mm，赤裸无毛，身体成半透明，眼紧闭，两耳贴皮肤，嗅觉、味觉敏感。 3日龄：皮肤出现毛色 4-6日龄：双耳张开耸立， 7-8日龄：开始爬动

9-11日龄：听觉发育，被毛长齐 12-14日龄：睁眼，开始采食饮水，

品种众多，体型大小可差200倍以上（0.3kg-100kg）

大型犬：25kg以上 中型犬：10-25kg 小型犬：3-10kg 袖珍犬：3kg以下 2. 神经类型：

多血质（活泼的）---均衡的灵活型

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四处活动 21日龄：离乳

性成熟：♂45-60日龄，♀35-45日龄

体成熟：♂70-80日龄，♀65-75日龄

发情周期：4-5天 妊娠期：19-21天 哺乳期：20-22天 生育期：1年 寿命：2-3年 大鼠

性成熟：♂45-60日龄，♀35-45日龄

体成熟：♂80-90日龄，♀75-85日龄

发情周期：4-5天 妊娠期：19-21天 哺乳期：20-22天 生育期：1年 寿命：2.5-3年 豚鼠 生长发育指标

0日龄：出生时50-100g，有被毛，

两眼睁开，有视力，出生1小时后能走动，数小时能吃软料。 4-6日龄：能吃硬料 15-18日龄：离乳 性成熟：70日龄 体成熟：75-85日龄 发情周期：16天 妊娠期：65-70天 每窝产仔：1-7只 哺乳期：16天 寿命：6-7年

6.什么叫刺激性排卵？哪些动物有刺激性排卵的生理特点？

刺激性排卵是指雌性动物必须通过雄性的交配动作刺激才能排卵。兔子与猫具有这生理特点。

10.体内合成维生素C的酶叫什么？哪些实验动物体内缺乏这种酶，需要从饲料中添加？

左旋葡萄糖内酯氧化酶，须食物中补充。猕猴与豚鼠体内缺乏这种酶 11.什么叫性皮肤？

“性皮肤”是猕猴属的生殖生理特征

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之一，表现为排卵前后雌性猕猴生殖器附近以及臀部皮肤，甚至前额与脸部皮肤肿胀、发红，月经来临前消退。

第七章 人类疾病动物模型 2.一个好的动物模型应该包括哪些特点？

1动物疾病表现应与相应的人类疾病有类似之处，尽可能再现所要研究的人类疾病的病理变化；

2动物模型的可利用性表现在是否具有可重复性，最好能在二种以上动物上得到证实；

3所选的动物背景资料要完整，生命史能满足实验需要；在同等条件下，优先使用标准化的实验动物。 4动物经济而来源充足，便于转运，易于关养。

5动物体型不宜过大，易获得标本。 5.免疫缺陷动物模型的分类。

1.

6

3.

NK细胞功能缺陷动物：Beige小鼠

4.

联合免疫缺陷动物：Scid小鼠、人工培育的联合免疫缺陷动物

5.

获得性免疫缺陷动物

裸小鼠、CBA/N，beige与Scid小鼠的主要生物学特性是什么？

1.T淋巴细胞缺陷动物：裸小鼠主要特性：

① 无毛、裸体、胸腺发育不良。随着年龄增长，皮肤逐渐变薄、头颈部皮肤出现皱折、生长发育迟缓。 ② 由于无胸腺，导致缺乏成熟的T淋巴细胞，因而细胞免疫功能低下。而6-8周龄裸小鼠的NK细胞活性代偿性增高，高于一般小鼠。

③ B淋巴细胞正常，但其免疫功能欠佳。表现在B淋巴细胞分泌的免疫球蛋白以IgM为主，仅含少量的IgG。 ④ 抵抗力差，容易患病毒性肝炎与肺炎。因此必须饲养在屏障系统中。 ⑤ 为了提高繁殖率与存活率，一般采用纯合型雄性小鼠与杂合型雌性小鼠

T淋巴细胞功能缺陷动物：裸小鼠、裸大鼠

2.

B淋巴细胞功能缺陷动物：CBA/N小鼠

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交配的繁殖方式，可以获得1/2 纯合型仔鼠。

主要用途：广泛应用于肿瘤学、免疫学、毒理学等基础医学与临床医学的实验研究。

2. B淋巴细胞功能缺陷动物：CBA/N 基因突变符号及定位：xid，X性染色体

一般特征：性连锁隐性突变，外表无特征。

免疫系统特征：T细胞功能正常；B细胞数量减少，功能降低，对有丝素刺激缺乏反应；血清IgM与IgG含量很少。纯合子雌鼠（xid/xid）与杂合子雄鼠（xid/Y）对非胸腺依赖性2型抗原缺乏体液免疫反应。 与人类丙种球蛋白缺乏症及Wiskott-Aidsch氏综合症相似，是研究B细胞发生、功能与异质性的理想模型。

3. NK细胞功能缺陷动物：Beige小鼠

基因突变符号及定位：bg，13号染

色体

一般特征：毛色变浅，耳朵与尾巴色素减少。

免疫系统特征：内源性NK细胞功能缺乏，中性粒细胞对细菌的趋化性与杀伤作用降低，巨噬细胞抗肿瘤杀伤作用出现较晚，缺乏T细胞的细胞毒功能，对同种、异种肿瘤细胞的体液免疫功能减弱。

对各种病原体较为敏感，必须在SPF环境中才能较好的生存 。 与人类齐-希二氏综合症相似。 4. 联合免疫缺陷动物：Scid小鼠 主要特性

① SCID小鼠外观与普通小鼠无异，体重发育正常。唯胸腺、脾脏、淋巴结的重量仅为正常小鼠重量的1/3以下。

② 胸腺、脾脏、淋巴结中的T淋巴细胞与B淋巴细胞大大减少，细胞免疫与体液免疫功能缺陷；但巨噬细胞与NK细胞功能未受影响。

③ 骨髓结构正常，外周血中的白细胞

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与淋巴细胞减少。

④ 容易死于感染性疾病，必须饲养在屏障环境中。

靶器官、毒性反应症状及抢救措施提供依据，也为临床毒性及不良反应监测提供参考，应使动物产生明显的或

⑤ 两性均可生育，每胎产仔3-5只，严重的毒性反应，或个别动物死亡。寿命达1年以上。

第八章 实验动物的选择与应用 2.一般药物筛选与毒性试验不选用近交系动物的理由是什么？

近交系动物由于其基因高度纯与，表型一致，因而对试验刺激也一致。但是对于同一种实验刺激，不同近交系由于其遗传组成不同，因而对实验刺激的敏感度也不同，有的品系高，有的品系低，它不能反映人作为基因杂合状态下对实验刺激的反应，因而一般药物筛选与毒性试验不选用近交系。

4.长期毒性试验设定3个剂量组的目的是什么？

一般设定3个剂量组。低剂量组目的是寻找动物安全剂量范围，为临床剂量设计作参考。此剂量下应不出现毒性反应。高剂量组目的是为寻找毒性

中剂量组应使动物产生轻微的或中度的毒性反应。

5什么叫模式动物？在遗传学研究上公认的模式动物有哪些？

在遗传学上用来研究阐明正常遗传及遗传性疾病机理的动物称为模式动物。

目前在遗传学研究上公认的模式动物有果蝇、线虫、斑马鱼与小鼠等。

2

动物实验分组设计的基本类型有哪些？

（一）完全随机化设计

（二）按体重分层随机区组设计 （三）配对设计

第十章 实验动物胚胎工程技术 1 请叙述超数排卵、体外受精、胚胎分割、胚胎培养、胚胎移植、胚胎冷冻保存的基本概念。

超数排卵：通过注射激素刺激卵巢大

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量排卵。经超数排卵处理，动物卵巢大量的卵泡同时成熟并排出，排卵数可增加几倍至十几倍，一次可获得大量的卵细胞、受精卵或早期胚胎。 体外受精：是指成熟精子与卵母细胞在体外环境下完成受精的过程。这一过程包括卵母细胞的收集或未成熟卵母细胞的培养成熟、精子的获取、获能处理、受精及受精后胚胎培养等。 胚胎分割技术：是把2至16次的早期胚胎细胞一个个分离开，变成单个胚胎细胞，再将分割好的胚胎细胞经双层琼脂包埋后，在CO2培养箱内（37℃）培养。待发育至桑椹胚或囊胚时再移植到受体子宫内，着床妊娠及产仔。这样一个胚胎就可分割成几个胚胎，且遗传性能完全一样。实际上这也是一种克隆技术。

胚胎培养：是指将获得的早期胚胎在体外人工创造的环境中进行培养，以观察其发育或人工干预某一发育过程的可能性。

胚胎移植：将受精卵或发育到一定时

期的早期胚胎,移植到受体动物生殖管道的一定部位,在子宫内继续生长、发育、分娩、出生仔代动物的技术称为胚胎移植。是胚胎工程的最后一道工序。

胚胎冷冻保存是指在低温（-196℃液氮内）条件下利用低温保护剂保存生殖细胞及胚胎的一门技术。

2 什么叫ES细胞？科学家们对ES细胞感兴趣的理由是什么？

胚胎干细胞（Embryonic stem cell，简称ES细胞）是指从囊胚期胚胎的内细胞群分离培养而得到的、可在体外传代并维持分化潜能与正常核型的干细胞系。 理由

胚胎干细胞的应用

1.用于研究哺乳动物个体的发生发育规律

由于ES细胞可分化为胚胎内胚层、中胚层与外胚层中任何一种类型细胞，因此可用遗传标记的ES细胞(如标记半乳糖苷酶基因)注入囊胚

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腔，通过组织化学染色追踪ES细胞的分化特点，探索胚胎发育过程中细胞分化、组织与器官形成的规律。小鼠的ES细胞已成为研究哺乳动物早期发育规律的重要工具之一。 2.在体外研究细胞的分化规律 ES细胞仅在饲养层细胞上或在添加白血病抑制因子(LIF)或白细胞介素-6(IL-6)的培养液中维持不分化状态。当培养液中添加分化诱导剂，

动物。用于研究未知基因的生物学功能。

4. 治疗人类的某些难治性疾病 人类由于细胞坏死、退化或功能异常引起的疾病，如帕金森综合症、少年糖尿病与老年痴呆症等，已成为医学上尚未攻克的顽症。利用ES细胞可以诱导分化形成新的组织细胞的特性，移植ES细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能。目

如牛黄酸(RA)、二甲基亚砜(DMSO)、前，在动物实验方面，用ES细胞诱丁酰环腺苷酸与3-甲氧基苯甲酰胺等，可诱导ES细胞发生不同类型的分化，通过研究ES的分化特点可揭示细胞分化与凋亡机理。

3.用于研究基因的功能与制备基因敲除动物

由于用ES细胞可进行基因打靶，容易获得基因敲除或定向插入外源基因的ES细胞，因此是基因敲除与基因插入的首选细胞。

通过筛选获得阳性细胞，然后用嵌合体或细胞核移植技术获得转基因

导分化出的某些组织细胞已成功地治愈糖尿病、肝衰竭、心衰竭与成骨不良等疑难病症。

5.培育出人造组织器官，用于器官移植

随着组织工程技术的发展，通过ES细胞体外诱导分化，还可以培育出人造组织器官，解决目前临床上存在的供体器官不足与器官移植后免疫排斥的问题。

2

根据供体核的来源不同，细胞核移植包括哪几种？一般所说的“克

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隆”是指那一种？

根据供体核的来源不同，核移植包括以下几种：

1胚胎细胞核移植：未着床的囊胚（未分化）

2胚胎干细胞核移植（未分化） 3胎儿成纤维细胞核移植：出生前的胎儿（未分化或低分化）

4成年体细胞核移植（已分化）此种也即一般所说的“克隆”

3

2．将外源基因转染胚胎干细胞或体细胞，再将转染的细胞作为供体核移植到去核卵母细胞，发育成胚胎。方法有：

① 电穿孔法：细胞暴露于高电压时，细胞膜经高电压瞬时击穿，从而使外源DNA被摄入细胞中。

② 脂质体法：脂质体是一种人造膜，将外源DNA装入脂质体，与培养细胞一起温育，即可将外源DNA导入受体细胞。

③ DEAE-葡聚糖介导法： ④ 磷酸钙介导法： ⑤ 基因法：

4

外源基因导入胚胎内主要有哪几种方法？

1．直接导入受精卵或早期胚胎内 ① 显微注射法：在显微镜下利用玻璃显微注射针将外源DNA直接注入到受体的受精卵雄性原核内。 ② 逆转录病毒载体法：将外源基因克隆到逆转录病毒载体，感染受体细胞时，外源基因可整合到宿主细胞染色体内。用于转基因与基因治疗。 ③ 精子载体法：将外源DNA与动物精子一起孵育，在体外受精过程中由精子将外源DNA带入卵内。

什么叫随机插入，什么叫定点整合？

外源基因整合到受体细胞染色体可分为以下两种情况：

① 随机插入：外源基因进入细胞后，随机插入到任意的染色体内。如果插入到一个基因内，可能导致该基因的失活。另外，插入外源基因受邻近序列的影响，其表达可能高，

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也可能低。

② 定点整合：实现定点整合的前提是外源基因的一端或两端带有定点整合部位的同源DNA序列，即所谓的同源臂（Homologous arm）。当外源基因载体进入细胞后，同源臂序列与宿主染色体上的相同序列相互靠近，通过同源重组，将外源基因载体置换到染色体相应的位置上，实现了定点整合。我们把这种技术形象地称之为“基因打靶”。

定点整合（targeted integration） 同义词：基因打靶（Gene targeting） 是指将基因组的某一基因序列克隆出来并加以改造，再导入同种细胞内。该基因序列可以与细胞基因组内的同源序列（靶基因）发生重组，从而将改造后的基因置换到基因组内，实现靶基因敲除、替换或改造。

第十一章 遗传工程动物

1.什么叫遗传工程动物？试述遗传工程动物的分类。

遗传工程动物：指将特定的外源基因

或经改造的自身基因片段导入动物受精卵或早期胚胎，使之稳定整合于宿主的染色体基因组内，并能遗传给后代的一类动物。

遗传工程动物按照外源基因修饰方式

可分为：转基因动物

（Transgenic animals，加入一个外源基因)；基因敲除动物(Gene knockout animals， 使一个基因功能失活)；基因敲入动物(Gene knockin animals，加入或替换一个基因)；染色体工程动物(Chromosome

engineered animals，使染色体片断缺失、易位、倒置、 重复)。

4.以显微注射法为例，说明转基因小

鼠的制作方法。

（1）制备外源基因的构件

（2）动物的准备：供受精卵鼠、正常雄鼠、结扎雄鼠、假孕雌鼠 （3）超排卵采集受精卵：超排卵与取受精卵

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（4）向受精卵雄性原核注入DNA溶液

（5）将2细胞的受精卵移植到假孕雌鼠的输卵管中 （6）外源基因的鉴定

5.试述逆转录病毒载体转基因的基本原理。

逆转录病毒是一类具有逆转录酶，能将病毒RNA逆转录成双链DNA，进而整合到细胞染色体DNA的病毒。利用这个特点，可将逆转录病毒改造成外源基因表达载体，用于基因治疗研究与转基因动物的制备。

6.试述基因敲除小鼠的制作方法。 (1)打靶载体的构建

(2)将打靶载体导入到ES细胞内 (3)超数排卵采集胚囊

(4)向囊胚腔内注入带有外源基因的ES细胞

(5)将囊胚移植到假孕小鼠的子宫内 (6)检查嵌合体是否具有生殖系传播能力

(7)导入基因的鉴定

(8)基因敲除小鼠的建系

如此获得的基因敲除小鼠是杂合子，因另一条染色体的等位基因正常，因而不表现异常。为了研究该基因敲除对小鼠的影响，需要将杂合子与杂合子交配，出生的仔鼠中将有1/2位纯合子，可用于研究，纯合子与纯合子交配产生100%纯合子，由此建立基因敲除小鼠的品系。

ES细胞介导的转基因优、缺点 优点：能在细胞水平进行筛选。能加入、剔除或替换某个基因，或进行小到一个或几个核苷酸修饰。

缺点：ES细胞的培养条件苛刻、技术要求高，成本大。不同ES细胞株的生殖系传播能力差异很大。ES介导的转基因需要经过嵌合体这一中间步骤。

➢

鼠痘病毒自然感染的动物为（ c ）

A 所有啮齿类动物 B 所有实验动物

C 仅能感染小鼠 D 仅能感

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染大鼠

• ➢

基因动物与基因敲除动物在DNA构

是非题（每题1分，共15分） 件上的不同点 分布在世界各国的同一品系的近交系其遗传组成是完全一致的。（√ ）

•

填空题(每个空格1分，共20分)

➢

4．大小鼠的性周期为 4-5 天，妊娠期与哺乳期均为 19-21天。哺乳期：20-22天

第二章7. 在饲养繁殖中发现一只雄性无毛小鼠，已知无毛基因hr/hr是隐性基因，根据Snell发明的基因导入原理，如何将此基因导入到C57BL/6J小鼠体内？

12. 近交系动物与封闭群动物在种群维持与生产时的交配方式上有什么区别？

6.在双走廊屏障系统中，人、动物、物品的移动路向是怎样的？

第八章2.一般药物筛选与毒性试验不选用近交系动物的理由是什么？ 第十一章2.试述显微注射法制备的转

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