畜牧微生物作业题

畜牧微生物作业题（一）

一、填空题

1细菌的基本外型比较简单，仅有（球）状、（杆）状和（螺旋）状。 2测量细菌大小的计量单位是（微米（或μm））。观察细菌使用的是（光学）显微镜。使用的物镜是（油镜）。 3革兰氏阳性菌细胞壁较（ 薄），其主要化学成分主要是（肽聚糖 ），革兰氏阴性菌内毒素的主要成分是(类脂A ) ，存在于（脂多糖（或LPS） ）中。 4有些细菌具有( 荚膜)、（ 鞭毛）、（ 纤毛（或菌毛、伞毛、柔毛） ）和（芽孢 ）等特殊结构。

5产生荚膜或粘液层的细菌，在固体培养基上形成（光滑型（或S） ）菌落，失去荚膜后形成（粗糙型（或R） ）菌落。 6根据纤毛的功能可将纤毛分为（普通纤毛）、（性纤毛）。 7细菌生长繁殖需要5大营养物质它们是（水 ）、（ 碳素）、（氮素 ）、（无机盐 ）和（ 生长因素）。

8根据细菌对碳素营养利用的能力不同，可以把细菌分为（自养）菌和（异养 ）菌，根据6细菌获得能量的方式不同可分为(光能)菌和（化能 ）菌。

9病原性细菌在其生长繁殖的（对数 ）期致病性最强，在（稳定 ）期代谢产物积累最多。细菌以（二分裂）方式进行无性繁殖。

10原核型细胞微生物除细菌和蓝藻类外还包括（螺旋体 ）、（霉形体 ）、（ 立克次氏体）、（ 衣原体）、（ 放线菌）。 二、选择题

1.观察细菌时使用的物镜放大倍数为（ D ） A 10倍 B 20 倍 C 40倍 D 100 倍 2. 下面属于单染色方法的有（ B ）

A 革兰氏染色 B 美蓝染色 C 抗酸染色 D 姬姆萨染色 3. 实践中常用下列哪种培养基进行分离培养（ A ）

A平板培养基 B斜面培养基 C高层培养基 D斜面高层培养基 4. 下面不属于细菌特殊构造的有（ C ）

A荚膜 B 芽孢 C中介体 D纤毛 E鞭毛 5. 细菌的四个生长时期内致病性最强的在哪一时期（ B ） A 迟缓期 B 对数生长期 C 稳定期 D衰亡期 三、概念

1微生物：是指个体微小，通常须借助显微镜才能看见的生物类群的总称。

2芽胞：部分杆菌、个别种类球菌在生长发育的某一阶段，可以在菌体内形成一内生孢子，称为芽胞。 3光能异养菌：少数细菌体内含有细菌叶绿素，也能利用光合作用取得能量，可成为光能异养菌。 4化能异养菌：异养菌绝大多数是从氧化有机化合物取得能量的，称为化能异养菌。

5菌落与菌苔：单个细菌在适宜的固体培养基表面或内部，经过一定时间的培养后，繁殖出数量巨大的菌体，形成一个肉眼可见的、有一定形态的群体，称为菌落。菌落互相连接成片，称为菌苔。

6细菌的双命名法：既有署名家中明，第一个词为属名，用拉丁文或拉丁化的名词，斜体，第一个字母要大写；第二个词为种名，用拉丁文或拉丁化的形容词或名词所有格。 四、问答

1、微生物的概念及微生物的类型?

（1）微生物是指个体微小，通常须借助显微镜才能看见的生物类群的总称。；（2）微生物按核的类型和个体形态，微生物界划分为三大类型：原核微生物 个体为单细胞，含DNA和RNA,DNA分子在细胞质中未形成细胞和结构。原核微生物包括细菌、螺旋体、支原体、衣原体和蓝藻类。真核微生物 个体为单细胞或多细胞，含DNA和RNA,DNA分子在完整的细胞核内。真菌、大多数藻类和原生动物属于真核微生物。非细胞型微生物 个体不呈细胞结构，仅含一种核酸（DNA和RNA）与蛋白质构成简单的颗粒，必须在宿主细胞内才能增殖；或具有传染性的蛋白颗粒。病毒、亚病毒因子属于这种类型。 2、微生物学的概念，微生物学的发展阶段，代表人物及其主要贡献?

（1）微生物学是研究微生物形态，结构，生理，遗传变异，生态分布，分类，与人类、动植物相互关系的科学。（2）微生物学发展分为三个阶段：初期形态学阶段 这一阶段从17世纪中后期起至19世纪中期，约经历了200年。1676年吕文虎

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克用自制的放大200倍的简单显微镜首次观察到了细菌。生理学与免疫学发展阶段 这一阶段从19世纪中期至20世纪初期，约经过50年。1861年，法国学者巴斯德以著名的弯颈瓶试验，首次揭示灭菌肉汤的腐败变质是由微生物作用引起的。现代微生物学发展阶段 20世纪40年代以来，随着生物学、遗传学、生物化学、分子生物学、电子计算机等理论和技术的迅速发展，推动了微生物学研究迅速深入发展，微生物学更成为整个生命学科中发展最快的前沿学科。 3、细菌的基本外形有哪几种？每种外形的细菌都有哪些排列？

（1）细菌的外形有三种：球状、杆状、螺旋状（2）各种外形的细菌排列方式：球菌 多数球菌呈球形，亦有呈椭圆似肾形、豆形。按期分裂的方向及分裂后彼此相连的情况，又可分为：双球菌、链球菌、四联球菌、八叠球菌和葡萄球菌。杆菌 一般呈正圆柱形，也有近似卵圆形的，菌体多数平直，亦有稍弯曲的。只有一个与长轴相垂直的横分裂方向，多数杆菌分裂后彼此分离散在称为单杆菌；有些分裂后两两相连成为双杆菌；有的分裂后多个相连成立安装成为链杆菌；少数杆菌分裂后呈铰链样粘连，形成八字形或栅栏样排列。螺形菌 菌体弯曲或呈螺旋状，两端钝圆或呈尖突状。又可分为弧菌和螺菌。

4、细菌的基本结构包括哪几部分？各自的功能？

（1）细菌基本结构的名称：细菌细胞都具有细胞壁、细胞膜、细胞质、核体等基本结构。（2）基本结构的主要功能：细胞壁主要功能是保持细菌一定的外形，保护细菌免受外界渗透压和有害物质的损害，并与细菌的致病性、抗原性、对噬菌体和药物的敏感性以及革兰染色反应特性等密切相关。细胞膜的功能与真核生物细胞膜相似，参与细菌细胞的呼吸、能量代谢、生物合成，细菌内物质转运、交换等，细胞膜受损伤细菌将死亡。细胞浆功能通常指细菌细胞膜内包含的除合体外的所有物质，主要成分是水、蛋白质、类脂质、多糖、核酸和少量无机盐类等，具有明显的胶体性质，含有许多酶系统、核蛋白体、内含物及质粒，是细菌各种物质贮存、合成、代谢的场所。核体功能细菌核体DNA分子包含的基因很多，控制细菌的生长繁殖和遗传变异。，核蛋白体功能是细菌合成蛋白质的场所，其作用与真核细胞的核糖体相同，内含物功能有的细菌细胞质内有不同的内含物。

5、细菌的特殊结构包括哪几部分？有何功能？

（1）细菌特殊结构：有些细菌在一定条件下还可产生荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等特殊结构。（2）特殊结构的主要功能：荚膜功能具有保护细菌的功能。鞭毛功能有收缩性能，当有节律的收缩时，可引起细菌运动，是细菌的运动器官。菌毛功能分为普通菌毛和性菌毛，某些致病性细菌通过普通菌毛牢固地附着于动物消化道、呼吸道和泌尿生殖道等黏膜上皮细胞表面，生长繁殖，发挥致病作用，这些菌毛是一种毒力因子，也具有良好的免疫原性。性菌毛是由携带一种致育因子的质粒编码产生的，，也是细菌表面与噬菌体吸附的受体。芽孢功能是某些细菌抵抗不良环境条件以保存生命的一种休眠状态。 6、说明革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌细胞壁结构的差异，并解释革兰氏染色的机理。

（1）革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁主要结构成分的差异：革兰氏阳性菌的细胞壁较厚，达15~80mm。其化学成分主要是肽聚糖，站细胞壁总成分的40%~95%，形成15~50层的聚合体。此外，还有磷壁酸、多糖和蛋白质等。革兰氏阴性菌细胞壁较薄，其结构和成分较复杂，由外膜与周质间隙组成，无磷壁酸。外膜由脂多糖、磷脂、外膜蛋白质和脂蛋白等组成，脂多糖位于最外层，其中的类脂A是革兰氏阴性菌内毒素的主要成分。周质间隙是革兰氏阴性菌细胞壁外膜与细胞膜之间狭窄的空隙，其中含有一薄层肽聚糖以及蛋白酶、核酸酶、肽聚糖合成酶、结合蛋白和受体蛋白等多种周质蛋白。（2）革兰氏染色机理：1.革兰氏染色法，（1）草酸铵结晶紫染色：在已干燥、固定好的抹片上，滴加草酸铵结晶紫染色液，经1~2min，水洗。这时细菌都染成紫色。（2）碘溶液助染：加碘溶液于抹片上，作用1~3min,水洗。这时细菌都呈更深的紫色。（3）95%酒精脱色：加95%酒精于抹片上，可见标本中一些紫色染料脱出、直至紫色染料不在脱出（时间因细菌抹片厚薄不同而异，大约30s至1min），水洗。这时有的细菌原染上的紫色被脱去，呈无色；有的细菌原染上的紫色脱不了，仍保持紫色。（4）复染：加碱性复红液（或沙黄液或稀释石碳酸复红液）复染10~30s，水洗。这时已脱色的细菌复染成红色，未脱色的细菌呈蓝紫色。（5）油镜观察：将染好的片用滤纸盖上吸干或烘干，油镜观察，呈蓝紫色的细菌为革兰氏阳性菌，呈红色的为革兰氏阴性菌。2.革兰氏染色原理：G—菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经石炭酸复红或沙黄复染后就成红色。G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色。 7、培养真菌必须具备哪些条件？

1.真菌生长繁殖的基本营养需要：真菌生长繁殖的基本营养需要和细菌相似，绝大多数为异养菌。对营养要求不严一般只要供给适当的碳水化合物和无机氮或有机氮就可以良好的生长繁殖。2.温度：大多数真菌的最适生长温度范围为20~30℃。但不同类的真菌对温度要求也不同。一般真菌在0℃以下停止生长，但并未死亡。也有一些真菌能在0℃以下生长繁殖，引

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起冷藏畜禽产品的败坏。而哺乳动物消化道的真菌在37℃时生长的最好。3.氧气：绝大多数真菌具有需氧呼吸的特点，培养它们时需充足的氧气；有些是兼性厌氧菌，少数是严格厌氧菌。4.湿度与渗透压：真菌适宜生长在潮湿的环境里。某些真菌能生长在炼乳、果酱中，它们耐高渗透压，还有一些真菌，可以在稀薄的溶液中生长。5.PH：大多数真菌喜生长在酸性环境中，他们在pH3~6之间生长良好，而在pH1.5~10.0之间也可以生长。 8、细菌细胞内外交换物质的方式及其特点？

1.单纯扩散：细胞膜两侧的物质靠浓度差，通过细胞膜上含水小孔进行的分子扩散。不需要消耗能量，不是细菌吸收营养物质的主要方式。水、氧气、二氧化碳、乙醇、甘油、Na﹢及某些脂肪酸、氨基酸等可通过此方式进出细菌细胞。2.促进扩散：某些单糖、氨基酸、维生素或无机盐等先与细菌细胞膜上的载体蛋白特异结合，然后被转运至细胞内。载体蛋白的结合转运具有特异性的选择性，也不需要能量，转运物质的速率也决定于细胞膜两侧的浓度差。3.主动运输：与促进扩散一样，转运的物质需要与细胞膜上的载体蛋白特异结合，能将特异结合的物质“泵”进浓度高的细胞内，因而需要消耗能量。这是细菌吸收营养物质的一种主要方式。4.基团转位：主要是厌氧型和兼性厌氧型细菌中具有一个复杂的转运系统，主要用于糖、脂肪酸、核苷、碱基等的运输。这些物质在运输过程中发生化学变化，也有特异性载体蛋白参与，需要能量，这种方式可使物质源源不断地输入细胞内。

畜牧微生物作业题（二）

一、填空题

1放线菌是界于（细菌）和（真菌）之间的一群单细胞微生物，主要用于（抗生素）的生产。 2霉形体又称（支原体），是界于（细菌）和（立克次氏体）之间的单细胞微生物

3立克次氏体是一类介于（ 细菌）和( 病毒)之间的单细胞原核微生物，以（ 二等分裂）法繁殖。 4细菌的命名采用（双命名）法，第一个词为（属）名，第二个词为（种）名，中文译名则正好相反。 5世界上应用比较广泛的细菌分类系统手册是（《伯吉氏系统细菌学手册》）。

6霉菌的菌丝按结构分为（无隔）菌丝和（有隔）菌丝；按功能分为（营养）菌丝、（气生）菌丝和（繁殖）菌丝。 7霉菌的无性繁殖可产生无性孢子有（芽孢子）、（节孢子）、（厚垣孢子）、（分生孢子）、（孢子囊孢子）。 8青霉的无性孢子为（ 小分生孢子）分生孢子，其典型形状为（扫帚 ）；曲霉的无性孢子为（大分生孢子 ）分生孢子，其典型形状为（ 球）。

9担子菌在发育过程中形成三种性质不同的菌丝体，分别为（单核菌丝 ）、（ 双核菌丝）和（结实性双核菌丝 ）。在此过程中可以产生一种特殊的结构为（ 锁状联合）。 二、选择题

1.选择下列物品的相应灭菌方法 接菌环（ B ）；包装好的平皿（ F ）；外科手术器械（ E ）；糖培养基（ D ）；牛奶（ C ）；普通培养基（ A ）； A 高压蒸汽灭菌法 B 火焰灭菌法 C 巴氏消毒法 D 流通蒸汽灭菌法 E 煮沸法 F 热空气灭菌 G紫外线消毒法 2.青贮饲料中起主导作用的微生物是（ C ）

A.酵母菌 B.肠杆菌 C.乳酸菌 D.丁酸梭菌 3.下列哪种微生物可严重影响青贮饲料的品质（ D ） A.酵母菌 B.肠杆菌 C.乳酸菌 D.丁酸梭菌 4.限制秸秆利用率的主要因素是（ C ） A.纤维素 B.半纤维素 C.木质素 5.正确放置鲜蛋的方法是（ D ）

A.到放 B.斜放 C. 小头向上 D.大头向上 三、概念

1大肠菌群：是指一群在37℃培养24h能分解乳糖产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰阴性无芽孢杆菌，包括大肠杆菌属、枸橼酸菌属肠杆菌属、克雷伯菌属中的一部分和沙门菌属肠道亚种的细菌。 2内毒素是存在于革兰阴性菌细胞壁最外层的结构成分（脂多糖），只有细菌细胞死亡、自溶或被人为地破坏时，才释放出来。

3外毒素是某些病原菌（主要是革兰阳性菌）在生长繁殖过程中产生并分泌到菌体外的有毒性的蛋白质。 4类毒素：外毒素经0.3%~0.5%甲醛溶液处理一段时间后可脱去毒性，，但仍保留良好的抗原性，称为类毒素。

5温和性噬菌体： 有的噬菌体感染菌体后，并不复制，也不使细菌细胞裂解，而是将其核酸整合到细菌细胞染色体中去，

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随着细菌的繁殖，噬菌体的核酸也复制遗传下去，可能到某一世代，才使细菌细胞裂解，这种噬菌体称为温和性噬菌体。 6病毒复制：病毒自身没有完整的生物合成系统，只能依靠宿主生活细胞，在病毒基因组控制下合成病毒核酸和蛋白质，并装配为成熟的子代病毒，释放出细胞，再感染其他易感活细胞，病毒的这种增殖方式称为复制。 四、问答

1为什么厌氧菌在有氧环境下不能生长？

所有微生物在有氧环境中O2可转变极微量的氧的自由基（即超氧阴离子），超氧阴离子有很强的细胞毒作用，能直接破坏菌体的细胞膜。好氧和耐氧微生物中有超氧化物歧化酶和过氧化氢酶，在两种酶的作用下可时毒害性很强的超氧阴离子转变为无害的氧，保护细胞不受氧代谢的毒害作用。而厌氧微生物不具有上述酶类，不能分解超氧阴离子和过氧化氢的毒害作用，因此不能在有O2条件下生长。

2细菌的生长曲线分哪几期？有何意义?各期有何特点？

1.分四期（1）迟缓期：此期内细菌逐渐适应新的环境，合成增加，菌体增大，细菌数量不增加，碱性染色反应较好，对消毒剂和其他有害物有高度敏感性。（2）对数期：此期内的菌体生命力强，繁殖速度最快，细菌数以几何级数增加；菌体形态、大小、染色反应均较一致，对不良理化因素和抗菌药物敏感。该期内的病原菌致病力最强。此期内的细菌最适合留作“种子”。（3）稳定期：这一时期因营养的消耗，代谢产物的积累等，细菌繁殖速度下降，死亡增多，新生菌数约等于死亡菌数，繁殖与死亡近乎平衡，形态及生理形状常有改变，革兰阳性菌可染成阴性，毒素等代谢产物此时期积累多。（4）衰亡期：细菌开始大量死亡，死菌数超过活菌数，细菌如不移植至新的培养基，最后将全部死亡。形态上常出现衰老型、退化型或自溶，染色不一致。2.意义：在不同时期中，细菌的繁殖速度不同，形态和生理特性（包括外形、大小、染色反应、发酵活力、代谢产物、抵抗力等）也有变化。了解这种规律，对培养、观察、利用和控制细菌是有意义的。 3培养基有哪些种类？各有何用途？

（1）培养基是人工配制的基质，含有细菌等生长繁殖所必需的营养物质，常用于分离、培养、鉴定和研究细菌等微生物。（2）培养基的种类：按营养成分分基础培养基及营养培养基前者是由牛肉浸液加适量的蛋白胨、NaCl、磷酸盐，pH调至7.4~7.6而成，用于培养对营养要求不高的细菌，并用于制备营养培养基。在基础培养基中添加葡萄糖、血液或血清等，即为营养培养基用于对营养要求较高的细菌。按形态分为固体培养基、半固体培养基及液体培养基三类。基础培养基和营养培养基若不加凝固剂即为液体培养基，常用于细菌的扩增培养。在液体培养基中加1%~2%的琼脂，煮沸融化，冷却至38~40℃后即凝固成固体培养基，用于细菌的分离、纯化及生物活性检测。正是有了固体培养基，才能进行细菌的纯化及鉴定种类繁多的细菌。若向液体培养基中加0.5%琼脂则为半固体培养基，可做穿刺接种以观察细菌动力等。按照培养基的特殊用途分为鉴别培养基、选择培养基、厌氧培养基。 4细菌是如何分类、命名的？

（1）细菌分类:细菌的传统分类按细菌的表型进行，分类单元为界、门、纲、目、科、属、种，种以下为亚种、变种、型和菌株。世界公认的权威细菌鉴定分类系统是《伯吉氏系统细菌学手册》（2）细菌命名：按国际细菌命名法规定，细菌的学名也采用“双名法”，即由署名加种名，第一个词为属名，用拉丁文或拉丁化的名词，斜体，第一个字母要大写；第二个词为种名，用拉丁文或拉丁化的形容词或名词所有格，斜体，小写；写微生物的学名时，第一个署名只写开头一个或几个字母。细菌学名的中文译名则相反，种名在前，属名在后。

5真核细胞型微生物的细胞构造和原核细胞型微生物相比有何异同？

原核生物的细胞核没有核膜，即没有真正的细胞核；细胞器略有分化，只具有一种成形的细胞器，即核糖体；DNA上不含蛋白质成分；原核细胞都有细胞壁，细胞壁的成分与真核植物的细胞壁成分不同，其细胞壁的主要成分是肽聚糖、磷壁酸、脂多糖、脂蛋白及类脂；原核细胞不能进行有丝分裂。真核生物是一大类细胞核具有核膜，能进行有丝分裂，细胞质中存在线粒体或同时存在叶绿体等多种细胞器的生物。真核细胞与原核细胞相比，其形态更大，结构更为复杂，细胞器的功能更为专一。真核细胞已发展出许多由膜包围着的细胞器，如内质网、高尔基体、溶酶体等，更重要的是，它们已进化出有核膜包裹着的完整细胞核，形成了双链DNA与组蛋白密切结合的染色体。 6酵母菌、霉菌和藻类的繁殖方式有哪些？

（1）酵母菌的繁殖方式：1.芽殖：酵母菌的出芽繁殖，首先是在成熟的细胞（称母细胞）上长出一个称为芽体的突起，随后细胞核分裂成两个核，一个留在母细胞，一个与其他细胞物质一起进入芽体；当芽体逐渐长大，基部收缩，到一定时间自母细胞脱落，以后可继续成长，再行出芽繁殖产生新个体。2.横分裂：繁殖酵母不能出芽繁殖，无性繁殖是以横分裂法进行，方法与细菌分裂相似。3.子囊孢子形成：或经两性细胞的结合行有性结合或有性繁殖或不经两性细胞的结合而行孤雌生殖。（2）霉菌的繁殖方式：1.无性繁殖：是指不经过两性细胞的结合而形成新个体的过程。所产生的孢子叫做无性

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孢子。大多数霉菌是通过无性孢子来进行繁殖的，如芽孢子、节孢子、厚垣孢子、孢子囊孢子、分生孢子，这些孢子萌发后形成新的个体。2.有性繁殖：霉菌的有性繁殖是经过两性细胞结合（质配和核配）后，产生一定形态的孢子来实现的，这种孢子叫有性孢子。包括合子、卵孢子、接合孢子和子囊孢子4种类型。（3）藻类的繁殖方式：单细胞藻类以二分裂法繁殖。多细胞藻类一般以产生游动孢子和配子的方法进行繁殖。 7真菌的生长繁殖条件是什么？

1.真菌生长繁殖的基本营养需要：真菌生长繁殖的基本营养需要和细菌相似，绝大多数为异养菌。对营养要求不严一般只要供给适当的碳水化合物和无机氮或有机氮就可以良好的生长繁殖。2.温度：大多数真菌的最适生长温度范围为20～30℃。但不同类的真菌对温度要求也不同。一般真菌在0℃以下停止生长，但并未死亡。也有一些真菌能在0℃以下生长繁殖，引起冷藏畜禽产品的败坏。而哺乳动物消化道的真菌在37℃时生长的最好。3.氧气：绝大多数真菌具有需氧呼吸的特点，培养它们时需充足的氧气；有些是兼性厌氧菌，少数是严格厌氧菌。4.湿度与渗透压：真菌适宜生长在潮湿的环境里。某些真菌能生长在炼乳、果酱中，它们耐高渗透压，还有一些真菌，可以在稀薄的溶液中生长。5.PH：大多数真菌喜生长在酸性环境中，他们在pH3～6之间生长良好，而在pH1.5～0.0之间也可以生长。 8病毒与其它微生物比较，重要的的特征是什么？ （1）病毒颗粒非常微小，用电子显微镜才能观察到。（2）病毒颗粒主要由核酸和蛋白质组成，每一种病毒只含一种核酸，或RNA或DNA。（3）病毒不是以二分裂方式繁殖，只能在活的宿主细胞内复制新的子代病毒。（4）除利福平可抑制痘病毒复制外，其他抗生素对病毒的作用都不大。（5）干扰素可抑制多数病毒的复制。 9叙述病毒的增殖过程？

（1）病毒增殖：病毒完全不同于其他微生物的繁殖方式，只在活细胞内增殖。病毒自身没有完整的生物合成酶系统，只能依靠宿主活细胞，在病毒基因组控制下合成病毒核酸和蛋白质，并装配为成熟的子代病毒，释放出细胞，再感染其他易感活细胞，病毒的这种增殖方式称为复制。（2）病毒增殖的五个阶段：1.吸附：病毒首先吸附在易感细胞上。这一过程又分两步：先是在有Ca²﹢、Mg²﹢阳离子存在的条件下，病毒粒子与细胞发生随机静电吸附。此阶段吸附是非特异的、可逆的。接着，病毒粒子特异地吸附到宿主细胞表面，这是病毒粒子的表面分子，完成这一步的病毒吸附是牢固的，非可逆的。2.侵入：病毒吸附在宿主细胞膜后，进入细胞内，称为侵入或穿入。不同种类的病毒侵入细胞的方式不同。多种病毒是通过细胞膜吞入，称为病毒胞饮，形成含病毒的内吞小体，无囊膜的病毒粒子从内吞小体中释放进入细胞质；有囊膜的病毒，其囊膜与内吞小体的细胞膜融合，核衣壳释放到细胞质中。有的病毒在吸附后，其病毒囊膜与宿主细胞发生融合，囊膜留在细胞外面，核衣壳进入细胞质内。有些病毒在进入的过程中同时脱壳。3.脱壳：病毒进入细胞后，迅速在蛋白水解酶的作用下，脱掉衣壳，释放出核酸，称为脱壳。在细胞核内增殖的DNA病毒，可在其核衣壳未被完全脱壳的情况下，核酸通过核孔进入核内。不同病毒从吸附至脱壳所需的时间从数分钟至数小时不等。4.生物合成：各类病毒的生物合成基本上均按下列步骤进行：(1)由亲代病毒早期转录mRNA。（2）由早期mRNA翻译“早期蛋白”，这些早期蛋白是病毒复制需要的，此外还有控制宿主蛋白质和核酸合成的调控蛋白等。（3）在“早期蛋白”（酶）等作用下，亲代病毒核酸复制子代病毒核酸。由于各种病毒核酸类型及股数不同，核酸复制过程各有差异。（4）主要由子代核酸晚期转录mRNA，在翻译为“晚期蛋白”。晚期蛋白主要为子代病毒的衣壳蛋白、酶类以及在病毒装备阶段起作用的非结构蛋白等。5.装配和释放：病毒核酸与蛋白质合成完毕后，多数DNA病毒在细胞质内合成的结构蛋白迁移到胞核内，与在胞核内合成的病毒DNA装备成核衣壳，RNA病毒几乎都在细胞内装配形成核衣壳。有囊膜的病毒，形成核衣壳后，通过细胞核膜或细胞膜时获得囊膜，并以“出芽”的方式释放。有些病毒，很少释放出细胞外，它们通过细胞间桥或细胞膜融合，在细胞间传播。大多数无囊膜病毒在宿主细胞内装配成核衣壳后，即为成熟的病毒颗粒，它们通过宿主细胞破裂的方式释放出来。 10人工培养病毒的方法有哪些？各有何特点及用途？

（1）鸡胚培养法：鸡胚培养病毒具有简单、方便、经济的特点。可进行病毒分离、鉴定、也可增殖大量的病毒，制备抗原或疫苗。（2）细胞培养法：比鸡胚法更经济、效果更好、用途更广。可用于多种病毒的分离、增殖、病毒抗原或疫苗制备、中和试验、病毒控斑（数量）测定及克隆纯化等。(3)实验动物培养法：这是一种古老的方法，可用于病毒病原性的测定、疫苗效力试验、疫苗生产、抗血清制备及病毒性传染病的诊断等。实验动物难于管理、成本高、个体差异大，所以许多病毒的培养已由细胞培养法或鸡胚培养法代替。 11什么是病毒的干扰？是怎样产生的？

（1） 病毒干扰现象：一种病毒感染动物机体（或细胞）后，能产生抑制他种病

毒再感染的作用，这种现象称为病毒的干扰现象。干扰现象发生的原因，可能是干扰病毒先占据或损坏了易感细胞上能为被干扰病毒吸附的受体；或者在细胞内复制时，先占用了有关的细胞组成和代谢功能或复制部位，使被干扰病毒不能利用。

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（2）干扰素：几乎所有的细胞受病毒感染后，都可被诱导合成分泌一种小分子的糖蛋白，这种蛋白具有干扰病毒复制的作用，称为干扰素。按产生细胞及性质不同，干扰素基本分3型：α干扰素β干扰素γ干扰素。干扰素产生后可扩散到附近细胞，也可进入血流，带至全身。当干扰素被吸收进入未感染的细胞后，能诱导细胞产生另一种具有抑制病毒复制作用的蛋白质，称为抗病毒蛋白，阻止病毒mRNA的翻译，从而可抑制多种病毒（无论是DNA病毒或RNA病毒）在细胞内的复制。因此，干扰素对病毒的干扰具有广谱作用。 12什么是噬菌体及其分类，有何意义？

（1）噬菌体：感染细菌、支原体和螺旋体的病毒统称为噬菌体。（2）噬菌体的分类：分为温和性噬菌体和烈性噬菌体，增殖后能使细菌细胞裂解的噬菌体称为烈性噬菌体。有的噬菌体感染菌体后，并不复制，也不使细菌细胞裂解，而是将其核酸整合到细菌细胞染色体中去，随着细菌的繁殖，噬菌体的核酸也复制遗传下去，可能到某一世代，才使细菌细胞裂解，这种噬菌体称为温和性噬菌体。（3）意义一种噬菌体只对相应种类的细菌、支原体或真菌发生特异性感染和寄生，故可利用噬菌体鉴定细菌和治疗细菌性疾病，但在抗生素生产和其他发酵工业中，也可因噬菌体感染发酵菌而造成危害。 13什么是亚病毒，包括哪些，各有何特点？

（1）亚病毒概念及种类：亚病毒是个体更微小，结构和化学组成更简单，具有感染性的致病因子，又称为亚病毒因子。包括卫星因子、类病毒和朊病毒。（2）特点：（一）卫星因子：是必须依赖宿主细胞内共同感染的辅助性病毒才能复制的核酸分子，有的卫星因子也有外壳蛋白包裹，这些又称卫星病毒。它是一种单股DNA病毒，在宿主细胞内复制时必须有腺病毒和孢疹病毒的辅助。（二）类病毒：是一类感染植物引起病害的感染因子。它们的结构只有单股环状的RNA分子，没有蛋白质外壳，RNA的基因组很小，不编码任何蛋白质，复制必须完全依赖宿主细胞的酶系统，复制过程只是RNA→RNA的直接转录。因为这类感染因子的结构、性质与常规病毒不同，称为类病毒。（三）朊病毒：是一类人感染人类与哺乳动物、引起亚急性海绵样脑病的感染因子，它们的结构主要是蛋白质，尚未确切证实是否含有核酸，故目前定名为朊病毒，或蛋白侵染因子。朊病毒是细胞正常蛋白变构后形成的具有感染性的蛋白。对各种抗菌药物、消毒药物、不利理化因素都不敏感，无免疫原性，不引起宿主的免疫应答，也不诱导干扰素。

畜牧微生物作业题（三）

一、填空题

1（核酸）和（衣壳）统称为病毒的核衣壳。 2病毒的基本结构包括（核酸）和（衣壳），有的病毒在最外面还包有一层或几层（囊膜）。 3动物病毒中最大的病毒是（痘病毒），最小的病毒是（圆环病毒）。测量病毒大小的计量单位是（纳米（或nm） ）。 4病毒的复制过程包括（吸附 ）、（穿入 ）、（ 脱壳）、（ 生物合成）和（组装和释放 ）五个连续的过程。 5噬菌体根据被其感染的细菌是否可以被裂解可分为（烈性 ）噬菌体和（ 温和性）噬菌体。 6目前亚病毒包括（卫星因子 ）、（类病毒 ）和（朊病毒 ）。 二、概念

1干扰素：几乎所有的细胞受病毒感染后，都可被诱导合成分泌一种小分子的糖蛋白，这种蛋白具有干扰病毒复制的作用，称为干扰素。

2抗原：是指能刺激机体免疫系统中的免疫细胞发生免疫应答，产生免疫产物（效应细胞或抗体），或者能与免疫产物发生特异性反应的物质。

3抗体：机体受到抗原刺激后，由B细胞接受抗原刺激，增殖分化为浆细胞，由浆细胞合成分泌于体液中的免疫球蛋白。 4免疫调理作用：IgG的Fab与细菌或靶细胞（病毒感染细胞、肿瘤细胞）特异结合后，Fc段可与吞噬细胞的Fc受体结合，可加强吞噬细胞对细菌的吞噬和消化。

5ADCC作用：即抗体依赖细胞介导的细胞毒作用，指具有杀伤活性的细胞如NK细胞通过其表面的Fc受体识别结合与靶抗原上的抗体的Fc段，直接杀伤靶抗原。

6人工主动免疫：通过人为的给动物接种疫苗，使动物机体主动产生免疫应答获得免疫力，称为人工主动免疫。

7天然被动免疫 ：给母畜母禽进行人工主动免疫后，幼雏从母畜的初乳（幼禽从卵黄）获得母源抗体而获得免疫力，称为天然被动免疫。 三、问答

1哺乳动物体内正常菌群的意义？

消化道的微生物区系也称为正常菌群。在正常情况下，区系中的各种微生物在种类、数量及栖居部位等方面，在微生物之间以及它们与宿主动物之间，处于一个相互依从、相互制约的理想的动态平衡，这种平衡是宿主动物保持健康和发挥正常

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生产性能的必要条件，具体表现在在营养、免疫和拮抗三个方面。（1）营养：消化道的正常菌群在消化道获取营养的同时，通过对日粮特别是蛋白质、碳水化合物、脂肪等的消化和代谢，合成有利于动物吸收和利用的养分，促进动物生长。另外，消化道中的正常菌群还有助于破坏饲料中某些有害物质并防止其吸收。（2）免疫：正常菌群对其宿主机体免疫器官提高免疫功能方面有重要的作用。（3）拮抗：消化道的正常菌群对非正常菌群的侵袭具有很强的屏障作用和拮抗作用。 2说明瘤胃微生物是如何消化粗纤维的？

粗纤维包括纤维素、半纤维素和木质素，是植物细胞壁的主要成分。在瘤胃中饲料的粗纤维成分，各种纤维素和半纤维素，首先经瘤胃微生物产生的酶降解成各种单糖，然后立即被微生物吸收并进行代谢，最终产生挥发性脂肪酸，被动物利用。出了代谢产生挥发性脂肪酸，瘤胃微生物还利用饲料降解产生的单糖和双糖合成糖原，储存于微生物体内，待其进入小肠被消化后，这种糖原又可被利用作为动物体的葡萄糖来源之一。乳牛吸收入血液的葡萄糖约有60%被利用来合成牛乳。 3瘤胃如何消化蛋白质？

瘤胃微生物能产生多种蛋白酶和肽酶，饲料蛋白质经过这些酶的作用水解成肽和氨基酸其中一些氨基酸又进一步降解为有机酸、氨和二氧化碳另一方面，瘤胃微生物利用水解生成的和饲料来源的氨、一些简单肽类和游离氨基酸，合成微生物蛋白质。当这些微生物转移到皱胃和小肠时，它们的细胞蛋白质被消化、吸收、利用。因为瘤胃微生物既能水解饲料蛋白质合成氨，又能利用氨合成蛋白质，因此对反刍家畜的蛋白质供给具有调节作用。可通过添加尿素或铵盐来提高瘤胃微生物合成蛋白质的能力，通过化学处理使优质饲料蛋白质不易被瘤胃微生物分解从而得到保护，待进入小肠后在被消化吸收，因此可提高饲料蛋白质的利用效率。 4瘤胃微生物的种类及其作用？ （一） 瘤胃微生物的种类：（1）瘤胃细菌：种类很多，一

般按其作用归类。有分解纤维素的、发酵淀粉和糖类的、合成蛋白质的、合成维生素的。（2）瘤胃产甲烷菌：是严格厌氧菌，其细胞壁革兰染色呈阳性或阴性，细胞壁为假胞壁质、异多糖或蛋白质，不含胞壁酸、二氨基庚二酸或磷壁酸，脂肪是甘油醚。（3）瘤胃厌氧真菌：瘤胃中具有大量厌氧真菌菌丝体和游动孢子。瘤胃真菌在瘤胃中经过长期进化一直定居在瘤胃中，是严格厌氧的微生物，没有线粒体，不能通过呼吸产生能量，但能通过供氢体产生能量，同时产生氢气。具有降解纤维和半纤维的能力，有的还具有降解淀粉、蛋白质的能力。（4）瘤胃原虫：瘤胃中存在的原虫虽然在数量上比细菌少得多，但体积大，故其总体积可与细菌相当。（二）瘤胃微生物的作用：（1）粗纤维的消化:粗纤维是反刍家畜粗饲料的主要组成部分，也是决定粗饲料消化率的主要因素，由于反刍家畜自身不分泌能降解粗纤维的酶，因此瘤胃微生物产生的纤维素酶和半纤维素酶对反刍家畜粗饲料的消化非常重要。粗纤维包括纤维素、半纤维素和木质素，是植物细胞壁的主要成分。在瘤胃中饲料的粗纤维成分，各种纤维素和半纤维素，首先经瘤胃微生物产生的酶降解成各种单糖，然后立即被微生物吸收并进行代谢，最终产生挥发性脂肪酸，被动物利用。出了代谢产生挥发性脂肪酸，瘤胃微生物还利用饲料降解产生的单糖和双糖合成糖原，储存于微生物体内，待其进入小肠被消化后，这种糖原又可被利用作为动物体的葡萄糖来源之一。乳牛吸收入血液的葡萄糖约有60%被利用来合成牛乳。（2）蛋白质消化：瘤胃微生物能产生多种蛋白酶和肽酶，饲料蛋白质经过这些酶的作用水解成肽和氨基酸其中一些氨基酸又进一步降解为有机酸、氨和二氧化碳另一方面，瘤胃微生物利用水解生成的和饲料来源的氨、一些简单肽类和游离氨基酸，合成微生物蛋白质。当这些微生物转移到皱胃和小肠时，它们的细胞蛋白质被消化、吸收、利用。因为瘤胃微生物既能水解饲料蛋白质合成氨，又能利用氨合成蛋白质，因此对反刍家畜的蛋白质供给具有调节作用。可通过添加尿素或铵盐来提高瘤胃微生物合成蛋白质的能力，通过化学处理使优质饲料蛋白质不易被瘤胃微生物分解从而得到保护，待进入小肠后在被消化吸收，因此可提高饲料蛋白质的利用效率。（3）脂肪的代谢：日粮中脂肪进入瘤胃后可被微生物脂肪酶水解成游离脂肪酸，其中不饱和游离脂肪酸可被瘤胃微生物进一步氢化，氢化后的终产物为硬脂酸。，有些不饱和游离脂肪酸需经过异构化，产生的共轭物中间产物在被氢化。（4）维生素合成：瘤胃微生物能合成B族维生素和维生素K等，所以成年反刍家畜一般不依赖从饲料中供给这些维生素。一些瘤胃微生物还可产生植酸酶，使植酸磷变为无机磷，有助于动物体对磷的有效利用。某些瘤胃细菌还能产生降解植物有毒物质的酶，使瘤胃起到解毒作用。

5单胃动物盲肠、大肠、结肠微生物的种类及作用？

（1）粗纤维的发酵：单胃草食动物都能消化利用饲料中的部分粗纤维，特别是盲肠是主要的消化部位。有相对发达、庞大的盲肠，其中的微生物除细菌外还有厌氧真菌，大肠中进行的微生物消化与反刍家畜瘤胃内发生的微生物消化相似，产生挥发性脂肪酸并被吸收，也生成甲烷和其他气体。（2）其它有机物的发酵：在小肠内未完全消化吸收的淀粉，进入大肠后可引起剧烈发酵，这类淀粉因此也被认为是抗性淀粉。过度的发酵会降低可消化营养的利用，甚至会引起肠臌气病，对动物有害。（3）大肠内的腐败作用：大肠内存在着多种能分解蛋白质和对氨基酸有脱氨基和脱羧基能力的微生物。当蛋白质和未完全吸收的氨基酸进入大肠后，可引起腐败作用，产生一些有害物质。（4）有机物的合成：大肠微生物的繁殖，可合成大量菌体蛋白，它们不能被消化利用，而是随着粪便排出体外。

6简述土壤、空气和水中的病原微生物对畜牧生产和人类生活有何影响，如何应对？

（1）土壤中：除了固有的微生物种群外，还有一些随着动、植物尸体及人、畜排泄物、分泌物、污水、垃圾等废弃物一

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起进入土壤的微生物。对大多数病原微生物来说，并不是生长繁殖的适宜环境，这是因为土壤缺乏病原微生物需要的特殊营养物质和适宜的理化因素，而且还有土著微生物对病源微生物的拮抗作用等，故大多数病原微生物只能在土壤中生存较短的时间。只有少数抵抗力强的芽孢菌能在土壤中生存数年甚至数十年以上，当其他条件同时具备时，随时都可能使家畜感染相应的传染病，成为土壤感染传染病的来源。为了防止“土壤感染”传染病的发生，应该设法避免病原微生物污染土壤，对患病畜、禽的粪便、垫草应堆积发酵后再施入土壤。怀疑被病原微生物污染的物品，必须进行严格的消毒处理。对于患传染病死亡的畜、禽尸体，能焚烧的必须焚烧，或者深埋地下2m深处作无害处理，以免传播传染病。（2）空气中：一般没有病原微生物存在，只有在病人、病畜、患病植物附近，医院和兽医院周围，当病人、病畜喷嚏、咳嗽时喷出含有病原体的微细泡沫以气溶胶的形式飞散到空气中，或者其带有病原体的分泌物和排泄物干燥后随尘埃进入空气中，则该处空气中暂时带有病原微生物，健康人或动物往往因吸入而感染，分别称为气沫传染和尘埃传染，总称空气传播。进入空气中的病原菌一般很易死亡，只有一些抵抗力较强的病原微生物可以在空气中生存一个时期。带有病原微生物的飞沫和尘埃被易感的人和动物吸入后容易引起呼吸道传染病，有时可使新鲜创面发生化脓性感染。有些病原微生物经空气的传播可引起广大范围的传染病流行，因此，为了减少空气传染，应该注意畜舍的通风、换气、空气消毒及对病畜进行隔离。（3）水中：含有病原微生物的人、畜的排泄物、分泌物、家畜尸体、垃圾和污水直接或间接污染水源，可使水中也含有相应的病原微生物。病源微生物在水中由于营养条件、生长环境以及水的自洁作用等不适宜其生长发育，因而生存时间短。但是，被病原微生物污染的水源能迅速散播和扩大污染面积，许多传染病特别是肠道传染病往往顺着河流迅速蔓延。故水禽传染病的发生，常是急速传播，几乎全群同时发生并迅速传染下游禽群。因此，对动物尸体及排泄物、污水等的处理应特别注意，勿使水源被污染，以免发生传染病的蔓延。

7什么是细菌总数和大肠菌群，测定这些指标有何意义？通常以菌落总数表示细菌总数，即在需氧情况下，37℃培养48h，能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数。因培养条件所限菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。菌落总数能反映被检样品被细菌污染的总体状况。大肠菌群是指一群在37℃培养24h能分解乳糖产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰阴性无芽胞杆菌，包括大肠杆菌数、枸橼酸菌属、肠杆菌属、克雷伯菌属中的一部分和沙门菌属肠道亚种的细菌。意义是由于直接从某些检样中检查病源微生物比较困难，因为病源微生物存活时间短、数量少，不容易直接分离培养，因此检查大肠菌群数间接反映检样被病源微生物污染的程度。 8对生活饮用水的细菌学指标有何规定？

（1）水的微生物学检查是采用间接方法，既检查水中的细菌总数和总大肠菌群数等。（2）具体的卫生标准：细菌总数不得超过100cfu/mL。总大肠菌群（MPN/100mL)应为0。耐热大肠菌群、大肠埃希菌在100mL水样中均不得检出。对于畜禽饮用水，美国国家事务局（1973）建议，家畜饮用水中大肠杆菌数应少于50000个/L。 9什么是发酵作用，有哪些类型？

一、发酵：是微生物对基质（主要是糖类）进行分子内的厌氧呼吸。二、发酵作用：1、酒精发酵：是己糖分解时脱氢生成丙酮酸，丙酮酸经脱羧生成乙醛。乙醛是最终受氢体，它接受氢产生乙醇。能引起酒精发酵的微生物，包括酵母菌、霉菌和少数细菌，以酵母菌为主。酒精发酵与畜产品加工关系密切。2、乳酸发酵：细菌利用单糖或多糖进行厌氧性发酵产生乳酸，分为两种类型：正型乳酸发酵和异型乳酸发酵。引起乳酸发酵的微生物，包括多种细菌和霉菌，以细菌为主。酸乳制品及青贮饲料都要求正型乳酸发酵，才能得到良好的质量。3、丙酸发酵：糖或乳酸被微生物发酵形成丙酸、乙酸、二氧化碳和水的过程，引起丙酸发酵的微生物主要为丙酸细菌，在牛乳和乳制品中常见。4、丁酸发酵：糖及其他有机化合物经细菌在严格厌氧条件下发酵分解形成丁酸及其他一些副产物的过程，引起丁酸发酵的微生物主要是丁酸梭菌，广泛分布在自然界中，能引起畜禽产品或饲料的败坏，所产丁酸的恶臭气味，使产品质量降低，甚至不能利用，故在青贮饲料加工、乳品加工和畜产品加工生产中，均设法抑制丁酸菌的发酵作用。5、纤维素的丁酸发酵：纤维素在厌氧情况下被厌氧性纤维分解菌所分解也产生丁酸发酵。在细菌的纤维素酶和纤维素糖酶作用下，先分解为葡萄糖，然后进行丁酸发酵。纤维素是植物细胞壁的主要成分，植物的残体、枯叶、朽木等均需纤维素分解菌的转化。多种厌氧性细菌能够分解纤维素。在草食兽的胃肠里，也存在着大量的厌氧性纤维分解细菌，它们在动物的营养代谢过程中起着非常重要。 10什么是氧化作用，糖是如何氧化的，有何意义？

（1）氧化作用：微生物在代谢中以游离氧作为最终电子受体，这个过程称为有氧呼吸，也称为氧化作用。氧化作用常常依据被作用的基质而命名。（2）糖的氧化：多数微生物能把碳水化合物彻底氧化为二氧化碳和水。其过程大致上都是先分解为单糖，然后再彻底分解。但也有少数真菌，分解并不彻底，停留在一定的阶段，积累某种有机酸。好几种霉菌都能形成柠檬酸，以黑曲霉产酸能力最强。柠檬酸是形成乳脂中芳香物质的重要基质，在乳品加工中有一定的作用。 11什么是固氮作用及其类型和意义？

一、固氮作用：自然界有部分细菌具有直接利用氮气同化为养料的能力，它们可以将分子态氮还原为氨，这个过程称为固氮作用。二、固氮作用的类型：1、自生：某些微生物在土壤或培养基中独立生活时，能固定空气中的分子态氮，转化为氨并同化为自身的氨基酸和蛋白质，这样的固氮作用称为自生固氮作用。包括固氮菌属、固氮梭菌属和固氮蓝细菌。2、共生：某些微生物与某些高等植物共生时，能固定空气中的分子态氮，称为共生固氮微生物。属于共生固氮微生物的体系

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有：根瘤细菌、弗兰克菌、蓝细菌。其中以根瘤菌为主，它们能侵入植物的根毛，刺激植物形成根瘤，并在其内利用植物的碳素和矿物质营养，进行固氮作用，植物也从其中获得氮素营养，彼此过着共生生活。豆科植物，一般都有根瘤菌与其形成根瘤。除了能与豆科植物共生的根瘤菌外。还有一些细菌、真菌、放线菌和藻类，也能与一些非豆科高等植物或低等植物共生，形成根瘤、叶瘤或菌根等构造，进行共生固氮。3、联合固氮：某些微生物生活在植物根际、根表或根的表皮细胞中，获取营养并固氮，固氮产物供给植物利用。这种固氮体系称为联合固氮或共栖固氮，是自生固氮和共生固氮体系间的过渡类型。联合固氮微生物有生脂固氮螺菌、产碱菌、巴西固氮螺菌和氮单胞菌等。土壤中固氮微生物的作用对豆科牧草的栽培非常重要。在农牧业生产上常将这些固氮菌制成各种细菌肥料，施于相应的作物和牧草。

畜牧微生物作业题（四）

一、填空题

1我国饮用水的卫生标准是每毫升中细菌总数不超过（ 100）个，每升中大肠菌群数不超过（ 3）个。 2紫外线中以（ 265 ～ 266 ）段的杀菌力最强。 3影响微生物的生物因素包括（共生 ）、（颉颃 ）、（ 寄生）、（协同 ）。 4蛋白质的氨化作用在有氧条件下，称为（腐化）；在无氧条件下称为（腐败）。 5微生物的固氮作用可分为（自生固氮）、（共生固氮）和（联合固氮）。 6可用于生产单细胞蛋白质饲料的微生物主要有（酵母）、（真菌）和（藻类） 7单细胞蛋白饲料分为（酵母菌）、（细菌）、（霉菌）、（藻类细胞生物体）。 8瘤胃中的微生物主要包括（细菌 ）、（厌氧真菌 ）和（ 原虫）。 9鲜乳的微生物学检验包括（细菌总数）、（大肠菌群）、（病源微生物）。 10鲜蛋的贮存方法有（ 冷藏法）、（石灰水法 ）、（水玻璃法 ）、（奈酚盐法 ）、（涂布法 ）、（巴氏消毒法 ）、（ CO2法）、（ 充氮法）、（射线辐射法 ）。 二、概念

1防腐：阻止或抑制微生物的生长繁殖称为防腐。 2消毒：杀死物体中的病原微生物，称为消毒。

3拮抗：一种生物在生长发育过程中，能产生某些对他种微生物呈现毒害作用的物质，抑制或杀死他种微生物的现象称为拮抗。

4灭菌 ：杀死物体中所有微生物，称为灭菌。 三、问答

1区别消毒、灭菌、无菌和防腐？

消毒：杀死物体中的病原微生物。灭菌 ：杀死物体中所有微生物。无菌：是指一定的空间范围内没有活的微生物。防腐：阻止或抑制微生物的生长繁殖

2如何利用高温进行灭菌，为什么湿热灭菌效果好于干热灭菌效果？

一、干热灭菌：1、火焰灭菌法：直接以火焰烧灼，立即杀死全部微生物。但此法使用对象有限，常用于耐烧物品或用于可烧毁的物品灭菌。2、热空气灭菌法：在干燥情况下，利用热空气灭菌。灭菌时需用干热灭菌器。此法适用于包装好的玻璃器皿、注射器、针头、滑石粉、凡士林及液体石蜡等的灭菌。在干热的情况下，一般细菌的繁殖体在100℃经1.5h才能被杀死，芽孢则需140℃经3h才能被杀死。当温度达到160℃维持2～3h，可达到灭菌的目的。二、湿热灭菌：1、煮沸消毒法：煮沸温度一般为100℃或接近100℃。外科手术器械、注射器、针头等，经煮沸15～20min可杀死细菌的繁殖体；水中加入2%～5%石炭酸，能增强杀菌力，经15min的煮沸可杀死炭疽杆菌的芽孢；若水中加入1%碳酸钠，可使溶液pH偏碱性，也增强杀菌力，同时还具有减缓金属氧化的防锈作用。2、流通蒸汽灭菌法：用蒸笼或流通蒸汽灭菌器进行灭菌。一般100℃加热30min，可杀死细菌的繁殖体，但不能杀死芽孢和霉菌孢子。3、巴氏消毒法：用于葡萄酒、啤酒及鲜乳的消毒方法。目的是最大限度的消灭病原微生物和其他微生物。4、加压蒸汽灭菌法：应用高压蒸汽灭菌器进行灭菌的方法，是实验室和生物制品生产中最普遍采用的方法。各种培养基、溶液、玻璃器皿、金属器械、工作服等，可用高压蒸汽灭菌器灭菌。通常用121℃的压力、121.3℃15～20min，既可杀死所有微生物及其芽孢，达到灭菌的目的。三、湿热灭菌好于干热灭菌的原因：湿热的穿透力比干热强，且湿热灭菌时蒸汽与物体接触，凝结成水，放出潜热，能提高物体湿度。所以湿热灭菌比干热灭菌的温度较低，时间较短。

3常用防腐剂、消毒剂的种类及其作用原理？

（1）酸与碱：以氢离子、氢氧离子的解离作用妨碍菌体代谢，杀菌力与浓度成正比。（2）卤族元素：以氯化作用、氧化作用破坏—SH，使酶活性受到抑制而产生杀菌效果。（3）醇类：使菌体蛋白变性沉淀。（4）醛类：能与菌体蛋白的氨基酸结合，起到还原作用。（5）重金属盐类：能与菌体蛋白质（酶）的—SH结合，使其失去活性；重金属离子易使菌体蛋白变性。（6）氧化剂：使菌体酶类发生氧化而失去活性。（7）烷化剂：能与菌体蛋白发生烷化。（8）表面活性剂：阳离子表面活性剂能改变细菌细胞膜的通透性，甚至使其崩解，使菌体内物质外渗而产生杀菌作用；或以薄层包围细胞膜，干扰其吸

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收作用。

4简要说明影响化学消毒剂效果的因素？

（1）性质：化学消毒剂对于微生物和动物机体细胞都有毒性，故只能用于局部消毒。各种化学消毒剂对微生物的作用方式各不相同，这与其性质和化学结构有密切关系。（2）浓度：一般来说化学消毒剂的浓度愈大，其对微生物的作用愈强。但消毒剂浓度的增加是有限度的，超越此限度，并不一定能再提高消毒效力，有的消毒剂可能杀菌效力反而下降。（3）作用时间与其他环境条件：化学消毒剂杀死微生物所需时间的长短，与其本身的性质、浓度、温度、作用时微生物所处的环境及微生物的种类等有密切关系。一般化学消毒剂的浓度越大，温度越高，杀菌所需的时间越短。重金属盐类的杀菌效力随温度每增高10℃而增加2～5倍，石炭酸则增加2～8倍。由于温度升高，化学消毒剂的分子运动增加，杀菌时间随之缩短。（4）微生物的种类：微生物由于形态结构和代谢方式等生物学特性的不同，对化学物质所呈现的反应亦有差异。细菌的芽胞因有较厚的芽孢壁和多层芽胞膜，结构坚实，消毒剂不易渗透进去，所以对消毒剂的抵抗力比繁殖体强得多。 5区别共生、拮抗、寄生和协同？

（1）共生：微生物之间、微生物与其他生物之间共同生活在一起，互相依赖，互相得利。（2）拮抗：一种生物在生长发育过程中，能产生某些对他种微生物呈现毒害作用的物质，抑制或杀死他种微生物的现象。（3）寄生：一种生物从另一种生物获取所需的营养，赖以为生，并对后者具有损害作用的现象。（4）协同：两种或多种生物在同一生活环境中，互相协助，共同完成或加强某种作用。 6什么是微生物遗传、变异？

遗传是指亲代与子代的相似性，它使微生物的性状保持相对稳定，是微生物存在的根据。变异是指亲代与子代以及子代之间的不相似性，它使微生物更能适应外界的变化，从而促使其在物种上发生进化。 7人工获得微生物变异株的方法有哪几种？

（1）自然界筛选：微生物在自然环境中不断地发生变异，如细菌的自然突变率为1/104～1/109，可从有关的微生物群体中测定其相关的性状，筛选出所需要的优良菌株。（2）传统人工诱变利用物理学方法（紫外光、同位素、高温或低温等）、化学方法（各种化学诱变剂）、生物学方法（通过异种动物、细胞培养、禽胚培养等长期人工传代培养），增加微生物突变的机会，或者淘汰不适应株，使潜在的适应株增殖出来，经过筛选获得所需要的菌株或毒株。（3）原生质体融合：能进行原生质体融合的微生物细胞较多，不仅包括原核生物中的细菌和放线菌，而且还包括真核生物的细胞。已被广泛应用于细菌、放线菌、真菌等微生物的遗传育种研究。（4）基因工程：应用基因工程技术，如DNA酶切、连接或基因插入等方法，使微生物基因组DNA/RNA中控制某种性状的基因发生缺失，从而丧失其表达相应性状的功能。 8菌种保藏的方法、恢复病原微生物毒力的常用方法各是什么？

（1）为了保存微生物的遗传性状，最好的方法是将菌（毒）种培养繁殖之后，在低温下迅速真空干燥，使微生物处于休眠状态，这样可以长期保存其原有性状（室温下数年，低温下10～20年以上）。如无真空冻干设备，用一般抽气机将菌种置于干燥器内真空干燥，也可保存较长时间。将含15%甘油的菌种悬浮液在-50～-95℃下速冻，亦可保存数年。（2）当发现保存的微生物种子开始发生退化时，可将其移到适宜的环境中生长繁殖，以恢复其性状。如当病原微生物毒力减弱后，为了恢复其毒力，可连续通过易感动物。 9什么是传染发生的条件及其综合防制措施？

一、传染发生的条件：1、病原微生物：具有足够毒力和数量的病原微生物，并通过适当的侵入门户（既感染途径）进入动物机体。病原微生物是感染发生的首要因素。2、易感动物机体：动物种类不同，对各种病原微生物有不同的易感性。动物对病原微生物的易感性，是属于动物的种属特异性，是动物长期进化的结果。动物机体由于年龄、性别、营养状况、生理机能及免疫状况等不同，易感性也有差异。3、外界环境条件：外界环境条件对易感动物和病源微生物两个方面都有直接或间接影响。不良的外界条件，可降低机体防御机能，有利于病源微生物的生存繁殖，促进易感动物与病源微生物的接触，助长传染的发生和发展。二、防制传染的综合措施：1、严格执行兽医防疫法规：严格执行《中华人民共和国动物防疫法》，做好生产畜禽定期检疫、交通检疫、屠宰检疫、边境检疫，及早发现和消灭传染源，防止外来传染病的侵入。2、科学饲养管理及免疫：搞好科学饲养管理，给各种畜禽制定科学的免疫程序，选用血清型等合适的疫苗进行免疫预防接种，提高畜禽的抗感染力。3、搞好环境卫生：执行严格的卫生消毒制度，做好杀虫、灭鼠，以及粪便无害处理，杀灭可能存在的病原微生物，消除和减少病原微生物的传播。4、发生传染病后采取正确措施：应及时隔离病畜，必要时采取封锁措施及紧急接种，防止传染病的蔓延和扩散。对患传染的病畜禽要尽快进行诊断，采取治疗或紧急扑杀措施。一方面是挽救病畜，减少损失，另一方面也是消灭传染来源。对病死畜禽和拟淘汰的病畜禽进行严格处理，对污染的环境进行彻底消毒。 10种蛋保存原则及消毒的方法？

一、种蛋保存原则：种禽产蛋的地方及种蛋接触的用具应注意清洁和干燥，以减少微生物的污染。应及时收集种蛋，每天最少应收集4次。种蛋存放室要求卫生清洁，隔热良好，空气流通，具有防日光直射、防尘、防鼠、防蝇等条件。种蛋贮存的适宜温度为12～16℃，相对湿度为70%～80%。种蛋越新鲜越好，入孵前种蛋的存放时间不得超过7d。二、种蛋消毒方法：甲醛乙酸熏蒸法、过氧乙酸熏蒸法、药液消毒法、加温处理法、变温药液浸蛋法、真空药液浸蛋法

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11病原微生物的微生物学诊断的程序？

在进行微生物学诊断时，必须结合传染病的流行病学、临床症状、病理变化等进行全面的分析判定，并尽可能采取简便、快速的诊断方法。程序：1、检验材料的采取2、涂片、染色镜检3、分离培养4、培养特性、生化特性试验5、动物试验6、免疫学实验

12鲜乳贮藏过程中的微生物学变化？

1、细菌减数阶段：刚挤出来的乳汁在一定时间内具有杀菌和抑菌作用，乳中微生物的总数不但不增多，反而相应的减少。为了抑制微生物的生长繁殖，延长鲜乳的杀菌期，鲜乳挤出后应该尽可能迅速地使其冷却到10℃以下。2、发酵产酸阶段：在杀菌作用减退的同时，存在于乳中的各种微生物开始生长繁殖。3、中和阶段：由于大量乳酸的存在，使多数微生物的活动受到抑制，但霉菌和酵母菌却适合在酸性环境中生长繁殖，它们不仅能分解利用乳酸和其他有机酸，还能分解蛋白质，生成碱性副产品，以中和乳中的酸。4、腐败分解阶段：当乳酸和其他有机酸，因酵母菌及霉菌的活动而消失，乳汁的pH由酸性变为中性或微碱性时，以前被抑制不活动的细菌，又重新开始活动，它们大部分为腐败菌。当营养分解完毕，或有害物质积累到一定程度时，微生物的作用也就完全停止。此时的鲜乳已失去原来的特性，不仅营养几乎完全丧失，而且会有毒性，不可供使用。

13如何对鲜肉进行细菌镜检？

进行显微镜检查可由肉样的表层和深层分别制成触片，观察判断考虑三个指标：肉触片着色程度、细菌的数目和种类、肉组织的分解情况。判定标准：新鲜肉，触片印迹着色不良，在每个视野中，表层见到少数的球菌和杆菌，深层仅发现个别的细菌或者见不到细菌，同时触片上完全看不到分解的肉组织。可疑新鲜肉，触片印迹着色较好，在每个视野中，表层见到20～30个球菌，深层可发现20个左右的细菌，触片上可明显的看出分解的肉组织。非新鲜肉，触片印迹着色很浓，在每个视野中，不论表层和深层均可见到30个以上的细菌，且多为杆菌，有时几乎见不到球菌，触片山黏附大量分解的肉组织。 14干草的种类及制备原理？

干草由天然草地青草和人工栽培的青饲料在结实前适时收割干制而成。水分含量在17%以下，而且主要为结合水，不易被微生物利用，可长期贮存。在我国普遍采用自然干燥法调制干草，也即田间自然晒制法。由于自然干燥法调制干草受天气影响大，难以控制营养物质的损失，因此有条件的地区使用机械强力通风的人工干燥法干制。 15青贮的概念、青贮制备的原理、制备过程、注意事项？

（1）青贮：是指青玉米秆、牧草等青绿饲料经切碎、填入、压实在青贮塔或窖中，密封，在密封条件下，经过微生物发酵作用而调制成的一种多汁、耐贮存、质量基本不变的饲料。（2）原理：是在密封条件下，青料中的碳水化合物(主要是糖类）通过微生物（主要是乳酸菌）厌氧发酵，产生有机酸（主要是乳酸），使青料的pH降到足以抑制腐败菌、霉菌等所有微生物活动的水平，从而达到能长期完好地保存青贮饲料的目的。（3）过程：1、耗氧期：也称发酵预备期，指饲料青贮的环境从有氧变为厌氧的过程。青贮原料装窖压紧后虽然密封，但仍有空气。耗尽空气中氧气是保证青贮得以进行的前提。2、微生物发酵竞争期：在制作青贮料时必须尽快创造乳酸发酵所需的厌氧、低pH的环境，抑制有害微生物的生长繁殖，这是青贮成败的关键。3、稳定期：当乳酸积累到含量1.5%～2%，pH为4.0%～4.2%时，青贮饲料在厌氧和酸性的环境中成熟，进入稳定期。4、青贮开窖期：开窖后的青贮料应尽快用完，每次取用青贮料后用薄膜盖紧，尽量减少与空气的接触。（4）注意事项：1、选择糖分和水分含量适量的饲料2、创造厌氧条件3、减少原料杂菌污染 16影响青贮饲料的质量的微生物有哪些？

1、乳酸菌：会利用青贮饲料中的多种氨基酸作为其生长和繁殖的氮源，其菌体蛋白又可为家畜提供氮源。2、肠杆菌：破坏青贮饲料的营养成分，从而降低饲料的适口性和营养价值。3、丁酸菌：广泛分布在土壤中，所以在青贮过程中应减少土壤污染，以控制丁酸菌在青贮原料中的数量。4、腐生菌：在青贮原料中腐生菌数量最大，但它们不耐酸，因此在pH迅速下降的足够酸化的青贮饲料中不会产生腐败作用。5、酵母菌：只能在青贮过程的最初几天内繁殖，随着氧气的耗尽和乳酸的积累等而很快停止活动。6、霉菌：当青贮装填不紧或密封不严而有较多空气时，青贮原料中的霉菌为需氧喜酸性环境的微生物，多来自饲料原料，在青贮窖内严格的厌氧环境下不易生长繁殖。7、其他微生物：在青贮原料中还可存在放线菌、担子菌等，但受厌氧和酸性环境的限制，通常不能增殖。 17什么是单细胞蛋白？饲料酵母？为何饲料酵母具有开发前景？

1、单细胞蛋白质是指单细胞或具有简单构造的多细胞生物的菌体蛋白的统称。饲料酵母将酵母菌培养在适当的工农业副产品上而制成的一种饲料，称为酵母饲料。2、饲料酵母的开发前景主要有营养价值高、培养成本低、污染小、周期短。 18鲜乳中微生物的来源及种类？ 一、鲜乳中微生物的来源：（一）来自乳房的内部：从健康母畜乳腺分泌出来的乳汁，本来是无菌的，但常因微生物污染乳头并向上蔓延入乳管和乳池内，挤乳时，便把微生物冲出，带入鲜乳中，挤出的鲜乳便不可能是无菌的。（二）来自外界环境：1、来自乳畜的体表2、来自用具3、来自工作人员4、来自空气5、来自其他方面二、鲜乳中微生物的种类：1、乳酸菌：乳杆菌属、双歧杆菌属、链球菌属、乳球菌属、肠球菌属、明串珠菌属2、能使鲜乳发酵产酸产气的细菌3、分解鲜乳中蛋白质的细菌4、嗜热性与耐热性细菌5、嗜冷菌6、酵母菌和霉菌7、使鲜乳变色的细菌

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19保证鲜乳安全提高鲜乳品质的微生物学措施有哪些？

1、微生物学措施：主要是对微生物污染的预防和处理。2、原则：要注意各方面的清洁卫生，防病、防尘、防蝇、防止外物落入乳汁中；保持畜体与环境的清洁卫生；鲜乳挤出后，应立即过滤与冷却（10℃以下），密闭贮藏于冷藏罐内；采用机械化、管道化、自动化生产，使挤乳、冷却、预热、消毒、冷却与装瓶等工序连续在密闭情况下进行，不与空气及外界接触，这样可大大减少外界微生物进入乳汁中的机会；已装瓶的鲜乳，要快速送给消费者或立即冷藏。3、具体措施：（一）乳畜的保健工作和卫生检查（二）工作人员的保健工作和卫生检查（三）生产管理制度和生产技术操作规程（四）鲜乳的消毒灭菌

20鲜乳微生物学检验的内容是什么？有何意义？ （1）微生物学检验内容：（一）含菌数检验(二）大肠菌群最可能数（MPN）测定（三）鲜乳中病原微生物的检验（2）意义：含菌数反映乳品受微生物污染的程度；大肠菌群含量反映乳品被肠道致病菌污染的可能性；当认为有某种病原菌污染的可能时，也做该种病原菌的直接检验。 21微生物污染鲜蛋的途径有哪些？

（一）卵巢与输卵管内污染：当母禽感染了病原微生物，并通过血液循环侵入卵巢和输卵管，在蛋的形成过程中进入蛋黄或蛋白。（二）产蛋时污染：母禽泄殖腔的细胞可黏附在蛋壳上。当蛋从泄殖腔排出体外时，由于外界空气的冷却作用，引起蛋内收缩，使附在蛋壳上或空气中的微生物，随着空气穿过蛋壳进入蛋内。（三）蛋产出后的污染：健康母禽产下的蛋与外界环境接触，蛋壳表面可污染大量的微生物。在高温、潮湿的条件下，环境中的微生物更容易借水的渗透作用侵入蛋内。温度低、湿度高时，污染到蛋壳上的霉菌很快生长，菌丝可穿过蛋壳而长入蛋内。 22鲜蛋本身有哪些天然的因素能够抵抗微生物的侵入和污染？

1、溶酶菌：溶解革兰阳性菌的细胞壁，凝集细菌，水解β—1,4糖苷键；2、伴清蛋白：整合铁、铜、锌离子，在高pH时螯合作用增强；pH9.1～9.6：增强伴清蛋白的螯合力；3、核黄素：螯合阳离子；4、亲和素：结合生物素，使需要生物素的细菌不能生长；5、卵黏蛋白：抑制胰蛋白酶，但不影响格兰阴性菌的生长；6、卵抑制物：抑制霉菌蛋白酶；7、脱辅基蛋白：与核黄素结合；8、低非蛋白氮：使需要复杂营养的微生物不能生长；9、葡萄糖：抑制兼性厌氧微生物的呼吸；10、其他未明了的蛋白质：抑制胰蛋白酶与维生素B6结合，螯合钙离子抑制无花果蛋白酶和木瓜蛋白酶。 23如何控制微生物对鲜蛋的污染？

1、为防止母禽内源性感染病经蛋传播病原微生物，必须搞好饲养管理、环境卫生、免疫接种、定期检疫和疾病的及时诊断治疗，以保证母禽的健康。2、为了减少鲜蛋的外来微生物的污染，母禽产蛋地方应清洁和干燥。一切与鲜蛋接触的用具均应清洁干燥。运输过程中避免蛋壳破损。3、蛋壳表面污染粪便的鲜蛋在冷藏前要清洁，可用硬刷、砂纸或钢丝绒干擦，或者水洗。洗好的鲜蛋可配以新鲜配制的（100～200）×10-6有效氯、季铵盐或氯-溴化合物等消毒剂，杀灭蛋壳上残余的细菌。

24试述鲜蛋贮存的各种方法及原理？

一、鲜蛋的贮存原则：防止微生物侵入蛋内，抑制蛋内已有微生物的繁殖，避免蛋的变质，保持蛋的新鲜。二、贮存方法：1、冷藏法：此法是以低温抑制蛋壳上或蛋内微生物的生长繁殖，延长蛋内抗菌因素的活性、抑制蛋内自身酶的活性，已达到长期保持鲜蛋品质的目的。2、石灰水贮存法：生石灰与水生成氢氧化钙，其澄清液呈碱性，对鲜蛋表面具有杀菌和防腐作用。3、水玻璃贮存法：此法主要利用硅酸钠胶体液在蛋壳表面干涸成一层薄膜，闭塞气孔，阻止微生物侵入及蛋内水分蒸发，保持蛋的新鲜。4、萘酚盐贮存法：此混合剂是一种防腐性很强的萘酚钠钙盐，对人体无害，经本法贮存的鲜蛋可保存10个月之久。5、涂布法：是采用各种被覆剂涂布在蛋壳表面上，闭塞住蛋壳表面上的气孔，防止外界微生物由气孔侵入和防止水分蒸发。6、巴氏消毒贮存法：此法是利用热力杀死蛋壳表面及进入壳膜的细菌，同时在壳膜下形成一层凝固的蛋白层，阻挡外界微生物的进入，减少蛋内水分的蒸发。7、二氧化碳贮存法：将鲜蛋存放在含有一定浓度的二氧化碳的空气中，便可减缓鲜蛋内二氧化碳的渗出，使其pH不改变，同时也可延缓微生物的生长而保持蛋的新鲜度。8、充氮贮蛋法：将鲜蛋密闭在充满氮气的聚乙烯薄膜袋内，会造成大量好气性微生物因得不到氧气供给而停止发育繁殖或死亡，因而可延长鲜蛋的保存期。9、射线辐射贮蛋法：60Co（钴-60）是一种“放射能化”的射线，有较大的穿透性，对生物杀灭能力较强。

25试述种蛋消毒的各种方法？

1、甲醛气体熏蒸法2、过氧乙酸熏蒸法3、药液消毒法4、加温处理法5、变温药液浸蛋法6、真空药液浸蛋法 26污染有致病菌的肉类对人类的健康有哪些危害？

因肉品中含有病原菌或其毒素而引起人体中毒现象，称为细菌性食物中毒。1、沙门菌：由活菌和内毒素的协同作用引起的食物中毒又称为“传染性食物中毒”。2、病原性大肠杆菌O157：H7：曾多次污染汉堡包的牛肉馅，导致食物中毒。3、肉毒梭菌：引起以神经麻痹为主要病状且病死率很高的食物中毒。4、产气荚膜梭菌、蜡样芽胞杆菌、变形杆菌等：是一些条件性病原菌，只有当大量活菌污染肉品被人吃后，才能引起食物中毒。5、副溶血弧菌：广泛分布于海水中，对人有致病性，也是引起食物中毒的病原菌。6、葡萄球菌肠毒素中毒：金黄色葡萄球菌和白葡萄球菌的一些菌株污染肉品后，

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在其繁殖过程中能产生肠毒素，肠毒素耐热性很强，人吃后可引起中毒，发生急性肠炎症状。 27通过细菌的触片镜检，判定鲜肉的卫生质量，有哪些指标？如何判定？

进行显微镜检查可由肉样的表层和深层分别制成触片，观察判断考虑三个指标：肉触片着色程度、细菌的数目和种类、肉组织的分解情况。判定标准：新鲜肉，触片印迹着色不良，在每个视野中，表层见到少数的球菌和杆菌，深层仅发现个别的细菌或者见不到细菌，同时触片上完全看不到分解的肉组织。可疑新鲜肉，触片印迹着色较好，在每个视野中，表层见到20～30个球菌，深层可发现20个左右的细菌，触片上可明显的看出分解的肉组织。非新鲜肉，触片印迹着色很浓，在每个视野中，不论表层和深层均可见到30个以上的细菌，且多为杆菌，有时几乎见不到球菌，触片山黏附大量分解的肉组织。 28皮毛的消毒方法有哪些？如何进行？

1、盐酸食盐溶液消毒法：本法用于肉联厂和皮毛厂剔出的患病动物的湿皮消毒。该消毒液能渗入生皮组织，可杀死炭疽芽孢。此法操作简单，费用低廉，效果良好。但配药时要掌握好盐酸和碱液的浓度，并注意混匀，否则可损坏皮张。2、福尔马林熏蒸法：福尔马林用量为每立方米空间25～50ml，消毒时将原料放入密闭的房间内，计算好用量，开始熏蒸。本法对皮毛原料的消毒效果好。缺点是用药量大，需时长，在一定程度上对生皮有损坏作用。3、环氧乙烷气体熏蒸法：环氧乙烷能杀灭多种微生物，具有很强的穿透力。消毒时，必须在密闭良好、无火源的条件下进行。消毒效果与用药量、湿度、温度、时间等均有密切关系。 29皮毛的炭疽检疫如何进行？

皮毛的炭疽检验有分离培养、动物接种和血清学试验等多种方法。但在生产实践中，由于检验往往是大批量的，故多采用简便易行的炭疽环状沉淀试验。待检沉淀原的制备方法是：将被检皮张每百张编成一捆，每10捆编成一批，逐张编号、打印，从四肢部位剪取2cm×2～3cm的样皮(约为2g），按顺序装入编号的袋内，121℃高压蒸汽灭菌30min。之后剪碎加入5～10ml0.5%的石炭酸生理盐水，室温浸泡18～24h或37℃浸泡3h，用滤纸过滤，完全透明的滤液即为待检沉淀原，再按炭疽环状沉淀反应操作规程进行检验。

30何谓病原微生物及病原微生物的致病性？

微生物中对人和动、植物机体具有感染、致病作用、可引起传染病的各类微生物，统称病原微生物。致病性又称病原性，是指一定种类的病原微生物，在一定条件下，能在特定寄主体内引起感染过程的性能。各种病原微生物，各具有独特的病原性，通常只能引起一定感染过程，如多杀性巴氏杆菌致畜禽出血性败血症，猪瘟病毒致猪瘟。因此，病原性是病原微生物“种”的特性。

31构成病原微生物的毒力因素有哪些？

构成病原微生物毒力的物质称为毒力因子，包括侵袭力和毒素两方面：1、侵袭力：病原微生物在机体内定殖，突破机体的防御屏障，侵入组织或细胞，在其中生长繁殖，并能深入扩散的能力，称为侵袭力。有包括黏附素、抗宿主防御机制的各种因子、有利于病原菌在机体内扩散的酶类2、毒素：某些细菌产生的一类对机体有毒性的物质称为毒素。可分为外毒素和内毒素两种。

32内毒素和外毒素的区别？ 区别要点 外毒素 内毒素 是革兰阴性菌细胞壁表面的结构成 由革兰阳性菌在繁殖过程中 来源 分，只有菌体死亡、溶解或崩解时才能被产生并分泌到菌体外 释放 毒性弱，毒性作用无特异性和选择 毒性强，对组织细胞有特异性，能引起发热、血管舒缩机能紊乱、颗 毒性 的选择性，能引起特异的综合症粒性白细胞增多，严重时导致内毒素性休状 克 化学成分 蛋白质 脂多糖 不耐热，不稳定，紫外线、氧 耐热、稳定，用紫外线、氧化剂、重 理化性质 化剂能使之破坏，重金属盐类、金属盐处理后毒性不变，能被酸水解，使酸等能使其沉淀 其失去毒性 抗原性强，能制备类毒素， 抗原性弱，不能制备类毒素，不能刺 抗原性 能刺激机体产生抗毒素 激机体产生抗毒素

畜牧微生物作业题（五）

一、填空题

1动物机体的中枢免疫器官包括（胸腺 ）、（骨髓 ）和（ 禽类特有的法氏囊）。 2TCR与CD3形成复合物，TCR负责（识别抗原 ），CD3 负责（ 传递信号）。

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3可以存在于Ｂ细胞表面的SmIg有（ IgM）和（ IgD）。 4免疫球蛋白的重链包括（ α）、（γ ）、（ μ）、（ ε）和（ δ）链，轻链包括（ κ）和（ λ）链。

5.IFN是（干扰素 ）的简称，CSF是（ 集落刺激因子）的简称，IL是（白细胞介素 ）的简称，TNF是（ 肿瘤坏死因子）的简称。

6免疫系统的主要执行（ 免疫防御）、（免疫自稳 ）、（ 免疫监督）功能。

7IgG是机体对同种抗原（再次）应答产生的主要抗体，可通过哺乳动物的（胎盘）和（初乳）传递到胎儿和幼儿体内。 8一般哺乳动物的免疫球蛋白分为（IgG）、（IgA）、（IgM）、（IgD）、（IgE）。 9补体的激活途径主要包括（经典途径）、（旁路途径）和（MBL途径）。 10兽医生物制品是利用微生物或其代谢产物研制和生产的用于（预防）、（诊断）、（治疗）传染病的生物制剂，主要包括（疫苗）、（诊断液）和（免疫血清）。诊断液包括（诊断抗原 ）和（诊断抗体 ）。 11传染发生的条件包括（病原微生物）、（易感动物）、（外界环境条件）。 12毒力由（侵袭力）和（毒素）构成。

13细菌的毒素分为（外毒素 ）和（内毒素 ）。 14传染发生的条件包括（病原微生物 ）、（ 易感动物）和（ 外界环境条件）。 二、选择题

1.下列器官中不属于中枢免疫器官的是（ D ） A.胸腺 B.法氏囊 C. 骨髓 D. 脾脏 2.下列器官中不属于外周免疫器官的是（ B ） A.扁桃体 B. 胸腺 C. 淋巴结 D. 脾脏

3.下列T细胞表面标志中哪一个是绵羊红细胞受体（ B ） A.TCR B. CD2 C. CD3 D.CD4 E.CD8

4 MHCII分子在提呈外源性抗原中限制性识别下列哪一分子（ C ） A.TCR B. BCR C. CD4 D.CD8

5.下列免疫球蛋白中具有分泌片这一结构的是（ A ） A. IgA B. IgG C.IgM D.IgE

6. MHCI分子在提呈内源性抗原同时被下列哪一分子识别（ D ） A.TCR B. BCR C. CD4 D.CD8

7下列免疫球蛋白哪一种是机体抗感染的主力军（ B ） A. IgA B. IgG C.IgM D.IgE 三、概念

1侵袭力：病原微生物在机体内定殖，突破机体的防御屏障，侵入组织或细胞，在其中生长繁殖，并能深入扩散的能力，称为侵袭力。

2败血症：病原微生物从局部进入血流并转移到全身，并在血液和全身各组织器官中生长繁殖，从而危害全身。

3传染源：是指不断地向外界环境排出病原体的动物机体，这种动物机体是病原微生物寄居、生长繁殖和不断向外界排出的场所。 四、问答

1什么是抗原，抗原的种类？

1、抗原：是指能刺激机体免疫系统中的免疫细胞发生免疫应答，产生免疫产物，或者能与免疫产物发生特异性反应的物质。2、抗原的种类：（1）完全抗原与不完全抗原（2）外源性抗原与内源性抗原（3）异种抗原、同种抗原、自身抗原和异嗜性抗原（4）胸腺依赖性抗原与非胸腺依赖性抗原（5）保护性抗原和非保护性抗原（6）普通抗原和超抗原 2什么是抗体及抗体的种类及功能？

1、抗体：B淋巴细胞受到抗原刺激后，增殖分化为浆细胞，由浆细胞分泌的免疫球蛋白，主要存在于血液、体液和组织液中，能与相应得抗原发生特异性结合。2、抗体分类：(1)依据抗体分子结构中重链恒定区的氨基酸组成和结构不同而表现的抗原性的差异分为：IgM、IgG、IgA、IgE和IgD等5类，（2）单体的抗体根据其两个Fab是否能与抗原结合，分为完全抗体和不完全抗体（3）根据 抗原的来源分为异种抗体、同种抗体、自身抗体和异嗜抗体。（4）根据抗体与抗原反应的类型分为沉淀抗体、凝集抗体、补体结合抗体、中和抗体、溶血素、调理素和溶菌素等。（5）根据抗体的均一性，分为多克隆抗体和单克隆抗体（3）抗体功能：①中和作用：病毒的中和抗体与病毒表面的抗原决定基结合后，可阻止病毒吸附于易感细胞的受体，使病毒失去感染力。毒素的中和抗体与毒素分子表面的抗原决定基结合后，使毒素失去毒性。②激活补体作用：抗红细胞抗体、抗菌抗体中的IgG、IgM，与相应的红细胞或细菌结合后，引起补体系统的传统激活，导致红细胞或细菌的溶解。③调理作用和ADCC作用：单核/巨噬细胞、白细胞及NK细胞表面具有IgG抗体的Fc受体。IgG的Fab与细菌或靶细胞特异结合后，Fc段可与吞噬细胞的Fc受体结合，可加强吞噬细胞对细菌的吞噬和消化，即调理作用；

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抗体Fc段与NK细胞的Fc受体结合，可激活NK细胞对靶细胞的杀伤，即ADCC作用。 3畜禽免疫系统的组成？

（1）中枢免疫器官：是源生免疫细胞或诱导淋巴细胞成熟的器官，又称初级淋巴器官。①骨髓：主要是四肢长骨骨髓，是源生淋巴干细胞、自然杀伤细胞、单核/巨噬细胞、红细胞、粒细胞等免疫细胞的器官。②胸腺：诱导淋巴干细胞成熟为T细胞。③法氏囊：禽骨髓中的淋巴干细胞经血流到达法氏囊被诱导成熟为囊依赖淋巴细胞，也简称B淋巴细胞或B细胞，B细胞经淋巴和血液循环迁移到外周免疫器官，参与体液免疫应答。（2）外周免疫器官：是各种免疫细胞分布并于抗原进行免疫应答的器官，又称次级淋巴器官。①淋巴结：起过滤、捕捉淋巴液中的抗原，并在其中进行免疫应答的作用。②脾脏：是造血、贮血、滤血、淋巴细胞分布及进行免疫应答的重要器官。③黏膜免疫系统：防御病原微生物的粘膜感染。④禽哈德腺：除分泌眼泪，润滑、保护瞬膜外，也分布有T细胞、B细胞，是禽类特有的外周免疫器官。 4试述细胞免疫、体液免疫应答过程？

（1）免疫应答的基本过程：识别阶段、反应阶段、效应阶段（2）细胞免疫应答的作用：T细胞免疫在抗胞内寄生病原体的感染方面具有尤其重要作用。靠细胞免疫应答激活的Tc细胞作用和TDTH细胞诱导的炎症共同作用把胞内病原体消灭。此外，细胞免疫在抗肿瘤免疫方面也具有重要作用。机体对某些胞内病原体进行细胞免疫应答的同时可引起迟发型变态反应，导致组织损伤。机体的细胞免疫应答也可引起人或动物不同个体之间的组织移植排斥反应。（3）体液免疫应答的作用：①中和作用：病毒的中和抗体与病毒表面的抗原决定基结合后，可阻止病毒吸附于易感细胞的受体，使病毒失去感染力。毒素的中和抗体与毒素分子表面的抗原决定基结合后，使毒素失去毒性。②激活补体作用：抗红细胞抗体、抗菌抗体中的IgG、IgM，与相应的红细胞或细菌结合后，引起补体系统的传统激活，导致红细胞或细菌的溶解。③调理作用和ADCC作用：单核/巨噬细胞、白细胞及NK细胞表面具有IgG抗体的Fc受体。IgG的Fab与细菌或靶细胞特异结合后，Fc段可与吞噬细胞的Fc受体结合，可加强吞噬细胞对细菌的吞噬和消化，即调理作用；抗体Fc段与NK细胞的Fc受体结合，可激活NK细胞对靶细胞的杀伤，即ADCC作用。 5试述血清学试验的种类及原理？

（1）沉淀反应：可溶性抗原与相应的免疫血清，在电解质和抗原、抗体比例适合条件下，完成两步反应，出现肉眼可见的沉淀现象。主要包括：环状沉淀试验、免疫扩散试验、免疫电泳试验。（2）凝集反应：颗粒性抗原(细菌、红细胞等）与相应抗血清比例适合、有电解质存在下，经过二步反应，出现肉眼可见的抗原颗粒凝集现象。主要包括：玻片凝集试验、试管凝集试验、间接凝集试验、间接凝集抑制试验（3）补体结合试验：被检系统和补体进行反应，然后加入指示系统，作用后观察绵羊红细胞是否溶解。主要包括：被检系统、补体系统、指示系统（4）中和试验：在易感动物、鸡胚或鸭胚、动物细胞培养中进行的，主要包括：毒素中和试验和病毒中和试验。（5）标记抗体技术：用荧光素、酶、放射性同位素、铁蛋白、胶体金、化学或生物发光剂等标记抗体或抗原，进行的抗原抗体反应，主要包括：免疫荧光技术、免疫酶技术、放射免疫测定、免疫金标记技术、免疫印迹技术、免疫PCR 6什么是兽医生物制品，种类及作用？

（1）兽医生物制品：是主要利用微生物或其代谢产物研制的用于预防、诊断，治疗畜禽传染病的生物制剂。(2)种类：疫苗、诊断液、免疫血清。（3）作用：通过人工主动免疫疫苗，达到预防传染病的发生。诊断液可对传染病进行免疫学诊断，以便对疾病确诊。免疫血清主要用于疾病的预防和治疗。 7试述灭活疫苗和弱毒疫苗的优缺点？

（1）弱毒活疫苗：弱毒株已丧失了致病力，但保留良好的免疫原性，用它繁殖生产的弱毒活疫苗具有如下特点：接种动物后安全，可在体内短期繁殖，可诱导体液免疫和细胞免疫，免疫效果一般都比死苗更好，免疫期较长；用量少，成本低，接种方便。但弱毒活疫苗的研制过程较长；保存条件要求严格，通常制成冻干品，而且从出场运输至现场应用都要冷藏；弱毒疫苗不断在易感畜、禽中应用，具有自身毒力可能逐渐返强，或与畜、禽体内存在的强毒株发生基因重组等潜在问题。（2）灭活疫苗：又称死苗。它是将毒力强免疫原性优良的病原微生物，经人工培养、大量增殖，经甲醛等灭活后加佐剂而成的疫苗。灭活疫苗的特点是：研制较快，保存条件酶活苗那么严格，接种动物后安全。因在灭活过程中免疫原性损失较大，故通常都要加佐剂，死苗用量较大，成本较高；仅引起有限的体液免疫，免疫效果较活苗差，免疫期较短。 8如何进行合理的免疫预防？ （1）熟悉疫苗：疫苗种类多，各有优缺点。平时要注意了解、熟悉各种疫苗。应用时应切实遵照各种疫苗的说明操作。（2）选择疫苗：原则：①本群或本地区的动物已有过流行，或受到威胁、可能发生流行的传染病，应选择相应疫苗，进行接种预防。对当地从未发生也不可能有流行的传染病，不必引进疫苗来接种，尤其不要引入那些毒力较强的疫苗或强毒苗，这样将会引进并传播病原。即使引用弱毒苗或死苗，也将使以后发生可疑疫病时的血清学诊断复杂化。②对应该接种的疫苗也要根据动物品种、年龄、疫病流行情况，病原的血清型等选择合适的疫苗。（3）免疫程序：是指一个乃至一群动物生长过程中应该接种的各种疫苗的最适计划。必须根据本群动物或本地区疫病流行规律、动物品种、年龄、母源抗体水平，接种疫苗后抗体为此情况，动物健康状况、生产规律，疫苗种类、性质、免疫途径、剂量等因素综合考虑，科学制订。（4）检查免疫效果：每次接种疫苗后应检查免疫效果，若发现免疫失败，应分析原因，采取措施，及时补接种。免疫失败原因

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可能如下：动物方面、疫苗方面、环境方面 9动物机体中枢免疫器官的种类及其作用？

中枢免疫器官：是源生免疫细胞或诱导淋巴细胞成熟的器官，又称初级淋巴器官。①骨髓：主要是四肢长骨骨髓，是源生淋巴干细胞、自然杀伤细胞、单核/巨噬细胞、红细胞、粒细胞等免疫细胞的器官。②胸腺：诱导淋巴干细胞成熟为T细胞。③法氏囊：禽骨髓中的淋巴干细胞经血流到达法氏囊被诱导成熟为囊依赖淋巴细胞，也简称B淋巴细胞或B细胞，B细胞经淋巴和血液循环迁移到外周免疫器官，参与体液免疫应答。 10动物机体进行免疫应答的基本过程？

（1）识别阶段：①外源性TD抗原进入机体后，相应克隆B细胞的BCR可直接与抗原的B细胞表位识别结合，完成B细胞对抗原B细胞表位的识别。另外的TD抗原被抗原递呈细胞（APC）吞噬、降解，抗原肽（T细胞决定基）与MHC-II分子结合，转移到APC表面与相应克隆TH的TCR特异识别结合。②机体内受病毒感染的细胞、肿瘤细胞（靶细胞）产生的内源性抗原，经靶细胞中的蛋白酶体降解，抗原肽（T细胞决定基）与靶细胞内的MHC-I分子结合，转移到表面，与未活化的前体TC(P-TC)的TCR特异识别结合。（2）反应阶段：①识别抗原后的TH细胞、TC细胞和B细胞被激活，进行转化、增殖、分化成效应物质。识别TD抗原后的TH细胞转化、增殖，在IL-12诱导下分化为TH1细胞；在IL-4诱导下分化为TH2细胞。识别TD抗原后的B细胞在TH2细胞分泌的IL-4、IL-5、IL-10等作用下，转化、增殖、分化成各类浆细胞，分泌IgM、IgG、IgA或IgE等抗体分布于体液（血液、淋巴液、组织液）中。识别内源性抗原后的TC转化、增殖为效应TC。②TH细胞、TC细胞和B细胞激活，转化、增殖、分化过程中，将分别产生一些长寿的记忆细胞保留于机体内。（3）效应阶段：①TH1在受同种抗原作用，产生多种细胞因子，招集、激活大量单核/巨噬细胞、白细胞于抗原存在部位形成炎症，在吞噬消除抗原的同时也可造成炎症部位组织损伤。效应TC细胞特异性结合靶细胞后分泌穿孔蛋白、粒酶、表达FasL蛋白等，使靶细胞溶解或凋亡。TH1与效应TC细胞共同完成细胞免疫效应，同时可发生迟发性超敏反应，造成机体组织损伤。②浆细胞：产生的各类体液抗体，在补体、吞噬细胞、NK细胞等协同作用下消除相应抗原，完成体液免疫效应。在一定条件下也可引起I、II、III型超敏反应，造成机体功能紊乱或组织损伤。③TI抗原诱导的免疫应答过程比较简单，无需APC的递呈、TH的辅助，其表面重复排列的B细胞表位与B细胞SmIg识别结合后可直接引起B细胞转化、增殖成浆细胞，分泌少量IgM，且无记忆细胞产生，故同种TI抗原再次进入机体，不发生再次免疫应答。

11抗体产生的一般规律及其实际意义？ 1、（1）初次应答：一种TD抗原第一次进入动物机体，引起的抗体产生过程。特点是阴性期较长，产生的抗体水平不高，维持时间不长，但机体内产生了记忆细胞。（2）再次应答：在初次应答后，同种TD抗原再次进入机体引起的抗体产生过程。特点是开始血清中原有的特异抗体水平出现暂时性下降，或特异抗体已消失的机体出现短暂的阴性期，接着特异抗体量迅速上升到高峰，维持较长时间，抗体主要是IgG。这是由于记忆细胞受再次进入的抗原作用后，迅速大量增殖成分泌IgG的浆细胞，产生大量IgG。2、意义：根据抗体产生的一般规律可知，进行疫苗免疫时可采取多次免疫的方法，激发机体的再次应答，获得满意的免疫效果；再次免疫时一定避免抗体产生的高峰期，在下降期后期进行加强免疫；了解抗体产生一半规律有助于进行疾病的早期诊断。

12T淋巴细胞表面的重要表面标志及其作用？

（1）T细胞的表面标志：①TCR：T细胞在胸腺发育成熟过程中表达在细胞膜上，起特异识别抗原作用的蛋白分子。TCR两条肽链的C端固定在T细胞膜中，N端在T细胞膜表面并各有一个像免疫球蛋白一样的可变区，共同形成与抗原的T细胞决定基特意识别结合的结构。②CD2：成熟T细胞表达于膜上的单链多肽分子，在体内起加强T细胞与抗原递呈细胞之间的黏附、促进T细胞活化的作用。③CD3：成熟T细胞表达于膜上至少有5种肽链组成的蛋白分子，与TCR联成复合体，TCR特意识别结合抗原，CD3起转导抗原信号的作用。④CD4：辅助性T细胞表达于膜上的单链糖蛋白分子，是TH的重要表面标志。当TH的TCR识别结合由抗原递呈细胞的MHC-II分子递呈的抗原肽时，CD4也与MHC-II分子加强结合，并起转导抗原信号的作用。⑤CD8：细胞毒性T细胞表达于膜上的两条肽链组成的蛋白分子，是TC的重要表面标志。当TC的TCR识别病毒、胞内菌感染的细胞或肿瘤细胞的MHC-I分子递呈的内源性抗原肽时，CD8与MHC-I分子加强结合，并起转导抗原信号的作用。（2）B细胞的表面标志：抗原受体（SmIg）、Fc受体、C3b受体。（3）NK细胞表面标志：NK细胞是直接在骨髓中由淋巴干细胞分化成熟、进入外周血中的一群淋巴细胞，能自然识别、杀伤肿瘤细胞、病毒感染细胞、胞内菌感染细胞和真菌。广泛分布于动物的肝、血液、肺、腹腔、呼吸道和消化道黏膜，形成动物机体抗肿瘤、抗感染的一道天然防线。

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