PstI内切酶 说明书

PstI

产品编号

产品名称

包装

D6565 PstI 1000U 产品简介：

¾

PstI内切酶为进口分装，基本信息如下：

识别序列 缓冲液兼容性(%) CTGCA^G G^ACGTC

酶切温度

失活条件

甲基化干扰？

1X B 1X G 1X O 1X R1X Y 2X Y 80℃

37℃ 无

20min* 50-100 50-100 100 100 50-10050-100

*，80℃ 20 分钟只能使不超过10U的酶失活，酶过多则不能被充分失活。

¾ 酶储存液组成为：10mM Tris-HCl (pH7.4 at 25℃)，200mM NaCl，1mM DTT，0.1mM EDTA，0.15% Triton X-100，

0.2mg/ml BSA and 50% glycerol。

¾ 1X Buffer O组成为：50mM Tris-HCl (pH7.5 at 37℃)，10mM MgCl2，100mM NaCl，0.1mg/ml BSA。

¾ 1X Buffer Y组成为：33mM Tris-acetate (pH7.9 at 37℃)，10mM magnesium acetate，66mM potassium acetate，0.1mg/ml

BSA。

¾ 酶切和连接效率：50倍过量的本内切酶消化1小时，>95％被酶切的片段可以被连接并被重新酶切(recut)。

¾ 活性单位定义：在37℃，50微升反应体系中反应1小时，将1微克的λ DNA完全分解的酶量定义为1个活性单位，即1U。

包装清单：

产品编号 D6565-1 D6010O D6010Y

－

产品名称 PstI (10U/µl) 10X Buffer O 10X Buffer Y 说明书

包装 1000U 1ml 1ml 1份

保存条件：

-20℃保存。

注意事项：

¾ ¾ 1.

内切酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 单酶切时可以参考如下反应体系进行：。

待酶切DNA

双蒸水或MilliQ水 10X Buffer O

PstI 总体积

使用说明：

不超过1µg 适量 2µl 0.5-1µl 20µl

2.

37℃孵育1小时或更长时间

说明：请注意把Buffer和水等充分混匀后再加入内切酶，加入内切酶后可以用吹打或轻轻Vortex混匀。通常参考上述条件孵育1小时已经足够，但多孵育数小时甚至孵育过夜也不会产生负面影响。如果酶切较长时间甚至酶切过夜，可以使用更少量的酶。待酶切DNA量较大时，可以适当延长酶切时间或按比例放大酶切体系。

双酶切或多酶切时，需选择适当的可以兼容两个或多个内切酶的缓冲液，然后参考上表设置反应体系。如果没有合适的缓冲液可以选择，可以在一种酶消化完毕后进行纯化，纯化完毕后再进行另外一种酶切反应。