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请教RNA电泳只有一条带是什么原因

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请教RNA电泳只有⼀条带是什么原因

对于RNA跑成⼀条带可能有⼏种可能:

1.点样量太多,两条带分不清,建议多跑⼀会,上样量太多不仅会造成两条带分不清,⽽且会造成你的28S/18S亮度⽐⾮2:1,会变⼩。

2.有可能提取有问题,这条带为DNA ,⽽⾮RNA ,最好做RNA Marker对照3.可以⽤RNase(或DNase)酶消化来鉴定这条带是不是RNA

4.可以⼤概估计⼀下,因为28S和18S⼤概在4.5kb和1.9kb的位置,DNA的分⼦量很⼤,你可以通过这条带距离点样孔的位置粗略的估计⼀下

因为28S和18S⼤概在4.5kb和1.9kb的位置

==================================================================你这个电泳RNA完全降解了,全部降解成5S⼤⼩的⽚段,不是5S⾮常亮,是严重降解的⽚段往往是和5S⼤⼩近似,所以,跑电泳的时候,就会在5S位置重叠。所以,你会觉得5S很亮。

⾄于这个降解是提取失败降解了,还是电泳过程中降解的,都有可能。

你可以做个阳性对照,⽐如RNAiso实际就是trizol,你可以提取⼀个细胞,或者组织肯定可以提取成功的样品做阳性对照。如果这个组织细胞的样品都没有提取出来,那就是2种情况:1产品质量有问题。2,电泳系统有问题,电泳过程中降解了。==================================================================

28sRNA、18sRNA、5sRNA的确是rRNA,并且理论上讲28S条带的亮度应该为18S条带亮度的1~2倍,否则,当18S条带的亮度过⾼时说明28SrRNA可能降解为18SrRNA了,意味着RNA可能严重的讲解了。 最后,这三条带代表的是总RNA的提取程度,不能说明mRNA的提取量。

==================================================================正常RNA三条带

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