香菇液体菌种母种培养基的比较试验

食用１－ｒ　ＥＤＩＢＬＥ　ＦＵＮＧＩ　数量比，取１５个菌球在培养ｍｌ　ｑ￣２００７（６）　－ｙＯ，侧总长度，然后计　香菇液体菌种母种培养基的　算单个菌球的直径，取３次求平均值（ｎ　ｍ）。④纤维素酶活力的　测定：采用３，５一二硝基水杨酸法测定ＣＭＣ酶活性单位（每分钟　比较试验　孟庆国　周建树　赵　杰　修翠娟１　陈　超　韩　冰　董晓宁　赵国学３　（１辽宁省微生物科学研究院，朝阳市１２２０００；　２辽宁省朝阳市龙城区防疫站，１２２０００；　３辽宁省建平水利局，１２２４００）　摘要以玉米粉为主料取代琼脂斜面培养母种，试验表明，　培养的母种，浸泡后分散度好．粒度小，可代替匀浆。又因其与　种子培养基中碳源成分相同。还可缩短停滞期。　关键词香菇液体菌种培养基比较试验　文章编号　１０００－８３５７（２００７）０６一Ｏ０３４一Ｏ１　香菇液体菌种深层培养一般都采用琼脂斜面菌种做母　种，这种菌种发酵停滞期长，萌发点少，生长慢，为克服这一缺　点，宜采用均质化处理。但是，用玻璃珠匀质较费事，采用匀浆　机又易污染，为此笔者采用以玉米粉为主料取代琼脂斜面培　养母种试验。现将试验结果介绍如下。　１材料与方法　１．１试验菌株香菇Ｌ一２６菌株由辽宁省微生物科学研究院　提供。　１．２供试培养基①玉米粉６８％，麸皮３０％，糖１％，石膏　１％，含水量５５％。②玉米粉４８％，麸皮５０％，糖１％，石膏１％，　含水量５５％。③玉米粉２８％，麸皮７０％，糖１％，石膏１％，含水　量５５％。④土豆２０％，蛋白胨０．５％，葡萄糖２％，ＫＨ２ＰＯ４０＿３％，　Ｍｇ－，ＳＯ４０．１５％，琼脂粉０．２％，ｐＨ自然。⑤木屑７８％，麸皮　２０％，糖１％，石膏１％。　在无菌室内用接种铲从香菇母种斜面上切取０．５　ｃｍ２的　菌块分别转接到供试培养基上，２５℃条件下培养１２　ｄ，挑选菌　丝健壮，洁白，无污染，长满管的菌种备用。　１．３液体菌种培养　液体培养基的制备：取２５０　ｍＬ三角　瓶，装１００ｍＬ培养液。培养液配方为：葡萄糖１％，玉米粉　２％。麸皮２％。酵母膏０＿３％，ＫＨ２ＰＯ４０．１％，ＭｇＳＯ，０．１％，ｐＨ自　然。１２１ｏｃ条件下灭菌３０　ａｒｉｎ。　选择长好上述菌种在无菌室内切取０．５　ｃｍ２的菌块３块，　接人到三角瓶中，１０层纱布封口。置于２８℃，转速１６０　ｒ／ｍｉｎ　的摇床上振荡培养，从６月２１　１３开始培养，６月２５日进行菌　球数量测定、菌丝体生物量测定、菌球的直径测定，到第９天　时结束。发酵好的培养液应该澄清、无异味、含有大量的菌丝　球。带刺，大小均匀，直径一般１　ｍｍ左右。　１．４测定内容和方法①菌球数量测定：取１　ｍＬ发酵液，用　水稀释１０倍，于培养皿下垫置方格纸，直接计数，取３次求平　均值（个／ｍＬ）。②菌丝体生物量测定：将培养液用８０目筛网过　滤出菌球，清水洗涤数次，然后放人干燥箱１０５％２烘干２　ｈ，冷却　后称重，然后再放人干燥箱中１０５￣Ｃ烘干半小时再称重，直到２　次称重的重量差不超过２　ｍｇ即为恒重。用电子天平称量菌丝　体干重，每种试验均为６瓶重复（＃ｌＯＯｍＬ）。③菌球的直径测定：　取１　ｍＬ培养液倒人培养皿中，按ｌｍＬ培养液含菌球的大小的　一３４一　催化纤维素水解生成ｌｌ－￣ｇ葡萄糖的酶量定为一个活力单位）。　２结果和分析　２．１　茵球数量、菌丝体生物量及菌球直径测定结果见表１。　表１菌球数量、菌丝体生物量、直径的测定结果　注：菌球数，个／ｍＬ；菌丝体生物量，ｇ／ｌＯ０ｍＬ；菌球直径，ｍｍ。　２．２纤维素酶活力的测定结果　纤维素酶活力的测定结果　见表２。　表２纤维素酶活力的测定结果（Ｕ，ｍＬ）　表３不同处理菌丝体生物量纤维素酶活力的比较　从表１、表２和表３可以知道，接种配方①培养的菌种，　发酵周期最短，收率最高，仅１２０　ｈ即可达到２．５１∥１００ｍＬ，　并且纤维素酶活力在１２０　ｈ最高为３８９．３１　Ｕ／ｍＬ；而接种配　方（　培养的菌种在１９２　ｈ才达到收率最高为１．８７　ｇ，１００　ｍＬ，　并且纤维素酶活力为３０９．８６　Ｕ／ｍＬ；接种配方⑤培养的菌种，　纤维素酶活力在１６８　ｈ最高为３ｌ１．７４　Ｕ／ｍＬ，并且收率为　２．０２　ｇ，１００　ｍＬ，比配方④效果好，但不如配方①。配方②和配　方③的效果也不如配方①。　综上所述我们认为配方①培养的菌种，接人液体培养基　后，具有分散度好、形成菌球快、活力强的特点，比供试其他配　方效果都好，可以替代传统的斜面培养基培养液体菌种母种。