第３０卷・第７期２０１１年７月 种子（Ｓｅｅｄ） Ｖｏ１．３０ Ｎｏ．７ Ｊｕ１． ２０１ｌ 种子生产・ ３个传统月季品种的组织培养研究 李卉 ， 于超 ， 王蕴红 ， 潘会堂 ， 罗乐 ， 张启翔 。 （１．北京林业大学园林学院， 北京１０００８３； ２．国家花卉工程技术研究中心， 北京１０００８３） Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｏｉｌ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ Ｔｈｒｅｅ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｒｏｓｅｓ ＬＩ Ｈｕｉ ，ＹＵ Ｃｈａｏ ，ＷＡＮＧ Ｙｕｎ．ｈｏｎｇ ，ＰＡＮ Ｈｕｉ．ｔａｎｇ ，ＬＵＯ Ｌｅ ，ＺＨＡＮＧ Ｑｉ。ｘｉａｎｇ ｔ 摘要：我国传统月季品种具备适应性广、四季开花、芳香等优 点。本试验研究了不同浓度６－ＢＡ及ＮＡＡ对传统月季品种“一 品朱衣”、“春水绿波”及“软香红”的腋芽增值诱导的影响。结 果表明：ＭＳ＋６－ＢＡ０．５０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．１０ｍｇ／Ｌ（Ｂ７处理）是最 适合的增值培养基配方。 关键词：月季；组织培养；生长势 中图分类号：Ｓ ６８５．１２ 文献标志码：Ａ 文章编号： １００１—４７０５（２０１１）０７－０１１４－０３ 中国传统月季品种 历史悠久，是重要的文化和 自然遗产，同时又是我国古代花卉园艺历史和成就的 重要载体 ｊ。世界各国的月季育种者普遍感到，要使 现代月季育种有新的突破，必须进一步导人中国传统 月季的优良种质 Ｊ。通过研究３种传统月季品种的组 织培养，为传统月季品种的扩繁及应用奠定了基础。 １材料与方法 以中国传统月季品种“一品朱衣”、“软香红”及 “春水绿波”生长势和年龄相近的带单芽茎段为外植 体。流水冲洗１ ｈ后，转入已灭菌的三角瓶内。用 ７５％酒精浸泡灭菌６～８ ｍｉｎ，并不断轻轻摇晃。再用 无菌水冲洗３遍，接种到培养基中，每瓶５段。３周 后，再将健壮程度较为一致的芽切下，分离，去掉枯萎 叶片，转入增值培养基（在ＭＳ培养基配方的基础上， 添加激素的种类及浓度见表１）。每瓶接种３个单芽。 每个配方接种８瓶，重复３次。３周后，观察并记录芽 的增值系数、高度、生长势等。培养室的温度为２０℃， 光照强度１ ２００ ｌｘ，光照时间１６ ｈ／ｄ。 增值系数＝现有不定芽数量／接种不定芽数量。 生长势：１级：叶片颜色较浅或叶片较小，节间短 收稿日期：２０１１—０３—１５ 基金项目：罔家环保部重大项目（物种Ｏ８－二－３．１）及国家林业局“９４８” 重大项日（２００６４一Ｃ０８）。 作者简介：李 巾（１９８４一），硕士，主要从事月季育种研究；Ｅ—ｍａｉｌ： ｗｉｌｄｇｒａｓｓｌ ９８４＠ｙａｈｏｏ．ｔｏｍ．ｃｎ。 通讯作者：张启翔，教授，主要研究方向为园林植物生物技术与遗传育 种：Ｅ。ｍａｉｌ：ｚｑｘ＠ｂｊｆｕ．ｅｄｕ．ｃｎ。 ・１１４・ 缩；２级：叶片颜色绿，叶面积较大，节问发育正常；３ 级：叶片颜色浓绿，节间粗壮。（具体生长势级别的划 分见图１）。 表１ 传统月季品种不定芽增值培养基配方表 图１ 传统月季品种组培苗的生长势分级 ２结果与分析 组织培养中，不同处理对３个传统月季品种不定 芽的增值系数、高度、生长势及生长状况的影ｕ向如表２ 所示。 方差分析（表３）表明，在不定芽的增值系数、高度 种子生产 李卉等：３个传统月季品种的组织培养研究 及生长势３个方面，区组（重复）问和品种问的差异均 及０．１０ｍｇ／Ｌ ３个水平上的处理（处理Ｂ ３、Ｂ６、Ｂ９）之 问差异不显著。 不显著，处理问的差异显著，品种和处理的交互效应之 间差异均为极显著。 表２不同处理对不定芽的影响 对不同处理进行多重比较，结果如表４所示。 在各处理对不定芽的增值系数影响方面，Ｂ ７（ＭＳ 培养基添加６．ＢＡ浓度０．５０ ｍｇ／Ｌ、ＮＡＡ ０．１０ ｍｇ／Ｌ）处 理的增值倍数最高，均值为２．６３（倍）；Ｂ ｌ（ＭＳ培养基 添加６．ＢＡ浓度０．５０ ｍｇ／Ｌ、ＮＡＡ０．００ ｍｇ／Ｌ）处理的增 值系数最低，均值为１．２２（倍）。当６－ＢＡ浓度为１．５０ ｍｇ／Ｌ时，ＮＡＡ浓度在０．００ ｍｇ／Ｌ、０．０５ ｍｇ／Ｌ及０．１０ ｍｇ／Ｌ ３个水平上（处理Ｂ ３、Ｂ ６、Ｂ ９），芽的增值系数 都较高。显著性大于０．０１时，６－ＢＡ浓度为１．００ ｍｇ／Ｌ 或１．５０ ｍｇ／Ｌ，ＮＡＡ浓度在０．００ ｍｇ／Ｌ、０．０５ ｍｇ／Ｌ及 ０．１０ ｍｇ／Ｌ ３个水平上的处理（处理Ｂ ２、Ｂ ３、Ｂ ５、Ｂ ６、 Ｂ ８、Ｂ ９）之间差异均不显著。 各处理对不定芽的高度影响方面，Ｂ ７处理后芽 的高度最高，均值为２．１１ ｃｍ。其次为Ｂ ３处理，不定 芽高度的均值为１．７０ ｃｍ。Ｂ １处理的不定芽高度最 低，均值为１．１６ ｃｍ。显著性大于０．Ｏ１时，６－ＢＡ浓度 为１．５０ ｍｇ／Ｌ时，ＮＡＡ浓度在０．００ ｍｇ／Ｌ、０．０５ ｍｇ／Ｌ 表３方差分析 值丕 匿廑（！ ！ 生 垫 处理 均值 均值 均值 注：为提高显著性比较的准确程度，故在本表中的生长势采用３位 有效数字表示。 在各处理对不定芽生长势的影响方面，Ｂ ５、Ｂ ９ 处理的芽生长势最好，生长势均值为２．７１；其次为 Ｂ ３、Ｂ ７处理，均值为２．７０。Ｂ ｌ处理的芽生长势最 差，均值为１．９９。当显著性大于０．０５，６－ＢＡ浓度为 １．００ ｍｇ／Ｌ时，ＮＡＡ浓度在０．Ｏ０ ｍｇ／Ｌ、０．０５ ｍｇ／Ｌ及 ０．１０ ｍｇ／Ｌ ３个水平上的处理（处理Ｂ ３、Ｂ ６、Ｂ ９）之间 差异均不显著。 综合分析各处理对不定芽的增值系数、高度及生 长势三方面的影响，结果表明：ＭＳ＋６一ＢＡ０．５０ ｍｇ／Ｌ＋ ・１１５・ 第３０卷第７期２０１１年７月 种子（Ｓｅｅｄ） Ｖｏ１．３０ Ｎｏ．７ Ｊｕ１． ２０１ｌ ＮＡＡ０．１０ ｍｇ／Ｌ（Ｂ ７处理）是最适合的 增值培养基配方，ＭＳ＋６．ＢＡ １．５０ ｍｇ／Ｌ ＋ＮＡＡ ０．Ｏ０ ｍｇ／Ｌ（Ｂ ３处理）及ＭＳ＋ ６一ＢＡ １．５０ ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．１０ ｍｇ／Ｌｆ Ｂ ９ 表５ 交互效应间的多重比较 处理）配方的培养基也较适合不定芽的 增值培养。 对品种和处理的交互效应之间的多 重比较（表５）表明：在增值系数方面， Ｂ ６处理对传统月季品种“春水绿波”、 “软香红”的不定芽增值效果最好，增值 系数分别为３．１３及３．０６；Ｂ ３处理对 “一品朱衣”的不定芽增值效果最好，增 值系数为２．８８。在高度方面，Ｂ ７处理 后的３个传统月季品种的不定芽高度最 高（相对于同一品种的其他处理），分别 为２．５２ ｃｍ（“一品朱衣”）、２．１０ ｃｍ（“软 香红”）及１．７１ ｃｍ（“春水绿波”）。在 生长势方面，对３个传统月季品种生长 势影响效果最好的处理分别为Ｂ ５处理 （“软香红”）、Ｂ ４处理（“一品朱衣”）及 Ｂ ９处理（“春水绿波”），分别为２．９、 ２．９及２．７。 ３讨论 激素作为关键因子，在影响植物组 织培养中起着决定性作用。植物激素种 类和用量的选择应根据组织培养的目 的、植物材料的种类及生长表现状态来 确定。少量的生长素类可促进芽的生 长，但往往会刺激基部愈伤组织的形成。 注：为提高显著性比较的准确程度。故在本表中的生长势采用３位有效数字表示。 因此在培养基中，细胞分裂素和生长素的含量必须形 成一个适当的配比才能有效的诱导器官发生 Ｊ。月 季组织培养过程中，合适的激素配比除了要考虑增值 系数以外，还应考虑丛生苗的质量、叶片大小和节间长 短等问题 。 崔广荣 的研究表明，处理ＭＳ＋６一ＢＡ １．５０ ｍｇ／Ｌ 及培养目标来选择应用适宜的激素浓度配比，不能盲 目套用。 参考文献： ［１］罗乐，张启翔，白锦荣，等．１６个中国传统月季品种的核型 分析［Ｊ］．北京林业大学学报，２００９，３１（５）．９０—９５． ［２］赵世伟．中国古老月季的价值［Ｊ］．园林，２００８（１２）：７—８． ＋ＮＡＡ ０．０５ ｍｇ／Ｌ（同本文的处理Ｂ ６）对传统月季品 种“月月红”芽增值率的影响效果最好。在本研究中， 经同样激素配比处理后的传统月季品种“春水绿波” ［３］张佐双，朱秀珍．中国月季［Ｍ］．北京：中国林业出版社， ２ｏｏ６． 及“软香红”不定芽的增值系数最高。但与对传统月 季品种“一品朱衣”不定芽增值系数影响效果最好的 处理不同。在对不定芽的高度影响等处理方面，Ｂ ７ 处理同时最适于本研究中的３个品种。因此，在进行 传统月季品种组织培养时，应根据具体品种或品种群 ・［４］李建平．雪山娇霞月季组培快繁及树状月季栽培改进刍议 ［Ｄ］．北京：北京林业大学，２００７． ［５］谢晓静，毕晓颖，雷家军．月季品种傅茎段离体培养的研究 ［Ｊ］．辽宁林业科技，２００９（１）：４７—４９． ［６］崔广荣．月季茎段组织培养的研究［Ｊ］．种子，２００３，２２（６）： ３４—３６． ｌ ｌ６・