药物的量效关系曲线重点

第 7 次课 授课时间 2008 年5 月28 日 教案时间 2008 年5月 27 日 课程名称 教 员 授课题目 基本教材 参考书目 药理实验 刘爱军 年 级 专业技术 职 务 05 讲师 专业、层次 授课方式 药学 本科 实验课 学时 3 药物的量效关系曲线 1药理学实验 2005年3月版 2古德曼 吉尔蔓，治疗学的药理学基础 2002 3[日]高木敬次郎主编，药理实验法 1981 教学目的与要求： 1、 学习离体动物平滑肌器官的实验方法 2、 用累积剂量法求乙酰胆碱的量效关系曲线、PD2和PA2值 大体内容与时间安排，教学方法： 1、 实验原理讲解 20 2、 学生实验过程 100分钟 教学方法：讲授于示范相结合 教学重点，难点： 1、 PA2和PD2的概念 2、 回肠的安装固定 3、 实验数据的处理 学员学习方法： 1、 动手实际操作 2、 参考实验讲义 3、 听教员讲解 教研室审阅意见： _____________（教学组长签名） _____________（教研室主任签名） 年 月 日

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基本内容 【原理】 1、激动药与拮抗药 （1）激动药(agonist)：与受体有亲和力又有内在活性药物。 ①完全激动药(full agonist): α= 1 辅助手段和时间分配 ②部分激动药(partial agonist, mixed agonist): 与受体有亲和力，但 内在活性较弱 （α<1）的药物。 （2）拮抗药(antagonist)：与受体有亲和力，而无内在活性的药物 （α= 0）。 ①竞争性拮抗药(competitive antagonist)与激动药竞争同一受体的拮抗药。 激动药的量效反应曲线可以被竞争性拮抗药平行右移。如果增加竞争性激动药浓度，仍可达到Emax。 ②非竞争性拮抗药（noncompetitive antagonist）与激动剂作用于同一受体，结合牢固，分解慢或是不可逆的，或作用于相互关联的不同受体。 2、PD2值 PD2称为亲和力指数，等于药物-受体复合物的解离常数KD的负对数（-lgKD），其值与亲和力成正比。KD的意义是引起最大效应的一半时（即50%受体被占领）所需的药物剂量。 3、PA2值 PA2是一种用以表示竞争性拮抗剂作用强度的指标，其意义是能使激动剂提高到原来的2倍时，可产生与原来浓度相同效应所需的拮抗剂克分子浓度的负对数(-log(B))。PA2的值越大说明拮抗剂的作用越强。PA2是拮抗参数(antagonism parameter)：当有一定浓度的拮抗药存在时，激动剂增加2倍时才能达到原来效应，此时拮抗药的负对数即拮抗参数， pA2 = -log[I] = -logKI

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基本内容 4、药物作用 乙酰胆碱作用于豚鼠回肠的M受体，引起肠肌收缩，当加入M受体拮抗剂阿托品后，若提高乙酰胆碱浓度，仍能达到未加拮抗剂前的最大反应，并可使剂量反应曲线平行右移，则表明阿托品对乙酰胆碱呈竞争性拮抗。 【材料】 动物：豚鼠1只。体重200~300g，雌雄不限 器材：MPA-2000生物多道信号分析系统，麦氏浴槽、恒温水浴、铁支架、双凹夹、剪刀、眼科镊、10ml量筒、注射器、烧杯、培养皿、缝针、棉线 试剂：台式液、10-4mol/L~10-8mol/L氯化乙酰胆碱、0.1％硫酸阿托品。 【方法与步骤】 一、 首先调试MPA-2000系统，使进入肌张力测定状态． 二 、调节仪器：向麦氏浴槽中加入38~39℃的水，打开电源，使水温维持在38℃±0.5℃。向麦氏管中加38℃ 40ml台氏液，同时准备50ml台氏液在浴槽中预热。调节麦氏管中的通气量，使之2--3个气泡／秒，稳定5~10分钟。 三、离体肠管的制备 1、取豚鼠一只，用木棒击头至昏死，立即剖腹，自回盲瓣向上取出回肠的一段（约20cm），置于盛有台式液的器皿中，用台氏液轻轻冲洗干净肠内容物，剪成2cm长的小段置台氏液中备用。 2. 取一小段肠子，两端按对角线的方向，分别从一侧壁上穿线，一端固定在麦氏浴管中的挂钩上，另一端与张力换能器相连，并使肠有一定张力。开动记录系统，记录基线水平直至基线平稳。

辅助手段和时间分配 （教案续页）

基本内容 3、 待肠稳定，描记一段正常曲线，按表向麦氏浴管中加入乙酰胆碱溶液。在每次加药后，待肠的收缩不再增大时立即给下一个浓度的乙酰胆碱。重复上述操作至肠收缩达最大值为止。 4、 用台氏液冲洗浴管内肠段三次，换入3 x 10-8 M阿托品台氏液，稳定15分钟后，重复操作步骤3。 【注意事项】 1、如肠段挂上后收缩不稳定，可用预热至20℃的台氏液换洗两次；如自动收缩太明显，可换用半钙台氏液。为了保证回肠的生理活性，浴槽应保持通气不间断。 2、每次给药量须准确。且应直接滴在台氏液中，不要滴在管壁或悬线上，也不要猛力将药液冲入麦氏管中，更不要直接加在回肠上。 3、处理标本必须轻柔，不要用镊子夹回肠中部，以避免损伤。肠管两端穿线时切勿将肠腔缝死，对角穿。 【结果处理】 1、 在主菜单下分析项可选择区域测量、标记查询、开始反演、鼠标捕捉，测量后按工具栏中取消标志线，分别测出正常曲线及每次加药后的张力大小，将结果填入表中。最后以乙酰胆碱引起最大收缩力为100％，分别计算各剂量反应的百分率 2、 再以各剂量反应的百分率为纵坐标，以剂量的负对数为横坐标，绘出给予阿托品前后乙酰胆碱的剂量反应曲线。 3、（1）求PD2：在未用阿托品的乙酰胆碱量效曲线上找出反应率为50%的点，其横坐标的负值既P为PD2。 （2）求PA2：PA2=1g（r-1）+P（Atr）其中，r为用阿托品前后使反应率为50%所需乙酰胆碱浓度的比值（r>1）;P（Atr）为阿托品溶液浓度的负对数。 辅助手段和时间分配 （教案续页）

基本内容 表1 辅助手段和时间分配 No Preparation of Ach(M) 1 2 3 4 5 6 7 1 x10 1 x10-6 1 x10-5 1 x10-4 1 x10 1 x10-2 1 x10-1 -3-7Volume of Ach(ml) 0.20 0.18 0.09 0.09 0.09 0.09 0.09 Concentration of Ach In magunus tube(M) 1 x 10 1 x 10-8 1 x 10-7 1x 10-6 1 x 10 1 x 10-4 1 x 10-3 -5-9 （教案末页）

药物量效曲线的测定方法是药理学基本实验方法之一，实验操作简单，台 小 结 氏液的配置比较繁琐，实验结果较容易受到实验操作的影响。学员通过该实验可以强化对药理学理论课上药动学一些基本概念的掌握，基本掌握信息采集系统的应用。该实验要求学员操作精细，锻炼学员动手能力。 1、 什么是PD2和PA2？有何意义？ 2、 本实验如改用兔肠，应该如何进行？ 复习思考题及作业题 实施情况及分析