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日粮瘤胃非降解蛋白和阴离子盐对奶牛生产性能及血液指标的影响

来源:爱go旅游网
河北农业大学硕士学位论文

日粮瘤胃非降解蛋白和阴离子盐对奶牛生产性能及血液指标的

影响

姓名:刘瑞娜申请学位级别:硕士专业:动物营养与饲料科学

指导教师:李建国

20050618

摘要本研究分为两部分,试验一研究围产前期奶牛日粮中加入阴离子盐对奶牛生产性能血液指标的影响,试验二研究泌乳中期奶牛日粮中添加过瘤胃蛋白对奶牛生产性能血液指标的影响。试验一:本实验选用3~5胎、处于产前3周的中国荷斯坦奶牛30头,随机分成6组,分别饲喂以下日粮:1.LDCAB:DCAB值为一125mEq/KgDM;2.LDCAB+MgO:在1的基础上添加氧化镁,DCAB值为一125mEcl/KgDM;3.MDCAB:DCAB值为一75mEq/KgDM:4.MDCAB+MgO:在3的基础上添加氧化镁,DCAB值为一75mEq/KgDM;5.HDCABDCAB值为72mEq/KgDM;6.HDCAB+MgO:在5的基础上添加氧化镁,DCAB值为72mEq/KgDM。研究阴离子盐和镁对围产前期奶牛生产性能和血液指标的的影响。结果表明(1)奶牛产后2~ll周产奶量、乳脂、乳蛋白各组之间没有明显差异(P>O.05);(2)LDCAB组、LDCAB+MgO组采食量显著低于MDCAB组、MDCAB+MgO组、ttDCAB组、HDCAB+MgO组的采食量(P<O.01):(3)相同DCAB水平下未加MgO、加MgO对尿的平均pH值影响不显著(P>O.05),不同DCAB水平之间差异显著(P<O.05)。DCAB值越低尿的pH值越低;(4)围产前期LDCAB、LDCAB+MgO组血清氯浓度显著高于ttDCAB、HDCAB+MgO组,围产后期HDCAB+MgO、HDCAB组血清氯浓度明显低于其他组:(5)围产前期LDCAB+MgO和MDCAB+MgO组血清镁浓度显著高于HDCAB组(P<O.05),添加MgO的组血清镁含量均高于未添加的组,产后LDCAB+MgO组也显著(P<O.01)高于IIDCAB组;(6)围产前期LDCAB、LDCAB+MgO、MDCAB、MDCAB+),IgO、HOCAB、HDCAB+MgO组血清钾、含量没有显著差异(P>O.05),产后HOCAB、HDCAB+MgO组血清钾、钠显著高于其他组(P<O.05):(7)围产期奶牛血清磷的影响差异不显著(P>0.05);(8)围产前期血清钙离子浓度影响差异不明显(P>O.05),添加阴离子盐的组血清钙含量显著高于未添加组:(9)围产前期血清羟脯氨酸浓度没有显著差异(P>O.05),产后HDCAB、HDCAB+MgO组血清羟脯氨酸浓度显著低于其他各组(P<O.01);(10)HDCAB、HDCAB+MgO组产前、产后血清PTH显著低于其他组(P<O.01),PTH产后比产前提高的程度LDCAB、LDCAB+MgO明显高于MDCAB、MDCAB+MgO组(P<O.01),MOCAB、MDCAB+MgO组明显高于HDCAB.HDCAB+MgO组(P<0.01)。试验二(精饲料中不同过瘤胃蛋白水平对产奶牛生产性能和血液指标的影响):本试验选用6头泌乳中期的3~5胎经产中国荷斯坦奶牛,分为3组,每组2头,采用3×3重复拉丁方设计,饲喂精料IiUP(%DM)分别为7.1(LRUP)、9.1()dRUP)、H.2(HRUP),而蛋白和能量基本一致的3种日粮,研究其对奶牛生产性能和部分血液指标的影响。结果表明:(1)饲喂LRUP和HRUP日粮的奶牛乳脂率显著高于饲喂MRUP的日粮(P<O.05);(2)饲喂HRUP的日粮的奶牛乳蛋白明显高于饲喂LRUP、MRUP曰粮的奶牛(P<O.05):(3)非脂固形物各组相比没有明显差异(P>O.05);(4)饲喂MRUP、HRUP日粮的奶牛产奶量(kg/d)显著高于饲喂LRUP目粮的奶牛(P<O.05);(5)乳蛋白总量各组相比差异均显著(P<O,05),随着RUP含量的增加而增加:(6)饲喂MRUP、HRUP日粮的奶牛平均日4%标准乳产量显著高于饲喂LRUP日粮;(7)饲喂LRUP、HRUP日粮的奶牛血清尿素氮显著高于饲喂MRUP日粮的奶牛(P(O.05);(8)饲喂精料MRUP日粮的cP消化率显著高于其他两种日粮(P<0.01)。关键词:干奶牛;阴离子盐;镁;过瘤胃蛋白;生产性能;血液指标EffectsofRUPandAnionSaltsinRationOOMilkPerformanceandBloodParametersofDairyCowAuthor:LiuRuinaMajor:AnimalNutritionAdviser:ProfessorandFeedScienceLijianguoAbstractTwoexperimentswere,conductedtostudytheeffectsofRUPandAnionSaltsmDairyRationThefimtOnMilkPerformanceandBloodParametersofLactatingCowandDryCow.cation—anionbalanceandmagnesiumintakeofthedryweeksprecalving,wererandomlyallocatedtOwereallocatedrandoinlytotreatmentonexperiment(DietaryCOW)ThirtymultiparousHolsteinCOWS,3sixdietarytreatmentsf5cows/treatment).Cowsthebasisageandbodyweight.Thedietarytreatments:1.LDCAB(IowDCAB),:thetreatment1,thebasicdietarywithanionsalt,DCABvalueis一125mEq/KgDM;2.LDCAB+MgO(10wDCABDCABvalueisstill一125basicdietarywithanionsalt,DCABvalueDCABandandMgO),supplementedMgObaseOilmEq/KgDM;3.MDCAB(moderateDCAB),theis一75baseonmEq/KgDM;4.MDCAB+MgO(moderatetreatment3,theDCABvalueisstill一75DCABvaluebaseisonMgO),supplementedDCABMgOmEq/KgDM;5.HDCAB(highDCAB),theandbasicdietary72mEq/KgDM;6.HDCAB+MgO(highMgO),supplementedMgOmilkproteinwerenOtreatment5,theDCABvalueisstill72mEq/KgDM.Thestudyshownthat(1)During2-11weeksofpostcalvingthemilkproduction,milkfatandsignificantdifiefence(P>0.05),buttreatmentMDCAB+MgOmilkhigherthanproduction(1929.90土245.03kg)wasLDCAB,LDCAB+MgO,MDCAB,HDCAB.HDCAB+MgO;(2)TheDMIofLDCABandLDCAB+MgOdramaticdecreaseno(P<0.01)thantheothers;(3)During3weeksprecalvingurinarypHweredifference(P<0.05)inthesamesignificantDCABleveI.buturinarypHweredecreasedwithdecreasingofDCAB,urinarypHofHDCAB、HDCAB+MgOwerehigherthanothers,respectivelywere8.36±0.16,8.25±0.22,urinarypHofLDCAB,LDCAB+MgO,MDCAB,MDCAB+MgOrespectivelywere7.17±0.24,7.24±0.17,7.53±0.35,7.69±0.22:(4)DuringprecalvingLDCAB、LDCAB+MgOplasmaC1weresignificantlyhigher(P<0.01)thanHDCAB、HDCAB+MgO,MDCAB,MDCAB+MgOweresignificantnodifference(P>O.05)withothertreatments.buttheirconcentrationofplasmaClwereinLDCAB,LDCAB+MgOandHDCAB、HDCAB+MgO,DuringpostcalvingLDCAB、LDCAB+MgOplasmaC1weresignificantlyhigher(P<0.05)thanHDCAB、HDCAB+MgO,plasmaCIofMDCAB,MDCAB+MgOwereinmidstofLDCAB,midstofLDCAB+MgOandHDCAB、HDCAB+MgO;(5)DuringprecalvingLDCAB+MgOandMDCAB+MgOweresignificantlyhigher(P<O.05)thanHDCABinplasmamagnesium,plasmamagnesiumoftreatmentswithmagnesiumisslightlyhigherthanthatoftreatmentswithoutmagnesium,DuringpostcalvingofplasmamagnesiumLDCAB+MgOissignificantlyhigher(P<O.01)thanpostcalvingalltreatmentswereandNa.DuringnothatofHDCAB;(6)DuringprecalvingandintheconcentrationofplasmaKsignificantdifferencepostcalvingHDCAB(P<O.01)、HDCAB+MgO(P<0.05)wereconcentrationofplasmaK.intheconcentrationLDCAB、LDCAB+MgOwerenosignificantdifference(P>O.05)significantlyhigher(P<O.01)thanothertreatmentsintheofplasmaNa,butplasmaNaofLDCABissignificantlylower(P<0.01)thanthatofotherNaoftreatments,plasmaLDCAB+MgOissignificantlylowerthanthatofnoMDCAB+MgO(P<O.05)andotherthreetreatments(P<0.01):(7)Thereweresignificantdifference(P>0.05)intheconcentrationofplasmaprecalvingandpostcalving;(8)TherewerenoPofalltreatmentsduringsignificantdifference(P>0.05)intheconcentrationofplasmaCa2+ofailtreatmentsduringprecalving.plasmaCa2+ofHDCABissignificantlylowerthanthatofothertreatments,plasmaCa2+ofHDCAB+MgOissignificantlyconcentrationlowerthanthatofMDCAB+MgO(P<O.01)andotherthreetreatments(P<0.05)duringpostcalving;(9)Therewerenosignificantdifference(P>0.05)intheofplasmaOH(hydroxy)一prolineofalltreatmentsduringprecalving.plasmaOH-prolineofHDCABandHDCAB+MgOwassignificantlylower(P<0.01)thanthatofothertreatments,andplasmaOH。prolineofLDCAB+MgOwassignificantlyhigher(P<O.05)thanthatofMDCABDuringpostcalving;(10、DuringprecalvingandwerepostcalvingtheconcentrationofplasmaPTHofHDCABandHDCAB+MgOsignificantlythanthatoflower(P<0.01)thantheothertreatments,thedifferentvalueofprecalvingandpostcalvingofPTH,LDCABandLDCAB+MgOweresignificantlyhigher(P<0.01)MDCAB、MDCAB+MgO,MDCABtowoffiveinandMDCAB+MgOweresignificantlyhigher(P<0.01)thanthatofHDCABandHDCAB+MgODuringpostcalving;(11)RetainedplacentawasfoundtreatmentS.ThesecondHDCABandoneoffiveinHDCAB+MgO.UdderoedemawasfoundallofCOWSHDCABandHDCAB+MgO,wasnotfoundintheotherexperiment(theHolsteineffectofdifferentRUPofdietaryCOWSonmilkproductionandfeedingdifferentBUN):Sixlactatinginstudyingtheeffectsofrumen—undegradableNwereusedinaprotein(RUP)onmilkproduction,milkcompositionandbloodurinereplicated3x3Latinsquare.the3dietarieswereinthesamelevel.buttheLLRUPCP(%)andenergy(MS/kg)ofcalculatedRUP(%)ofdiets(onadrymatter(DM)basis)were7.1%,2.MRUP9.1%.3.HRUPll.2%.Thestudyshownthat,(1)MilkfatpercentofLRUP(3.51±0.086)andHRUPr3.57±0.0761significantlyhigher(P<0.05)thanthatofMRUPO.40+0.083);(2)Milkproteintreatments;(4)Dayinmilk(DIM)ofMRUP、HRUPnopercentofHRUPsignificantlyhigher(P<0.05)thanLRUP、MRUP;(3)NSFCweren0significantdifference(P<0.05)in3significantlyhigh(P<0.05),DIMofMRUPandHRUPweresignificantdifference(P>O.05):(5)Milkproteinyieldof3treatmentswerenosignificantdifference(P>O.05),Milkproteinyield(g)wereincreasedwiththeincreasedRUP,MilkproteinyieldofLRUBMRUPandHRUPrespectivelywere293.57±4.45、307.67±6.78、321.77-613.14;(6)FatcorrectedmilkproductionofMRUP(18.52kg)、HRUP(18.76kg)weresignificantlyhigller(P<0.05)thanthatofLRUP(18.Ol±0.41kg);(7)Concentration(mmol/L)ofbloodtlreaN(BUN)ofLRUP(5.62±0.90)andHRUP(5.45±0.83)weresignificantlyhigher(P<0.05)thanthatsignificantlyhigher(P<O.05)thanthatofMRUP’(4.22±1.20);(8)DigestibilityofcP(%)ofMRUP(0.80ofLRUP(0.73--+0.05)andHRUP(0.74±O.06)were±0.04).keywords:drycow;anionsalts;magnesium;RUP;milkperformance;bloodParameters独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得塑j堡垒些盘鲎或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名;砂慨签字目期:≯剜7年∥月吖目学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解塑i垦壅些蕉兰有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权塑I垦垒些盘鲎可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名:玉l暂知竹导师签名抛,翰签字目期:≯砖年刍月玛目签字目期:≯以年27月)、日学位论文作者毕业后去向工作单位:电话:通讯地址:邮编:日粮瘤胃非降解蛋白和阴离子盐对奶牛生产性能和血液指标的影响1引言奶牛围产期Ⅲ(奶牛产前3周和产后2周,产前3周为围产前期,产后2周为围产后期)的饲养、管理一直受到反刍动物营养专家的广泛关注。奶牛在围产期的健康状况与奶牛的泌乳、繁殖有着重要的联系。原因在于这段时间内妊娠结束、分娩、泌乳开始,极易出现低血钙,一方面分娩时产道收缩需要大量的钙,另一方面泌乳开始,大量的钙随初乳排出,Block(1984)报道,l头产IOL(Ca2.39/L)初乳的奶牛,ld泌乳就会损失239Ca,这相当于l头牛血钙储备的9倍o’3’…。如果此时奶牛从肠道吸收的钙和从骨骼动用的钙还是不能弥补血钙损失就出现低血钙“3。低血钙影响了肌肉神经的正常功能,严重的低血钙使患牛无法站立,出现产后瘫痪。产后瘫痪的病例不多,但分娩后多数的奶牛都出现亚临床低血钙(血钙浓度低于75mg/L“。1),有研究表明,每年三分之二的经产母牛和一半以上的成年母牛会患有不同程度的亚急性低血钙““1.亚急性低血钙还会继发酮病、代偿性碱中毒、胎衣滞留,乳房炎和真胃移位等疾病”1从而影响到泌乳产量和繁殖性能的下降m,。造成围产期奶牛低血钙的第二个常见因素就是低血镁,如果镁的摄入量太低(血镁的浓度低于0.85mmol/L)容易发生产褥热。’”’“’”3。原因是镁的缺乏可能会抑制甲状旁腺素(PTH)的作用,维生素D。在肝脏中转化成25-(OH)一D。的能力下降“-”1,从而降低肠道钙的吸收和骨钙的动员。动物体内钙镁调控是动态平衡的过程。牛通过肠道吸收钙,吸收率随钙的需要量而改变,当摄入的钙超过需要量时钙的吸收率下降“4’”1。钙的摄入下降刺激PTH的分泌,PTH能促进肾脏对钙的重吸收“”和1,25—2羟维生素D在肾脏的合成,维生素D。能促进小肠细胞钙结合蛋白的合成。体内PTH和1,25—2羟维生素D的增加促进了骨钙的重吸收和肠钙的吸收“4‘”1。PTH的活动被降钙素拮抗,当体内钙充足时,降钙素促进骨钙的贮存,降钙素通过降低骨钙的重吸收降低钙在血浆中的浓度“…。妊娠后期和泌乳初期钙的沉积和重吸收的动态平衡中有大约1/5的钙来自于骨骼“…。镁的平衡由肠吸收和肾排泄调控,与钙的调控相比镁的调控没有关键的激素,骨对镁的代谢反应非常迟钝。低血镁的调控主要依靠日粮中镁的添加““。根据以上的机理,研究人员不断探索着防止低血钙的新方法。从70年代以前研究人员把低钙日粮应用到围产前期奶牛日粮中。“来预防产褥热的发生,但是预防效果不明显。随着研究的不断深入,研究人员提出了日粮阴阳离子平衡(dietarYcation—anionbalance,DCAB)这一概念,Dishingto(1975)在奶牛上首先提出““。DCAB定义为每千克干物质中(Na+K)一(Cl+S)的毫当量(mEq)。定义DCAB曾用过许多公式如:(0.38Ca+0.3~tg+Na+K)一(Cl+O.6S)的毫当量。1,(Na+K)一(Cl+S+P)t23J(Na+K)--el”4。4…。而在干奶期计算DCAB一般使用(Na十K)一(Cl+S),这个公式计算的DCAB值和奶牛产褥热的发生率有很大的相关性…1。DCAB的具体计算方法:[(Na%/O.0023)+(K%/O.0039)]~[(C1%/O.00355)十(S%/0.0016)]mEq/KgDM‘27-22・”-”】。河北农业大学硕士学位论文日粮中Na,K等阳离子是碱性的,而cl,s等阴离子是酸性的。当饲料中加入阴离子盐时,DCAB值降低,血的H+浓度增加,pH值下降,HC03浓度降低。尿的pH值和尿中HCO,-’浓度降低”“。许多研究认为阴离子盐诱导轻度(代偿性)酸中毒有利于围产期肠钙的吸收和骨钙的重吸收,其中的机理还无定论,多数研究者认为长期的代谢酸中毒可以增加尿液中钙排泄。6‘”1,造成钙在体内的的存留时间缩短,通过反馈调节引起l,25一(OH):一战和PTH的增加;另外有研究认为酸性体液诱导PTH受体和G一刺激蛋白复合体构象的变化来改变靶组织对PTH的敏感性。3’“3;也有研究者注意到,在于奶牛日粮中添加阴离子盐,奶牛血液中l,25一(oH)。一D,的水平增加而PTH不会增加o‘”’”’…。而理论上是PTH调控1,25一(oH):-D。的合成。Phillippo等(1994)推测可能是酸性的日粮提高了l,25一(0H)。D,合成酶的活性。”:另一个推测也认为妊娠后期降低DCAB影响了a一羟基化酶的反应性,该酶参与1,25一(OH)。一D。的合成。调节DCAB常用的阴离子盐有N也CI,(N心):S瓯,MgCl。,MgSO。还有CaCl:和CaSO,,大多数研究者没有发现这些盐在预防产褥热上有优劣之分。添加阴离子盐时一般不使用磷酸盐,因为血中磷酸盐的浓度升高时会抑制肾中1,25一(OH)。一D。的合成“1,从而引起产褥热。…。安全有效的DCAB能使血液的酸碱状态稍有改变,奶牛发生轻度的酸中毒,能够影响钙的代谢,使血钙保持稳定的水平,可以通过检测尿的pH来判断日粮阴离子是否起到了作用。Jordon(1995)认为尿的硝为6~7时…1,日粮中的阴离子盐能够使血液的pH下降并能防止产褥热的发生。当尿的pH低于5.5~6时,说明阴离子盐添加可能过多”’…,但也有研究表明DCAB值和尿的pH并没有显著的相关性。一般认为能够降低血液pH且有效预防产褥热豹DCAB为一loO~一150mEq/KgDM(通常干奶牛饲料DCAB为+50~+300mEq/KgDM)“’,Oetzel等(1991)推荐的阴离子盐添加的安全范围应是每天每头牛不能高于2Eqo“。Tucker等(1992),Oetzel等(1993),认为有效预防产褥的目粮DCAB值是一30~-150mEq/KgDM…+”】,West等(1993)。推荐一150mEq/KgDM””,Byers等(1994)推荐一200mEq/KgDMo…。在前人研究的基础上,试验一在荷斯坦牛围产前期日粮中添加阴离子盐和镁,一方面,阴离子盐能降低血液pH,从而促进产后奶牛骨钙的重吸收,增加血液钙离子浓度:另一方面,镁的采食量增加,提高血镁的含量,防止因低血镁、低血钙造成的产褥热或其他一些产后疾病。通过本试验,找到最适的DCAB的水平,从而提高奶牛生产性能。同时为华北奶区研制适宜的阴离子日粮提供可靠的实践经验。随着我国居民对反刍动物畜产品的需求日益增加,特别是城市居民对牛奶的需求迅猛增加.反刍动物研究者和畜牧业生产者面临着提高动物生产能力、改善畜产品品质和降低生产成本等任务。目前,蛋白质饲料资源紧缺,价格较高,而畜牧业对环境的影响越来越受到人们的关注,动物氮代谢的平衡成为问题的关键,所以反刍动物蛋白质和氨基酸的营养成为研究的热点。反刍动物的消化系统不论是在解剖结构还是在消化生理特性上都不同于单胃动物。反刍动物能够消化利用低质的粗饲料,但对含氮物质的利用率很低,日粮中部分蛋白质未转化成人们所需的蛋白质产品。由此,研究饲料蛋白质和氨基酸在反刍动物日粮瘤胃非降解蛋白和阴离子盐对奶牛生产性能和血液指标的影响体内的消化、吸收、代谢和利用是解决上述问题的前提。在此基础上-对反刍动物氨基酸的需要量的确定、平衡及营养调控才有可能实现。粗蛋白(CP)日粮体系与可消化蛋白质体系在反刍动物营养中沿用多年,很难确切的表示反刍动物对蛋白质的需要量。1977年英国的Roy等首先提出了新的反刍动物蛋白质体系,随后,各国纷纷提出了自己的反刍动物蛋白质新体系“”。各个新体系虽名称不周,但基本观点都是把饲料蛋白质分成瘤胃可降解蛋白(RDP)和过瘤胃蛋白质(RUP)两部分,RDP和RUP是饲料cP中两个功能截然不同的组分。饲料中RDP为微生物的生长和微生物蛋白质(McP)的合成提供了所需的肽、游离氨基酸和氨。瘤胃合成的微生物蛋白质为小肠提供了绝大部分氨基酸,RUP是小肠氨基酸的第二重要来源…3。国外有研究表明,奶牛日粮中RDP营养只能满足奶牛对蛋白质营养需要的60%,RUP提供40%“”。科学合理的饲料配方应该有适合的RDP,RUP豹比侧,既能满足瘤胃微生物降解的需要又能使宿主得到充足的小肠氨基酸…。由于在能量一定、氮源充足的情况下,微生物蛋白产量相对稳定,所以解决此矛盾的关键是增加RUP的数量。提高RUP的途径有:①提高日粮蛋白质水平。但是蛋白质价格高,从经济的角度讲增加了饲养成本。②选择蛋白质降解率低的饲料,如脱水苜蓿、玉米蛋白粉和干啤酒糟等。除玉米蛋白粉外,其他原料生产量小且供给不稳定。③采取保护措施,使蛋白质免受微生物降解。影响饲料蛋白质瘤胃降解率的因素:①蛋白质分子结构:蛋白质的结构特性构成降解的阻力。如蛋白质分子中的二硫键有助于稳定其三级结构,从而增加抗降解力。②蛋白质可溶性:与不可溶性蛋白质相比,可溶性蛋白质更易于在瘤胃降解。McDonald(1952,1957)证实,玉米蛋白可溶性比酪蛋白差,在瘤胃中。大约95%酪蛋白被微生物降解,而玉米蛋白则为50%。③在瘤胃的停留时间:饲料在瘤胃内停留时间短,可溶性和非可溶性蛋白均分解少,反之则多。④饲料成分:植物性蛋白质补充料所含的半纤维素可防止蛋白质降解。⑤瘤胃氨浓度:Wallac(1979)报道,瘤胃内氨浓度与谷蛋白的降解率呈正相关,这可能是由于低氮的底物中细菌数量减少所致。⑥游离脂肪酸:Kovalczy等(1976)报道,游离脂肪酸能够降低蛋白质的水解作用,从而对蛋白质的瘤胃降解率产生影响。⑦饲料的加工与储存:饲料的各种物理和化学处理均可以改变蛋白质在瘤胃的降解率,如加热、甲醛处理和包被等。合适的饲料原料和适宜的保护方法既可咀降低蛋白质的降解率,增加过瘤胃蛋白的数量,又不影响或很少影响瘤胃内的消化,从而改善氮的利用,增加氮的沉积,节约蛋白和能量,提高生产力,提高饲料利用效率“…。试验二选用玉米蛋白粉和甲醛保护豆粕来提高饲料RUP含量,并结合地区饲料资源的特点及奶牛生产水平的现状,设计并实旆了奶牛非降解蛋白日粮应用试验研究,以提高我省奶牛生产水平和经济效益。河北农业大学硕士学位论文2材料和方法2.1干奶牛日粮添加阴离子盐、镁对奶牛产奶性能及血液指标的影响2.1.1试验安排及试验动物本试验于2004年2月15日--5月21日在保定南市区建寅奶牛养殖基地进行。试验选择体重相近、3~5胎、预产期相同或相近,处于产前3周的健康中国荷斯坦牛30头。2.1.2试验材料氧化镁(MgO)、硫酸铵((Nil。)。SO。)、氯化铵(NH。C1)产地:天津市天大化工试验厂。2.1.3试验设计本试验采用二裂式裂区试验设计(见表1)。裹1试验设计TablelDesignofanionsaltsrationexperimentindrycow裂二裂来掭加“gO(O.19%。)LDCAB(一125mEq/KgDM’)添加MgO(0.40%--)未添加MgO(019%)MDCAB(一75mEq/KgDM)添,OnMgo(o.40%)未添加MgO(0.19%)111)CAB(+72mEq/KgDM)添JJLIMgO(O.40%)注:}表示每千克干物质中(Na+K)一(cl+s)的毫当量(nEq/KgDM),村表示未添加Mgo日粮中的jjg含量为019%.÷}壕示添加M90日榱中峙含量为O40%如上表,共产生6个处理:1.LDCAB(低DCAB):基础日粮中加入阴离子盐调整DCAB值为一125mEq/KgDM;2.LDCAB+MgO(低DCAB+MgO):在l的基础上添加氧化镁,DCAB值为一125mEq/KgDM;3.MDCAB(中DCAl3):基础日粮中加入阴离子盐调整DCAB值为一75mEq/KgD~l;4.MDCAB+MgO(中DCAB+~IgO):在3的基础上添加氧化镁,DCAB值为一75mEq/KgDM;5.HDCAB(高DCAB):基础日粮DCAB值为+72mEq/KgDM;6.HDCAB+MgO(高DCAB+MgO):在5的基础上添加氧化镁,DCAB值为+72mEq/KgDM。d旦垫堕垦韭堕壁至鱼塑塑堂王苎型塑生生主丝壁塑些堕塑堡塑堂堕将30头奶牛随机分成6组,每组5头,分别饲喂以上6种不同处理的日粮a2。1.4饲养管理及日粮组成一一.千奶牛采食精料和粗料(青贮玉米秸),精料、粗料每次投喂尽可能让奶牛采食完。将阴离子盐和镁均匀混合于饲料中。每周2天测定全天采食量,精料组成及精粗料离子含量见表2。预产期前21d开始饲喂直至分娩,饲喂时间是每天的6:00,12:00,19:00。试验期间注意观察奶牛的采食情况、精神状态和健康情况。表2干奶牛日粮精料组成及精、粗料离子含量Table2Compositionsandcation,anioncortlcrltsindrycowration2.1.5样品采集①奶样的采集:测定产后2~ll周的产奶量和乳成分。产后第二周试验牛进入机械化挤奶厅挤奶,每天挤奶3次,分别为7:oo,14:00,2l:00。每天记录产奶量。收集乳样时按早、中、晚挤奶量的比例共收集60mL,把一天的乳样混合均匀4℃冷藏,用于乳脂、乳蛋白的测定,每周连续测定2d。②血样的采集:在产前第14d(试验开始后一周),产前的第7d(试验开始后两周)和产后第ld,3d各采血1次。采血时间为每天的下午1:30。由尾静脉采血18mL放入3个离心管中,3000rpm离心20mill,取上层血清待测。③饲料的采集:产前3周每周2次采集饲料样,并测定采食量(投喂量一剩余量),用以测定饲料干物质采食量。④尿样的采集:产前3周和产后1周每周连续2d收集尿样,在中午迸食后的2~4h收集。收集的尿样要立即测定其pH。塑!!奎些查堂堡主兰堡笙苎—————_-___——-_-__-__-_——————_——————_-__________l_-_--—-___’———————一一2,1.6测定指标。.——测定产后2~ll周乳产量、乳成分(乳脂、乳蛋白)、干物质采食量、尿pH及血清中氯、镁、钾、钠、磷、钙、羟脯氨酸、甲状旁腺素的含量。2.1.7测定方法(1)乳脂、乳蛋白:采用浙江大学食品研究所生产的MILKWAY快速乳成分测定仪。(2)干物质采食量:饲料样品65。C烘干48h,计算干物质采食量。(3)尿pH:采用杭州东星仪器设备厂生产的PHB型便携式酸度剂,现采集现测定。(4)氯离子:采用北京北化康泰临床试剂有限公司生产的试剂盒进行测定。测定原理:样品中的氯离子,与试剂中的硫氰酸汞反应生成可溶而不解离的氯化汞及硫氰酸根离子,该离子与试剂中铁离子结合生成橙红色的硫氰酸铁,其色泽深浅与氯的含量成正比。2C1一+Hg(SCN)z--HgClz+2SCN一3SCN+Fe”一Fe(SCN2+),(5)镁离子的测定:采用北京北化康泰临床试剂有限公司生产的试剂盒进行测定。测定原理:血清中镁与钙离子在碱性溶液中能与甲基麝香草酚兰(MTB)结合生成蓝紫色络合物,在试剂中加入适量的EGTA,它与钙的亲和力强,使钙与EGTA结合而不能与MTB结合产生蓝紫而消除了钙的干扰,在镁标准液中加入一定量的钙消除了标准中EGTA对镁的干扰,从而镁与MTB形成的颜色与标准比较在600nm下测吸光度值,计算出样品中镁的含量。计算公式:血清镁含量(mNOl/L)=岽鬻×标准管浓度(0.823mmol/L)血清钾的浓鼠…啪=蒜筹善罢蓑×标准浓度(5mmoI/L)(6)钾离子的测定:采用北京北化康泰临床试剂有限公司生产的试剂盒进行测定。测定原理:四苯硼酸钠与血清中钾离子作用生成乳白色浊度液,在去干扰剂的作用下不用除蛋白,直接测定,其吸光度值与钾浓度成正比。计算公式:(7)钠离子的测定:采用北京北化康泰临床试剂有限公司生产的试剂盒进行测定。测定原理:钠离子与六氢氧化锑钾在加速剂作用下,形成沉淀颗粒,加入一种试剂使之形成乳浊液,在620hm波长下测其吸光度,其吸光度值与钠离子浓度成正比。计算公式:㈣(mmol几)=燃x标准浓度(14。mmol/L)日粮瘤胃非降解蛋白和阴离子盐对奶牛生产性能和血液指标的影响(8)磷离子的测定:采用保定长城临床试剂有限公司生产的试剂盒进行测定。测定原理:标本中的无机磷与钼酸(H2MoO。)反应生成的H3(POtMo-z0。e)以钼酸聚合物与磷酸之间形成内缩合物。此产物在340nm波长有最大吸收,其吸收强度与血清中无机磷含量成正比,在通过与同样处理的标准比较经计算可求出血清无机磷的含量。计算公式:血清中磷含量(mm。VL)=景器×标准浓度(1.29mmol/L)(9)钙离子的测定:采用北京北化康泰临床试剂有限公司生产的试剂盒进行测定。测定原理:甲基兰在碱性溶液中与钙螫和形成一种蓝色复合物,此蓝色复合物的颜色与钙的含量成正比。在610nm波长下,分别测定标准管和样品管的吸光度值计算钙的含量。计算公式:血清钙含量mm。VL)=燃×标准管浓度Q.50mmot/L)(10)羟脯氨酸的测定:采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒进行测定。测定原理:羟脯氨酸在氧化剂的作用下所产生的氧化物与二甲氨基苯甲醛作用呈紫红色,根据其成色的深浅可推算出其含量。羟脯氨酸含量一岽薏善器粪篆三薹燃×塑塑堡塑童L鱼鼍笔亳≥型幽训‘算公式:(11)甲状旁腺素(PTH):采用放射性免疫分析法(RIA)由保定河北省职工医学院附属医院测定。注:({)~(10)仪器均采用上海光谱仪器有限公司生产的SP--2102UV(756)型紫外可见分光光度计.2.2精饲料中不同过瘤胃蛋白水平对泌乳早期奶牛生产性能的影响2.2.1试验安排及试验动物本试验于2004年9月17日~2004年1月13日在石家庄北高牛场进行。精选经产的泌乳60d±lOd荷斯坦牛6头。产奶量、乳脂率、乳蛋白差异不显著。2.2.2试验材料粗蛋白为50%玉米蛋白粉,36%甲醛,0.69/lOOg饲料蛋白处理的豆粕等饲料原料。河北农业大学硕士学位论文2.2.3试验设计本试验采用3×3拉丁方设计(表3)。6头泌乳奶牛每组2头,分成3组。分别饲喂不同RUP水平的3种日粮。过瘤胃蛋白水平分别为7.1%(LRUP),9.1%(MRUP),11.2%(HRUP),而能量和粗蛋白水平基本一致。试验分三个阶段,预试期各为7d,饲料逐渐过渡为试验日粮,正试期各为期30d,正试期的最后一周为采样期。表3试验设计方案.T.a.b..1e..3...D..e.s.i.g.n..o.f..R..U..P..d..ia。.r.y..ra..ti.o..n..e.x.p..e.r.i.m..e—nt牛号1l,23,4LRUPMRUP试验阶段+2MRUPHRUP3HRUPLRUP——_三,_L一一型!型!!竺+:试验阶段I指9月25同~10月30日:试验阶段2指11月i日~12月7日;试鞋阶段3指12月8日~1月13日.挤奶时间7:00,13:00.20:002.2.4曰粮组成及饲养管理结合当地养牛生产的实际水平并参考NRC第7次修定版推荐的奶牛营养需要,设计3种试验日粮。每头牛精、粗饲料供给量一致(精料12kg,粗料25kg),每次全部采食完。试验日粮组成及营养水平见表4。2.2.5样品的收集、处理及分析测试①奶样的收集:整个试验期记录每天产奶量,用其平均值作为该阶段的日产奶量,换算成4%的标准乳(FCM)。每个试验期的最后4d按早、中、晚产奶量的比例共收集60ml乳样(集奶容器预先灭菌、烘干),混合均匀4℃冷藏,用于乳成分的测定(乳蛋白、乳脂率)。②饲料样的收集:正式期开始前收集3种试验日粮精饲料和粗饲料各5009,密封、一20℃保存。饲料样品在65'c干燥48h后,冷却至室温,再磨碎过40目筛,待测。分析项目包括酸不溶灰分及干物质(DM)、粗蛋白(cP)、粗纤维(cF)、粗脂肪(EE)。③粪样的采集:试验期的最后2d早、中、晚采用直肠采粪,把收集到的每头牛的粪便混匀,按总量的1/lO取样,并加入lO%硫酸用以中和粪中氨氮,一20oeL呆存以备测定。粪样,在70℃烘干,磨碎、全部过40目筛,贮存于磨口广口瓶中,供测旦矍壅旦j!堕坚里鱼塑堕壅王苎翌塑±圭主丝堂塑垒婆塑堡塑墅堕.④血样的采集:每个试验期的最后2d颈静脉采血,采血时间15:00,每头牛采血20mL,分装到2支试管内,3000rpm离心得血清,一20℃保存,用于血清尿素氮。表4辅料组分及营养水平Table4IngredientsandmajornutrientCOntentsofdairyrations千物质含量(%)85.L糨蛋白(%)19585.31970.920.520.839.17.283.785.L20.00920.530.83钙(%)0.94总磷(%)0.53营养指标食盐(%)0.83过癯胃蛋白(%)产奶净能(MJ・K91)7.L7.37H.27.193.73.8粗纤维(%)4租脂肪(%)相灰分(%)3.66.43.86.2L26.36.312.26.6中性洗涤纤维(%)酸性洗涤纤维(%)10.85.8_____-____-___一●___________________-___●_____________--___●_____-●-____________-●__-______H_________一注:为增加RUP含量I^ltl)p.H]}UP大豆粕甲醛处理(o69/IOOgCp)2.2.6检测方法与用品①cP测定采用凯氏微量定氮法“”测定原理:各种饲料的有机物质在还原性催化剂(如CuS04,K2S04,NaSO。或Se粉)的帮助下,用浓H2S04进行消化作用,使蛋白质和其它有机态氮(在一定处理下也包括9河北农业大学硕士学位论文硝酸态氮)都转化成NH4+并与浓H2S04化合成为较稳定的(NH4)2S04,而非含氮物质则以C02t,H20t,S02t状态逸出。消化液在浓碱的作用下进行蒸馏,释放出的铵态氮,用饱和硼酸溶液来吸收,然后以甲基红溴甲酚绿作为指示剂,并用O.05M的HCI标准溶液滴定。求出氮的含量,根据不同性质的饲料再乘以一定的系数(通常用6.25计算),即为粗蛋白质的含量。其主要化学反应如下:2NH2(CH2)2COOH+13H2S04—-(NH&S04+6c02t+12s02t+16H20t(NH4)2S04+2NaOH—・2NH3t+3H20t+2N82S0441-13803+NH3一NH4HB407+5H20tNH4HB407-1-HCI+H20—NH4CI+4H3804仪器和试剂:凯氏烧瓶、凯氏定氮消化装置、微量定氮蒸馏装置、微量滴定管、容量瓶、三角烧瓶、量筒、分析天平;无水NaS04,CuS04,浓H2S04,饱和NaOH溶液,饱和硼酸溶液,0.05M的HCI标准液,0.2%甲基红指示剂。方法步骤:样品处理一称取样品一消化一蒸馏一滴定计算:粗蛋白(%)=(CxVx0.0140x6.25x100),wV——滴定时盐酸标准液的用量(mL)C一盐酸标准液的当量浓度(mol/L)w——样品的重量(g)②EE的测定采用索氏浸提法“”测定原理:脂肪不溶于水,而溶于乙醚、石油醚、苯、四氯化碳等有机溶剂中,利用这些溶剂的其中之一,多次浸提经粉碎的饲料样品,可以将饲料中的脂肪全部浸提出来。将所有被浸提出来留在接受瓶的粗脂肪进行烘干,使溶剂和水分蒸发,然后直接称量粗脂肪的重量。仪器和试剂:索氏抽脂器、恒温水浴锅、干燥器、坩蜗钳、长柄镊子、滤纸、恒温干燥箱、分析天平;无水乙醚。方法步骤:样品处理一称取样品一浸提一烘干一称重计算公式粗脂肪(%):!垒=星!!!Q1A——脂肪接收瓶及脂肪重(g)B——脂肪接收瓶重(g)w——风干样品重(窟)③cF测定采用酸一碱消化法“”测定原理:纤维素是植物细胞壁的组成成分,它常与半纤维护素、果胶物质、本质素、角10日粮瘤胃非降解蛋白和阴离子盐对奶牛生产性能和血液指标的影响质组织和木栓组织同时存在于植物组织中,这些物质对各种化学试剂都很稳定,因此,很难把它从纤维素中完全分开。常用一定浓度的硫酸和一定浓度的氢氧化钠溶液处理,以除去其中的蛋白质、脂肪、可溶性碳水化合物,而遗留下来的物质主要是纤维护素。因为其中含有其它物质,所以常用“粗纤维”代表它的含量。仪器和试剂:电炉、干燥器、洗瓶、称量瓶、古氏坩埚、吉氏漏斗、坩埚钳、烧杯、真空泵、恒温干燥箱、分析天平;5%H:SO。,5%NaOH,95%乙醚,酸洗石棉。方法步骤:样品处理一称取样品一酸处理一抽滤一碱处理一抽滤一烘干一称重计算公式:粗纤维(%):驾堂攀。100秆品亘④酸不溶灰分采用4N-HCl测定法“5。463测定原理:饲料中均含有一定量不溶于浓HCl的硅酸盐类,因这些不溶灰分既均匀分布于饲料中又不能被家畜消化,而且饲料中的不溶灰分与饲料具有一定的比例关系。当饲料转化成粪便时,原有的不溶灰分亦按新的比例均匀的分布在粪便中。利用饲料和粪便中干物质与不溶灰分两种比例的变化,即可推算出采食量或排粪量。计算公式:术甚星一—葡骑砸丽勃弓厂仪器和试剂:500mL高脚烧杯、4N—HCl、电热板、表面皿、定量滤纸、坩埚(30~50mL)、高温电炉。@BUN采用保定长城临床试剂公司试剂盒测定。OPA比色法。测定原理:在酸性环境中,尿素在催化剂的作用下,可与显色原在37。C反应,生成蓝色化合物,其颜色深浅与尿素氮的含量成正比。计算公式:皿备县一排粪量×粪中酸不溶灰分尿素氮含量血m。UL)=蒙羞i;:骂罐×标准管浓窳7.14mmol/L)仪器:上海光谱仪器有限公司生产的SP一2102UV型紫外可见分光光度计、电热恒温水浴锅。2.3数据分析应用Excel2000,SPSS软件进行数据分析,差异显著时用LSD检验法进行各组间的多重比较,试验数据用平均值±标准差表示。河北农业大学硕士学位论文3试验结果3.i干奶牛添加阴离子盐和镁对奶牛生产性能及血液指标的影响3.1.1不同处理日粮对奶牛生产性能的影晌表5不同处理日粮对奶牛乳成分(产后2~11周)及尿pH(国产前期)Table5Effectofdifferenttreatmentsofdietaryonmilkcompositions(postcalving2~11),DMIandLircapH(precalving)注:阿列肩标不同大写字Ii}表示差异极显著(P<OoI).不同小写字母表示差异显著(P(O.05)如表5所示,奶牛产后2~II周产奶量、乳成分(乳脂、乳蛋白)各组之间没有明显差异(P>O.05),但ttDCAB组产奶量平均值最低为1798.80±180.30kg,MDCAB+MgO组产奶量平均值最高为1929.90±245.03kg,比LDCAB,LDCAB+MgO,MDCAB,HDCAB,HDCAB+MgO分别提高了8.9%,6.2%,2.3%,7.3%,3%;LDCAB,LDCAB+IdgO组采食量分别为12.66±0.15,13.12±0.53kg极显著低于其他四组(P<O.01),MDCAB,MDCAB+MgO,HDCAB,HDCAB+MgO组的采食量分别为15.23±0.83kg,14.76±1.42kg,14.62±0.94kg,14.94±0.39kg;DCAB为一125的两组干物质采食量平均为12.89kg,DCAB为一75的两组干物质采食量平均为15.00,DCAB为+72的两组干物质采食量平均为14.78kg,DCAB为一125的两组干物质采食量与DCAB为-75的两组相比降低了16.37%。HDCAB,HDCAB+/d90组尿pH为8.36±0.16,8.25±0.22极显著高于其他组(P<O.01),LDCAB,LDCAB+MgO,IdDCAB,MI)CAB+~IgO组尿pH分别为7.17±0.24,7.24±0.17,7.53±0.35,7.694-0.22。MDCAB+MgO组和MDCAB组差异不显著(P>O.05),但IdDCAB+IⅥgO组与LDCAB+MgO,LBCAB组差异极显著(P<O.01),MDCAB组与LDcAB组差异显著(P<O.05),与LDCAB+MgO差异不显著(P>O.05);LDCAB与LDCAB+MgO差异不显著(P>O.05)。3.1.2不同处理的日粮对围产期奶牛血液离子水平的影晌不同处理日粮对奶牛血清氯、镁的影响见表6,围产前期(以下简称产前)LDCAB12日粮瘤胃非降解蛋白和阴离子盐对奶牛生产性能和血液指标的影响LDCAB+MgO组血清氯为104.0±3.8,104.0±2.8mmol/L极显著高于HDCAB组的99.0±1.6mmol/L,HDCAB+MgO组的99.2±2.2mmol/L(P<O.01),围产后期(以下简称产后)HDCAB,HDCAB+MgO组差异不显著(P>O.05)分别为98.6±1.3,97.8±1.6mmol/L,HDCAB+MgO组明显低于LDcAB组的102.0±3.3mmol/L,LDCAB+MgO组的101.6±1.8mmol/L(P<O.01),HDCAB组明显低于LDCAB,LDCAB+MgO组(P<O.05):产前LDCAB+MgO和MDCAB+MgO组血清镁分别为1.03±0.08,I.05±0.07mmol/L显著高于HDCAB组的0.92±0.07mmol/L(P<O.05),虽然其他组间没有显著差异(P>0.05),但是添加MgO的组均比未添加的组血清镁含量要高。产后HDCAB组为0.894-0.07注:同列无肩标表示差异不显著(P>O.05),不同大写字母表示差异极显著(P<O.01).不同小写字母表示差异显著(P(O~一mmol/L极显著(P<O.01)低于LDCAB+MgO组的1.05±0.06mmol/L。表6不同处理日粮对围产期奶牛血清氯和镁的影响oRTable6Effectofdifferenttreatmentsofdietaryplasmachlorineandmagnesium….组刑氯(产前)(retool/L)氯(产后)镁(产前)镁(产后)(mmol/L)(mmol/L)(mmol/L)LDCAB104.O±3.861040±2.881020±3.3“0.97±0.060.98±0.12LDCAB+MgO枷)cAB101.6±1.8“99.8±2.7l|03士0.08‘0.99±0.131.05±0.06‘0.97±0.09102.2±1.9MDcAB+MgOHDC^B102.2±2.499.O±1.6‘99.2±2.2‘100.6±0.9105±0.07‘098±0.0798.6--+1.3“0.92_4-0.07‘0.894-007eHDCAB+btgO97.8±1.6^1.00±0.070.96±0.07注:同列肩标不同大写字母表示差异扳显著(P<O01).不同小写字母表示差异显著(P<o.05)表7不同处理日粮对国产期奶牛血清钾钠的影响treatmentsofdietaryonTable7Effectofdiffereatplasmapotassiumandsodium~。殂另U钾(产前)钾(产后)钠(产前)钠(产后)(mmol/L)(mmol/L)(mmol/L)(mmol/L)LDCAB4.22-+0.354.36±0.16‘141.20±4.09136.80±2.17138.80±2.28137.80±2.598LDCAB+MgOMDCAB4.5l±022433±006。139.20±3.03“1444.38±0.344.33±0.104.32±0.194.29±0.12660±3.2l^MI)CABⅧgOm)cAB4.29±0.i2‘13920-4-4.32138.20±4.3214380±3.19“484±0.3I‘144.80±2.95‘!堕!!:竖!!::!圭!:!!!:!!圭!:!!::!::!!主!:兰兰!!!::!圭!:!!:05)不同处理日粮对围产期奶牛血清钾、钠离子的影响见表7。结果显示产前各组血清钾、钠没有显著差异(P>O.05)LDCAB,LDCAB+MgO,MDCAB,MDCAB+M90,HDCAB,HDCAB+MgO组血清钾含量分别是4.22±0.35,4.51±o.22,4.38±O.34,4.33-t-0.10.13河北农业大学硕士学位论文4.32±0.19,4.29±0.14mmol/L.血清钠含量分别为141.20±4.09,136.80±2.17,138.80±2.28,139.20±4.32,138.20±4.32,137.80±4.44retool/L:产后HDCAB,HDCAB+MgO组血清钾分别为4.84±0.31,4.75±0.55mmol/L没有显著差异(P>O.05),但显著高于其他组(P<O.05),LDCAB,LDCAB+MgO,MDCAB,MDCAB+MgO组分别为4.36±0.16,4.33±0.06,4.29±0.12,4.29±0.12mmol/L。产后LDCAB,LDCAB+MgO组血清钠分别为137.80±2.59,139.20±3.03mmol/L差异不显著(P>0.05),但LDCAB组极显著低于其他各组(P<O.01),LDCAB+HgO组与MDCAB+MgO组差异显著(P<O.05),而与其他各组差异极显著(P<0.01),MDCAB,MDCAB+MgO,HDCAB,HDCAB+MgO组血清钠分另U为144.60±3.2l,143.80±3.19,144.804-2.95,145.20±1.92mmol/L。表8不同处理日粮对围产期血清磷、钙的影响Table8Effectofdifferenttreatmentsofdietary011plasmaphosphorusandionisedcalcium磷(产前)磷(产后)钙(产前)组别钙(产后)(mmol/L)(mmol/L)(mmol/t)(mrflol几)LDCAB1.49±0.29l.62±0.2l1.15士0.06I.29±0.04“LDCAB+MgOL50±0.181.58±0.141.14土0.091.27士0.08”MDCABL47土0.081.58±0.231.15±0.041.26±005“MDCAB+MgO1.48±0.17l53±0.141.18±0.03l31±0.i18HD(、AB1.44±0.2i1.49±0.16l13±0.061.03±0.17‘坚墼垒!:!!竺!:!!圭!:!!!:!!圭!:!!!:!!圭!:!!!:!!圭!:!!::注:同列无肩标表示差异不显著(P>0.05).不同大写字母表示差异极显著(P<o01),不同小写字母表示差异显著(P<O05)如表8所示,不同处理日粮对围产期奶牛血清磷的影响差异不显著(P>O.05),LDCAB,LDCAB+MgO,MDCAB,MDCAB+MgO,HDCAB,HDCAB+MgO组产前血清磷分别为1.49±0.29,1.50±0.18,1.47±0.08,1.48±0.17,1.44±0.21,1.40±0.13mmol/L,产后血清磷分别为1.62±O.21,1.58+_0.14,1.58±0.23,1.53_+0.14,I.49±0.16,1.46+0.31mmol/L。不同处理日粮对产前血清钙离子浓度影响差异不明显(P>O.05),LDCAB,LDCAB+MgO,MDCAB,MDCAB+MgO,HDCAB,HDCAB+MgO组分别为1.15±O.06,1.14±0.09,1.15±0.04,1.18±0.03,1.13±0.06,1.17±0.10mmol/L,但产后LDCAB,LDCAB+MgO,MDCAB,MDCAB+MgO组血清钙离子含量分别为1.29±0.04,1.27±0.08,1.26±0.05,l’3l±0.1lmmol/L极显著高于HDCAB组的1.03±0.17mmol/L(P<O.01),HDCAB+MgO组为1.1li-0.15mmol/L与MDCAB+MgO组差异极显著(P<O.01)与LDCAB,LDCAB+MgO,MDCAB差异显著(P<O.05)。如表9所示,不同处理日粮对产前血清羟脯氨酸浓度没有显著差异(P>O.05),LDCAB,LDCAB+MgO,MDCAB,MDCAB+MgO,HDCAB,HDCAB+MgO组分别为2.02+0.38,2.0l±0.1l,2.00±0.17,2.02±0.14,2.08±0.20,2.04±0.14ug/mL。产后HDCAB,HDCAB+MgO组血清羟脯氨酸浓度分别为1.96±O.11,2.02±O.26ug/mL极显著低于其他各组(P<O.01),LDCAB,LDCAB+MgO,MDCAB,MDCAB+MgO组分别为2.42±0.29,14日粮瘤胃非降解蛋白和阴离子盐对奶牛生产性能和血液指标的影响2.504-0.09,2.26-t-0.11,2.42±O.08ug/mL。LDCAB+MgO,MDCAB组差异显著(P<0.05)。HDCAB,HDCAB+MgO组之间没有显著差异(P>O.05),HDCAB组与其他组差异极显著(P<O.01),HDCAB+MgO组与MDCAB组有显著差异(P<0.05),与其他组差异极显著(P<O.01),产后比产前提高的程度HDCAB,HDCAB+MgO组分别为一0.12±0.16,一0.02±0.3lug/mL低于其他各组,LDCAB,LDCAB+MgO,MDCAB,MDCAB+MgO组分别为0.41±0.14,0.48±0.16,0.27±0.08,0.41±0.1lug/mL。表9不同处理日粮对围期奶牛血清羟脯氨酸的影响Table9Effectofdifferenttreatmentsofdietaryonplasmahydroxyproline注:同列无肩标表示差异不显著(P>0.05),不同大写字母表示差异极显著(P(0.01).不同小写字母表示差异显著(P<O.05)从表lO可见HDCAB,HDCAB+MgO组产前,产后血清PTH分别为3.33±O.82,3.07+0.55pg/mL和6.32+_2.26,6.71±2.02pg/mL均极显著低于其他组(P<O.01),PTH产后比产前提高的程度LDCAB,LDCAB+MgO分别为14.764-3.37,17.21±1.90pg/mL明显高于MDCAB,MDCAB+MgO组8.53_+3.92,8.29-t-2.32pg/mL(P<O.01),MDCAB。MDCAB+MgO组明显高于HDCAB,HDCAB+M90组的2.994-2.31,3.64±1.90pg/mL(P<O.01)。表10不同处理日粮对围产期奶牛血清PTH的影响!!!!!!!!竺!!!!!!!!!!!!竺!!竺!!堡世!兰!!!!!£堡!竺!£!堡!!!翌翌!!!!竺竺…….PTH(产前)PTH(产后)PTH(产后)--PTH(产前)组别(pg/mL)(Pg/mL)(pg/mL)LDCAB28.60±2.6943.37±3.2541.25±4.1414.76±3.37‘17.21±1.9068.53±3.9268.29-L-_2.3282.99±2.3l‘LDCAB+№0Ⅲ)cABMDCAB+MgOHDCAB24.04士3.7826.244士3.4631.264±4.753.33±0.8234.77±6.9939.55±3.546.32±2.26坚!型!!!:!!圭!:塑!:!!圭!:!!!:竺主!:!!:注:同列肩标不问大写字母表示差异极显著(P<O.01)河北农业大学硕士学位论文3.1.3不同处理日粮对产后疾病的影响LDCAB.LDCAB+MgO,MDCAB,MDCAB+MgO组乳房水肿程度小。没有发生胎衣不下HDCAB,HDCAB+MgO组全部发生严重乳房水肿,各有一例胎衣不下发生。3.2精饲料中不同RUP水平对产奶牛生产性能和血液指标的影响3.2.1不同精饲料RUP水平对产奶量及乳成分的影响如表ll所示,饲喂MRUP的奶牛产奶量为20.34±0.58kg/d极显著高于饲喂LRUP的奶牛(P<0.01),饲喂LRUP的产奶量为19.43+0.49kg/d,饲喂HRUP的奶牛产奶量为20.06--+0.43kg/d显著高于饲喂LRUP的奶牛(P<O.05),饲喂MRUP的奶牛日产奶量与饲喂HRUP的奶牛没有显著差异(P>O.05),饲喂MRUP,HRUP的奶牛比饲喂LRUP的奶牛分别提高3.2%,4.7%。表I1不同RUP日粮对产奶量及乳成分的影响TablellEffectofdifferentRUPofdietaryOilmilkproductionandmilkcompositionsindairycoⅣ往:同别无肩标表示差异不显著(P>0.05).不同大写字母表示差异极显著(P<0.01),不同小写字母表示差异显著(P(O05饲喂HRUP的奶牛标准乳为18.76±0.30kg/d极显著高于饲喂LRUP的奶牛(P(O,01),饲喂LRUP的奶牛标准乳为18.Ol±0.4lkg/d,饲喂MRUP的奶牛日标准乳为18.52±0.45kg/d显著高于饲喂LRUP的奶牛(P<O.05).饲喂MRUP的奶牛平均日产奶量与饲喂HRUP的奶牛没有显著差异(P>O.05)。饲喂HRUP的奶牛乳脂率为3.57±0.08%极显著高于饲喂MRUP的奶牛(P<O.01),饲喂MRUP的奶牛乳脂率为3.40±0.08%,饲喂MRUP的奶牛乳脂率显著高于饲喂LRUP的奶牛(P<O.05),饲喂LRUP的奶牛乳脂率为3.5l±0.09%。随着精料RUP的增加乳脂率有递增的趋势。饲喂HRUP的奶牛乳蛋白为3.2l±0.10%极显著高于饲喂LRUP,MRUP的奶牛(P<O.01),饲喂LRUP,MRUP的奶牛乳蛋白分别为3.02±0.11%,3.03±0.09%饲喂MRUP的奶牛乳蛋白饲喂LRUP的奶牛差异不显著(P>O.05)。饲喂精料RUP不同的三种日粮对非脂固形物的影响差异不显著(P>0.05),LRUP,MRUP,HRUP的非胎固形物9.01±0.26%,9.08±0.34%,9.21±0.67%。饲喂HRUP的奶牛蛋白总量为321.77±13.149/d极显著高于饲喂LRUP的奶牛日粮瘤胃非降解蛋白和阴离子盐对奶牛生产性能和血液指标的影响(P<O.01),饲喂LRUP的奶牛蛋白总量为293.57±4.459/d,饲喂MRUP的奶牛蛋白总量为307,67±6.789/d显著高于饲喂LRUP的奶牛(P<0.05),饲喂HRUP的奶牛日蛋白总量与饲喂MRUP的奶牛相比差异显著(P<O.05),饲喂MRUP,HRUP的奶牛比饲喂LRUP的奶牛分别提高5.9%,6.3%,随着精料RUP的增加蛋白总量也有递增的趋势。3.2.2不同精饲料RUP水平对OP消化率和BUN的影响表12不同精饲料RUP水平对日粮cP消化率和BUN的影响Tablel2EffectofdifferentRUPofdietaryOnDigestibilityofCPandBUNindairyCOW注:同,《无肩标表示差异不显著(P>O05),不同小写字母表示差异显著(P<005)如表12所示饲喂精料MRUP的日粮CP消化率为0.80_+0.06%极显著高于其他两种日粮(P<O.01),饲喂精料LRUP,HRUP的奶牛CP消化率差异不显著(P>O.05),分别为0.74±0.04%,0.73±0.05%。饲喂精料LRUP,HRUP的奶牛血清尿素氮分别为5.62±O.90,5.45±0.83mmol/L显著高于饲喂精料MRUP的奶牛(P<O.05),饲喂精料MRUP的奶牛血清尿素氮为4-2211.20mmol/L,饲喂精料LRUP,HRUP的奶牛血清尿素氮差异不显著(P>O.05)。17河北农业大学硕士学位论文4分析讨论4.1日粮添加阴离子盐、镁对于奶牛生产性能及血液指标的影响4.1.1不同处理日粮对产奶量、乳成分、采食量及尿pH的影响2~ll周产奶量与整个泌乳期产奶量呈正相关。从本试验结果看阴离子日粮对2~1l周产奶量影响差异不显著,乳脂(见附录图2)、乳蛋白(见附录图3)没有显著差异,但MDCAB和MDCAB+MgO组的平均产奶量高于LDCAB和LDCAB+MgO组,其中MDCAB+MgO组的产奶量最高(见附录图1),这可能是LDCAB和LDCAB+MgO组日粮的适口性比MDCAB和MDCAB+MgO组更差,导致了奶牛采食量下降,从而掩盖了LDCAB日粮体液环境优化带来的有益作用。Roche(2002,2003a,2003b)的研究结果认为围产前期阴离子盐对产后产奶量没有显著影响”’”‘“1,国内有些研究报道阴离子盐能显著提高产奶量,可能的原因,一是选取试验奶牛时未考虑上胎产奶量,二是奶牛个体的因素,下胎产奶发生骤然变化。这些导致组内差异太大,组间差异不显著。本试验无产奶记录导致组内差异太大。阴离子盐应用到奶牛日粮中最大的缺点是适口性差,在许多研究中饲料采用全混日粮,能较好的掩盖阴离子盐的苦味“…。在本试验中和其他处理相比,DCAB值为一125时,采食量有所下降,本试验中人工搅拌使阴离子盐和精、粗料混合均匀,从而稀释阴离子盐,改善适口性,如果采用全混日粮(TMR)会更好的掩盖阴离子盐的苦昧,避免采食量下降。在SusannaTauriainen(2001)的试验采用精、粗分开饲喂,DCAB值为一247mEq/kgDM时,影响了奶牛的采食量。阴离子盐中的C1一,s’,带有负电荷,有酸化体液的作用,许多试验都表明氯对体液的酸化作用是硫的1.6倍,镁有微弱的碱性,在DCAD的计算式中忽略不计。DCAB变化引起血液酸碱状态的变化,DCAB在正值范围内变化,血、尿中的其他指标没有变化…,尿的pH也发生相应的变化,血液pH和尿液pH之间有密切的相关性“”,而且尿的pH容易测量。因此,尿p|{值成为检测阴阳离子平衡的敏感指标““,尿的pH随DCAB值的降低而降低“…。本试验结果和Roche(2003a)得出的结果一致。Jordon(1995)认为尿的pH为6~7时,日粮中的阴离子盐能够使血液的pH下降并能防止产褥热的发生”…。本试验尿pH虽然随DCAB值下降而降低,但平均值仍高于7(见附录图4),在预防胎衣不下和乳房水肿等疾病上也取得了显著的效果,Oetzel等(1991)试验DCAB为一169,一175mEq/kgDM时,尿pH7.39~7.96。Jordon(1995),Horst等(1997)认为当尿的pH低于5.5~6时。’”1,说明阴离子盐添加可能过多。Wang(1992a)试验DCAB为一428mEq/kgDM时尿的pH5.93,Wang(1992b)试验DCAB为一289,一302mEq/kgDM时尿pH6.14,6.06…1。但也有研究表明DCAB值和尿的pH值并没有显著的相关性,通过本试验的研究笔者不支持这一观点。日粮瘤胃非降解蛋白和阴离子盐对奶牛生产性能和血液指标的影响4.1.2不同处理日粮对血液指标的影响正常奶牛体液的酸碱状态和矿物质水平见表13。表T3正常奶牛体液的酸碱状态和矿物质水平Tablel3Normalacid—baseandmineralstatusofthedairyCOW(Radostitseta1.1994.Kaneko1989)。”…1通常奶牛日粮中钠,钾离子古量高,体液成微弱的碱性,围产期目粮中添加阴离子盐和镁,为奶牛补充了cl,s和№,这三者在体内有着不可替代的作用。其中cl是体内主要的阴离子,占细胞外液全部阴离子的60%,在保持渗透压、酸碱平衡、水平衡上起到主要的作用,在血液运输氧和二氧化碳的过程中也起到重要的作用。牛的皱胃分泌的盐酸(IICI)对消化蛋白和过瘤胃淀粉有重要的作用““,本试验只粮DCAB值为一125mEq/kgDM时显著的提高了血液cl水平,日粮DCAB值为一75mEq/kgDM时血液cl一水平有所提高但差异不显著(见附录图5)。血液cl一水平的提高将降低血液pH值,从而尿pH值也降低。而Sanchez(1994)试验表明,DCAB水平从250mEq/kgDM到400mEq/kgDM时奶牛血浆Cl一影响不显著o“,Jackson(1994)对小牛的试验也表明不同DCAB水平的同粮对血浆Cl的影响不显著”1,原因可能是阴离子添加数量,尤其是氯离子添加数量添加不足。低血镁是造成围产期奶牛低血钙的另一个常见因素,如果镁的摄入量太低(血镁的浓度低于0.85mmol/L)容易发生产褥热“”。“1”3,原因是镁的缺乏可能会抑制PTIt的作用,从而不能有效的动员骨钙。7’产前饲喂镁盐对产后血清镁的影响程度MgS04>IfIgCl。>MgO“…。三种镁盐相比M90适口性最好、№含量最高、价格最低,本试验选择MgO,从试验结果看添加MgO的组,镁含量都提高到了1.Ommol/L以上(见附录图6),这个结果和Capen&Rosol(1989)的结论一致:镁不受激素的赢接调控,低血镁的调控主要依靠日粮中镁的添加“…。较低的的DCAB值可能促进№的吸收,机理有待研究。当Cl’和SO,’被吸收,细胞外液的酸性增加,H+增加,细胞内K+和H+交换防止细胞外液酸性过度增加;如果日粮中阴离子盐添加过多会出现高血钾;Na+和cl一一起形成水合物,因此c1一浓度提高也提高了Na+的浓度,这是由低DCAB日粮引起轻微的19河北农业大学硕士学位论文酸中毒时牛体内的代偿机制,在一周内在代偿机制的作用下体内的离子又能恢复平衡。本试验结果表明围产前期饲喂阴离子日粮对产前血清K,Na的浓度都没有显著的影响(见附录图7、图8),说明奶牛对一定量的阴离子也有耐受范围,达到一定的上限才能启动代偿机制。Sanchez(1997)试验表明,DCAl3水平从250mEq/kgDM到400mEqflkgDM时对奶牛血浆K,Na影响不显著”“,Jackson(1994)对小牛的试验也表明不同DCAB水平的日粮对血浆K,Na的影响不显著”…。但本试验产后一周内HI)CAB和HDCAB+MgO组,血清K,Na的浓度都高于其他组。原因还有待进一步研究。围产期奶牛血清磷差异不显著(见附录图9)这与以前的几项研究结论一致rs,24,40,58,“1,Phillippo等(1994)认为低血磷和低血镁通常伴随围产期血钙的下降而出现,磷和镁代谢发生变化和低血钙有关,和阴离子盐没有直接的关系““。关于在日粮中添加阴离子盐的多数试验研究认为血中总钙不受阴离子盐的影响。2。…。但Joyce(1997)的研究结果表明DCAB为一70mEq/kgDM时总钙有明显的提高”…。在反映体内钙水平时,钙离子的浓度比总钙浓度更敏感,因为钙离子有更活跃的生物学作用,AbuDamir等(1994)研究表明日粮中DCAB为一35mEQ/RgDM时ca”浓度显著增加““。本试验ItDCAB,HDCAB+Mg组ca”产后比产前降低(见附录图10),其他组产后ca2+比产前增加,说明DCAB值为一75,一125mEq/kgDM时能够有效的影响钙离子的代谢平衡。围产前期奶牛饲P畏DCAB为负值的日粮对钙的代谢产生了有益的影响,原因是由于阴离子口粮引起血液pH下降,促进了骨钙的代谢。为了研究骨钙代谢,一般采用检测血清碱性磷酸酶的浓度…6“,或是通过检测血清o’“。…、尿”2““’6216”中羟基脯氨酸的浓度。血清中羟脯氨酸的浓度高低反映骨钙重吸收是否活跃。本试验通过测定血清中羟脯氨酸含量来研究骨钙代谢的情况,研究结果表明,围产前期饲喂阴离予盐产后羟脯氨酸的浓度明显增加(见附录图u).其中LDCAB+Mg组的羟脯氨酸最高。说明和HDCAB,HDCAB+Mg组相比~75,一125mEq/kgDM都能影响钙的代谢。几项研究的结果都证明围产前期饲喂阴离子盐能提高血清羟脯氨酸的浓度“’2‘35。”1。这可能是阴离子日粮增加了破骨细胞的活性或者刺激了新的成骨细胞的生成。”。当分娩、泌乳开始,大量的钙被动用,血液中钙离子的浓度下降,从而刺激甲状旁腺素的分泌,PTH能促进肾脏对钙的重吸收“”和1.25—2羟维生素D在肾脏的合成,维生素D。能促进小肠细胞钙结合蛋白的合成。由于体内PTH和l,25—2羟维生素D的分增加促进了骨钙的重吸收和肠钙的吸收。本试验结果表明饲n畏DCAB为一75,125mEq/kgDM日粮,产前、产后奶牛血清PTH明显高于DCAB为72mEq/kgDM的日粮(见附录图12),但由于组内差异较大,没有更精确的规律可循。但是产后PTH和产前fPTH的差值有明显的规律,flflDChB为一125mEq/kgDM的组产后比产前提高值最多,DCAB为一75mEq/kgDM的组次之,DCAB为72mEq/kgDM的组提高的最少。刘宏峰(2004)采用全混同粮,DCAB水平一260mEq/kgDM,测定PTH为5.22pg/mL““,远低于本试验结果。理论上1,25一(OH):一D。的合成受PTH的控制,但是在许多研究中发现阴离子盐对1,25一(OH):一D,的浓度有显著影响,而对PTH的浓度没有显著影响…“’“+”。Phillippo等(1994)就这个问题进行了推测,酸性曰粮直接影响了l,25一(OH)。一玛的合成酶。“。日粮瘤胃非降解蛋白和阴离子盐对奶牛生产性能和血液指标的影响Bushinskv等(1982)用低钙阴离子日粮饲喂小鼠,尽管PTH分泌增加,血清l,25一(OH)。一D3并没有增加”…。Goff等(1995b)研究了不同DCABH粮(+337mEq/kgDM和+134raEq/kg嘣)对围产期娟姗牛直肠维生素D受体(VDR)的影响,研究者认为直肠VDR的浓度反映了十二指肠(吸收钙的主要部位)VDR的浓度,结果发现发生产褥热的牛和没有发生产褥热的牛相比,产前的直肠VDR浓度没有明显差异”1。我们可以看出与钙代谢有关的各种生理过程相当复杂,有待进一步研究和证实。4.1.3不同处理日粮对产后疾病的影响试验过程中发现饲喂日粮I)CAB为~75mEq/kgDM和DCAB为一125mEq/kgDM的组,临产前奶牛乳房水肿程度较小,而饲喂日粮DCAB为+72mEq/kgDM的组乳房水肿程度大。Tucker等(1992)的研究结果认为,饲喂低DCAB(一30mEq/kgDM)比饲喂高DCAB(+102~+60mEq/kgDM)日粮的奶牛产后乳房水肿消退的更快“…。乳房水肿是一种围产期常见的代谢紊乱疾病,其特征是乳腺细胞外产生大量积液,严重时乳房和脐部水肿、充血、乳房的肿胀,奶牛感觉不适,而且给生产管理带来许多麻烦,如机械挤奶困难,乳头和乳房受损,发生乳房炎等。乳房水肿严重时可导致产奶量下降和乳房下垂”…。乳房水肿的确切病因还不清楚,很可能是多种原因所致,因素之~是妊娠末期由于盆腔胎儿压力,造成静脉回流不畅,导致静脉压升高“87…,低的DCAB日粮降低乳房水肿发病率或者促进水肿消退的作用可能跟Fi粮中阴HDCAB和HDCAB+MgO组均有一例胎衣不下发生,检测病牛血清钙离子分别是0.75离子调节渗透压从而增强了乳静脉血液回流有关。和0.85mmol/L,低血钙导致子宫肌肉弹性丧失,可能增加了胎衣不下的发病率…’,胎衣不下直接导致奶牛产后初次配种的天数延长,子宫炎发病率增加…1。Oetzel(1988)的研究认为饲喂阴离子盐,防止低血钙,减少胎衣不下的发病率”1,Joyce等(1997)认为阴离子日粮减少产后疾病的发生*…。4.2精饲料中不同RUP水平对产奶牛生产性能和血液指标的影响4.2.1精饲料中不同过瘤胃蛋白水平对产奶牛生产性能和血液指标的影响曰粮cP的瘤胃降解是时间依赖的过程,饲料的降解率是影响饲料过瘤胃蛋白的关键因素…1。本试验选取了玉米蛋白粉和甲醛保护豆粕来提高过瘤胃蛋白的含量。随着玉米淀粉工业的发展,产生了大量的副产品,如玉米浆、玉米纤维、玉米浸泡液、玉米蛋白粉等。充分利用这些副产品是众多玉米淀粉加工企业目前亟待解决的问题”“。玉米蛋白粉的RUP为63.8%~74.6%,RUP的消化率为92%“1。玉米蛋白粉在鸡、猪饲料中应用比较广泛,应用到奶牛的饲料中,这在我国相关的报道较少,本试验结果证明玉米蛋白和其他饲料原料配合使用能提高曰粮RUP,满足奶牛对RUP的2l河北农业大学硕士学位论文需要,玉米蛋白没有影晌饲料的适口性。Ferguson等(1967)试验表明,用甲醛处理蛋白质补充料可降低其在瘤胃的降解率,而对饲料的消化率无影响,但最近的研究结果表明,在甲醛处理后,蛋白质在小肠的消化率和赖氨酸的有效性也降低。因此必须采用适宜的甲醛用量,对蛋白进行最大限度的保护,而且对小肠的消化率无不良影响”“。豆粕的常用的甲醛保护浓度是O.69甲醛/lOOg饲料CP”6’7“,能够有效保护豆粕,不会产生过保护。粗蛋白(cP)臼粮体系与可消化蛋白质体系在反刍动物营养中沿用多年,很难确切的表示反刍动物对蛋白质的需要量。1977年英国的Roy等首先提出了新的反刍动物蛋白质体系,随后,各国纷纷提出了自己的反刍动物蛋白质新体系““。各个蛋白质新体系虽名称不同,但基本观点都是把饲料蛋白质分成瘤胃可降解蛋白(RDP)和过瘤胃蛋白质(RUP)两部分,RDP和RUP是饲料cP中两个功能截然不同的组分。饲料中RDP为微生物的生长和微生物蛋白质(MCP)的合成提供了所需的肽、游离氨基酸和氨。瘤胃合成的微生物蛋白质为小肠提供了绝大部分氨基酸,RUP是小肠氨基酸的第二重要来源”“。由于RUP的增JJHHRUP组的乳蛋白显著高于其他两组(见附录图14),相同cP水平下RUP含量提高,增加了小肠氨基酸的供应“”从而提高了乳蛋白含量,小肠氨基酸的增加也提高了乳中总蛋白的产量(见附录图15),使之有随RUP增加而增加的趋势,NRC(2001)综合许多试验也得出乳蛋白产量随RUP含量的提高呈线性增加。MRUP组的平均全天产奶量最高(见附录图13),而标准孚LMrUP组与HRUP组没有明显差异(见附录图13),均高于LRUP组。乳脂率与产奶量有弱的负相关,这可能是MRUP组的乳脂率相对较低的原因。S.Davidson(2003)等研究表明相同的cP水平下高的RUP,BUN显著低于其他组,说明了这种情况下氮的利用率增加”“。本试验中MRUP组BUN水平最低(见附录图16),ftRUP组BUN浓度高于MRUP组,是由于HRUP组RUP过剩,导致BUN浓度升高:HRUP组虽然CP;FlJ用率低于MRUP(见附录图17),但HRUP的RUP水平为u.2%高于MRUP的9.1%,FCUP的利用量可能还是要高于MRUP组,所以产生了乳品质要高于MRUp组,综合以上的结果,产奶中期中产奶牛可以直接采用MRUP曰粮的配比,得到较高的产奶量和减少粪氮的排泄。HRUP精料虽然乳品质提高但的cP利用率低,粪氮排泄增加,从饲料配方中看HRUP精料的饲料成本会高于MRUP。NRC(2001)综合许多试验得出,在所有的试验中,奶牛处于泌乳早期到中期,平均产奶量为30.9kg(范围:18.8~44.Okg/d。CP,RUP在饲料干物质中的平均百分含量分别为16.1%(范围:13.8%~20.8%)和5.2%(范围:2.8%~8.9%)。本试验精料、粗料混合后的CP,RDP,RUP见表14,混合后的CP,RUP也在这个范围内。日粮瘤胃非降解蛋白和阴离子盐对奶牛生产性能和血液指标的影响表14精粗料混合后CP和RUP的含量Tablel4ContentsofCPandRUPinmixedration{.料,・{}分别是精料LRUP.MRUP.ffRUP与cs(玉米青贮)混台随着养殖业规模的不断扩大,畜禽排泄物中氮对环境的影响越来越严重,粪尿排出后,一部分氮挥发到大气中增加了大气中的氮含量,严重时构成酸雨,危害农作物,其余大部分则被氧化成硝酸盐渗入地下或地表水流入江河,从而造成广泛的污染。另外,家畜的粪和尿排出后常混在~起。由于微生物的活动,粪尿中含氮物质大量降解,产生大量挥发性脂肪酸和氮。粪尿排出后,约有60%~75%的氮转化为氨。除氨外,粪尿中还发现80多种含氮化合物,其中有lO种跟恶臭有重要关系。通过营养调控提高氮、磷的利用率,减少粪中氮、磷的排泄及污染,对于减少饲料的浪费、优化生态环境有重要意义”…。吕秉林等(2002)研究表明,黑白花奶牛氮的消化率为70%啪1。Cheema等(1991)等报道日粮CP水平与表观消化率成正比”“。本试验结果蛋CP的消化率为73~80%,说明粪氮减少,对环境的影响较小。河北农业大学硕士学位论文5有待解决的问题添加阴离子盐越多,DCAB值越低,适口性越差,但当在TMR粮中使用时,可能适口性会比在精、粗分开的饲料要好,从而起到更好的效果,下一步的试验应采用TMR日粮。以往人们关注提高饲用植物的产量、蛋白质水平、脂肪水平,对离子的研究较少,我们今后可以通过检测饲料阳离子的含量,筛选阳离子较少的饲料原料用于干奶牛的饲养,或者通过减少钾肥等含阳离子较高的肥料的施入来降低植物阳离子的含量。用降低DCAB是否引起1,25一(OH)。一D3增加;DCAB值和尿的pH的相关性的回归方程的推导;添加阴离子盐的日粮中钙的最佳浓度的研究;镁是如何影响PTH的分泌以及DCAB除了影响钙的动态平衡外,是否有其它的生理功能部有待研究。试验由于条件所限,没有测定尿氮的排泄量,不能计算日粮氮平衡,应设计奶牛收尿装置,研究不同RUP对尿氮排泄的影响。下一步的研究应在本试验的基础上减少粗蛋白的含量,保持RUP水平在11.2%,这样可能会增加cP的利用率,同时提高乳品质。玉米蛋白粉应用到奶牛饲料中的相关报道并不多.玉米蛋白粉和其他常用蛋白饲料配合使用,小肠氨基酸是否能达到平衡,是否这种氨基酸的配合,优于其他常规的饲料配方,这都有待研究。日粮瘤胃非降解蛋白和阴离子盐对奶牛生产性能和血液指标的影响6结论①DCAB值为一75mEq/kgDM的日粮的适口性好于DCAB值为一125mEq/kgDM的日粮,精料、粗料分开的饲喂方法,日粮DCAB值调整到一75mEq/kgDM效果最好。②DCAB值为一75mEq/kgDM和DCAB值为一125mEq/kgDM的日粮都能使尿液pH下降,提高产后血清钙离子的含量。③MgO能够提高血清镁的含量,但阴离子盐和镁的互作效果表现的不明显。④添加阴离子盐和镁对产奶量的影响不显著,nhT-DCAB值为一125mEq/kgDM的日粮采食量相对较低,从而降低了该组的产奶量。⑨DCAB值为一75mEq/kgDM汞JDCAB值为一125mEq/kgDM的曰粮能明显的降低胎衣不下、乳房水肿的发病率。⑥日粮cP为19.7%,RUP#j9.1%时,粗蛋白的消化率最高,乳产量最高,乳成分含量适中,日粮成本适中。河北农业大学硕士学位论文附录圈产后2~1l周产奶量225022002150210020502000奄1950v1900懿:175017001650160015501500LDCABLDCAB+MgOMDCABMDCAB+MgOHI}CABHDCAB+MgO图l不同处理日粮对产后2~¨周产奶量的影响Fig-lEffectofdifferenttreatmentsofdietaryoDmiikproducion(postcalving2~l1)日乳脂LDCABLDCAB+MgOMDCABMDCAB+MgOHDCABHDCAB+M90图2不同处理对乳脂率的影响Fig・2Effectofdifferenttreatmentsofdietaryon口ilkfat(postcalving2~11)日粮瘤胃非降解蛋白和阴离子盐对奶牛生产性能和血液指标的影响3・40目乳蚩白3.303.20霎3・10二3.00冀2.902.802702.60LDCABLDCAB+}ⅡgOMDCABMDCAB+MgOHI)CABHDCAB+MgO图3不同处理日粮对乳蛋白的影响Fig.3Effectofdifferenttreatmentsofdietaryonmilkprotien(postcalving2~l1)圄尿pH9.008.508007.50翟7.006.506.005.505.00LDCABLDCAB+MgOMDCAEMDCAB+MgOHDCABHI)CAB+MgO图4不同处理日粮对尿pH的影响Fig.4Effectofdifferenttreatmentsofdietary0nureapH河北农业大学硕士学位论文口氯(产前)圈氯(产后)LDCABLDCAB+MgOMDCABMDCAB+MgOHDCABHDCAB+MgO图5不同处理日粮对奶牛血清氯的影响Fig.5Effectofdifferentplasmatreatmentsofdietaryoochlorine口镁(产前)圈镁(产后)1.2l,、曼o.8S蟊o.6磋匏t目0・2OLIX:ABLDCAB+MgOMDCABMI)CAB+MgOHDCABHDChB+M90图6不同处理日粮对奶牛血清镁的影响Fig.6Effectofdifferentplasmatreatmentsofdietaryonmagnesium日粮瘤胃非降解蛋白和阴离子盐对奶牛生产性能和血液指标的影响口钾(产前)矗钾(产后)5・55乏4.5-j、虽4冀3.5警s2.52LDCABLDCAB+MgOMDCABMDCAB+MgOHDCABHDCAB+MgO图7不同处理日粮对I衄清钾的影响Fig7EffectofdifferenttreatmentsofdietaryODplasmapotassium口钠(产前)固钠(产后)150148146144142140138136134132130128126124122120LIXIABLDCkB+MgOMI)CABMDCAB+MgOHDcA8HDCAB+MgO图8不同处理日粮对奶牛J|n清钠的影响Fig.8Effectofdifferenttreatmentsofdietaryoilplasmasodium罪河北农业大学硕士学位论文口磷(产前)嗣磷(产后)1.91.81.71.6\号E目1.5冀l4鼙甥1.3d1.21.1lLDCABLDCAB+MgOMDCABMDCAB+MgOHDCABHDCAB+MgO图9不同处理日粮对奶牛血清磷的影响Fig.9Effectofdifferenttreatmentsofdietaryor]plasmaphosphorus口钙(产前)圈钙(产后)1.61.41.2乏1Sot8躲0・60.40.20LDCABLDCAB+MgOMDCABMDCABtMgOHDCABHDCAB+MgO圈10不同处理日粮对奶牛血清钙的影响Fig・10Effectofdifferenttreatmentsofdietaryonplasmaionisedealeium日粮瘤胃非降解蛋白和阴离子盐对奶牛生产性能和血液指标的影响口羟脯氨酸(产前)囝羟脯氨酸(产后)2.902.702.5032.30g2.10i“90蠖1.70澎掘L50霾1.30警1.iO0.900.70050LDCABLDChB+MgOMI](=ABMDCAB+MgOHDCABHDCAB+MgO图ll不同处理日粮对奶牛血清羟脯氨酸的影响Fig.11Effectofdifferenttreatmentsofdietaryonplasmahydroxyproline口甲状旁腺素(产前)目甲状旁腺索(产后)5045鲁40甚35运30蠢25鬟20誉15彗1050LDCABLDCAB+MgOMDCABMDCAB+MgOHI)CABHDCAB+MgO图12不同处理日粮对奶牛血清甲状旁腺素的影响Fig・12EffectofdifferenttreatmentsofdietaryOilplasmaparathyroidhormone31河北农业大学硕士学位论文口产奶量圈标准乳22.0021.0020.0019.00_≥18.0017.0016.0015.00LRUPMRUPHRUP圈13不同RUP日粮对日产奶量和日标准乳的影响Fig.13EffectofdifferentRUPofdeitaryonmilkproductionandFMCindairycow团LRUP口MRUP■I[RUP4.003.50妄3.00蚤鑫z・2.001.50乳脂率乳蛋白图14不同RuP水平对巍脂率和乳蛋白的影响Fig.14EffectofdifferentRUPofdietaryoilmilkcoapositionsindairycow日粮瘤胃非降解蛋白和阴离子盐对奶牛生产性能和血液指标的影响340.00一蛋白总量330,00320.00名310.00蜒300・00Ⅲ踟290.00280.00270.00260.00MRUP图154硐RUPf3粮对日乳蛋白总量的影响Fig.15EffectofdifferentRUPofdietaryoDtotalmiikpIotienindairyCOW圈BUN浓度(∞ol/L)765432lLRUPMRUPHRUP图16不同RUP日粮对奶牛BuN浓度的影嘀Fig.16EffectofdifferentRUPofdietaryonBUNindairyCOW河北农业大学硕士学位论文目CP消化率0.900.850.80X0.75{}{L0.70瓣0.650.600.550.50LRUPMRUP图17不同RUP[|粮对cP消化率的影响Fig17EffectofdifferentRUPofdietaryonDigestibilityofCPindai]vcow日粮瘤胃非降解蛋白和阴离子盐对奶牛生产性能和血液指标的影响参考文献…1[美]国家科学研究委员会组织修订,孟庆翔主译.奶牛营养需要[M].北京:中国农业大学出版社,2002.8.【2】Block,E.Manipulatingdietaryanions【3】3andcationsforCOWStoreduceincidenceofmilkfever[J].J.DairySci.,1984,67:2939~2948.Horst,RL,Goff,JP,Reinhardt,TA,Buxton,DR.Strategiesforpreventingmilkfeverindairycattle[J].J.DairySci.,1997,80:1269~1280.【4】曹志军,李胜利,贺鸣,等.阴离子盐预防奶牛低血钙症的机理及应用[J].中国畜牧兽医,2004。31(4):3~5.【5]刘庆平,DirkAxe.产褥热和低血钙及其缓解措施[J].中国饲料,2002,6:29~29.【6】Oetzel,G3309.R,Olson,JD,Curtis,CR,Fettman,MJ.AmmoniumchlorideandammoniumSUIfateforpreventionofparturientparesisindairycows[J].J.DairySci.,1988,71:33024[7】J.RandRoche,DDalley,PMoate,eta1.ALowDietaryCation.AnionDifferencePrecalvingPlasmaCalciumSupplementationPostcalvingIncreaseaCalciumButNotMilkSystem【J】.J.DairySci.,2003a,86:2658~2666.[8】刘庆华,刑启银.奶牛阴离子日粮的配制与应用[J].黄牛杂志,2003,29(3):45~46.【9】Allen,VG,Davies,DC.Milkfever,hypomagneasaemiaandthedownerCOWsyndrome【J】.Br.Vet.J.,1981,137:435~441.【10】Whitaker,D.A.,Kelly,J.M..IncidencedairyCOWSinEnglandandProductioninPasture—BasedofclinicalandsubclinicalhypomagnesaemiainWales[J].Vet.Rec.,1982,110:450~451.inperiparturientdairy【11]Barber,DML,Wright,CL,Maclennan,W.Hypomagnesaemiacows[J].Vet.Record.1983,112:35~36.[12】Braak,vandeAE,Kloostervan、tATh,Malestein,A.InfluenceofonadeficientsupPlvatofmagnesiumduringthedryperiodtherateofcalciummobilisationbydairyCOWS108.andvitamins.In:Feedingthedairvparturition[J].Res.Vet.Sci.,1987,42:101【13】Chamberlain,AT,Wilkinson,JM.Mineralscow[M].Chalcombepublications,GreatBritain,1996.79~94.【14】Horst,RL.RegulationcalciumandphosphorushomeostasisinSci.,1986,69:604~616.thedairycow[J1.J.Dairv[15】Reinhardt,TA,Horst,RinL,Goif,P.Calcium,phosphorus,andmagnesiumhomeostasisruminants[J].Vet.Clin.NoAhAm.FoodAnim.Prac.,1988,4(2):331~350.C.,Rosol,TJ.Calciumregulatinghormonesanddiseasesofabnormalmineral【16】Capen,Cmetabolism.In:Clinicalbiochemistryofdomesticanimals[M].KanekoJ.J.(ed.1.4thDed.AcademicPress,Inc.SanDiego,California,USA,1989.678~752.【17]Horst,RL,Goff,JP,Reinhardt,TA.CalciumandvitaminMetabolisminfhedairv河北农业大学硕士学位论文COW.Symposium:calciummetabolismandutilization[J].J.DairySci.,1994,77:1936~1951.【18】Allen,WM,Sansom,BF.Milkfeverandcalciummetabolism[J].J.Vet.Pharmac01.Therap.,1985,8:19~29.【19】Wasserman,RH.Bones.In:Duke’sphysiologyofdomesticanimals[M].Swenson,M.J(ed.)10thed.Comstock.ComellUniversityPress,USA'1984.467~485.【20】AnnickM,Delaquis,ElliotBlock.Acid—BaseStatus,RenalFunction,Water,andMacromlneralMetabolismofDryCowsFedDietsDifferinginCation—AnionDifference[J].J.DairySci.,1995,78(3):604~619.【21】ErdmanARicrard.Dietarybufferingrequirementsofthelactatingdairycow.AReview【J】.J.DairySci.,1988,71:3246~3266.【221耿世祥,刘光兴,等.添加碳酸氢钠对奶牛生产性能的影响的探讨[J].上海农学院学报,1987,5(4):319~324.【23】Lomba,F,Chauvaux,G,Teller,E,eta1.Calciumdigestibilityinsowsasinfluencedbytheexcessofalkalinaionsoverstableacidionsintheirdiets[J].Br.J.Nutr.,1978,39:425~429.【24】Gaynor,PJ,Mueller,FJ,Miller,JK,ela1.ParturienthypocalcemiainJerseycowsfedalfafahaylagebaseddietswithdifferentcationtoanionrations[J].J.DairySci.,1989,72:2525~2531.【24】Tucker,WB,Harrison,GA,Hemken,RW.Influenceofdietarycation.anionbalanceonmilk,urineandl'llmenfluidinlactationdairycows[J】.J.DairySci.,1988,71:346354.【25】Romo,GA,Kellems,RO,Powell,K,eta1.Somebloodmineralsandhormonesincowsfedvariableminerallevelsandionicbalance[J].J.DairySci.,1991,74:3068~3077.【26】Oetzel,GR,Fettman,MJ,Hamar,DW,eta1.Screeningofanionicsaltsforpalatability.effectsonacidbasestatusandurinarycalciumexcretionindairycows[J].J.DairySci.,1991,74:965~971.【27】West’J.W~Cation—anionbalance:Itsroleinlactatingcownutrition[J].Feedstuffs,1993.10:14~15.【28】Oetzel,G.R—Useofanionicsaltsforpreventionofmilkfeverindairycattle.Comp.Cont.Ed.Pract[J[.Vet.Foo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