葛根素提取工艺研究
张盼盼
陕西国际商贸学院中药学 712046 陕西省咸阳市
【摘 要】葛根是一种中药,在我国安徽、山西、福建、湖南和云南等地有产。葛根中包含葛根素、黄豆甙元和黄甙等成分。葛根素属于黄酮类,为黄色结晶。葛根素对血液循环具有改善作用,对骨代谢具有一定的调节作用,对血小板聚集具有抵抗作用,对心肌收缩力起到增强和保护作用。本文通过设计正交试验,研究可行、科学的葛根素最佳提取工艺。
【关键词】葛根素;提取工艺;试验葛根素能够降低血压,扩张血管,改善微循环,提高造血系统的功能,逆转肝纤维化[1]。葛根素中含有大量的皂苷类化合物质,减轻肝组织免疫损害程度。正交试验是一种对多因素、多水平进行研究的试验方法,在全面试验中将齐整可比、均匀分散、具有代表性的点挑选出来,并对点进行试验,该方式具有快速、高效和经济等优点[2]。以下力求通过设计正交试验,研究葛根素最佳提取工艺。
别为4倍和3倍,体积分数均为60%,提取时间分别为2.5h和2h。水平三:乙醇添加量分别为5倍和4倍,体积分数均为40<,提取时间分别为3h和2.5h。按照三个水平设计9组供试品。
(5)分别对供试品和对照品溶液进行制备。将供试品进行水浴蒸,直至无乙醇味。将残余液与20ml水进行充分混合,溶解后将供试品加入到大孔树脂柱中,对其进行吸附和饱和。将多余水分去掉,使用蒸馏水将供试品中的蛋白质、糖类等去除。使用乙醇
中葛根素的具体含量为9.0ug/1ml。二组供试品中葛根素的具体含量高于其他组,表明乙醇添加量分别为4倍和3倍,体积分数为40%,提取时间分别为1.5h、2h是葛根素的最佳提取工艺,且可行、科学。
3 结束语
葛根具有生津止渴、解表退热和止泻功效,对降血脂、抗炎症和降血糖具有一定效果。葛根素是葛根的主要成分,易溶于热水,能够溶于甲醇、吡啶和乙醇中,难溶于氯仿、苯和乙醚等,能够与醋酸铅和醋酸镁反应,与前者反应生成黄色沉淀,与后者反应后呈黄色。葛根素适用于心肌梗塞、冠心病、突发性耳聋和心绞痛等疾病的临床治疗中,治疗效果较好[3]。随着葛根素在临床治疗中的应用越来越广泛,很多学者加强对葛根素具体提取工艺的相关研究,掌握能耗低、产品纯、操作简便的提取方法。笔者查阅了大量的相关资料和文献,针对葛根素最佳提取工艺设计正交试验,通过称取药材、提取和测定含量等,总结出乙醇添加量分别为4倍和3倍,体积分数为40%,提取时间分别为1.5h、2h是葛根素的最佳提取工艺。本文简单研究葛根素的最佳提取工艺,供学者参考。关于葛根素其他方面的研究仍值得学者和笔者不断研讨。
1 试验设计
1.1 试验材料
试验材料选择干燥葛根,将葛根素作为对照品。试验仪器选择电子天平、高效液相色谱分析仪、分光光度计、高速离心机、干燥箱、薄膜旋转蒸发仪、超声清洗器和精密酸度计等。选择注射用水,其他试剂选择分析纯,乙腈和甲醇选择色谱纯。1.2 试验方法
(1)称取药材。称取药材时应当按照一定的处方比例严格称取。
(2)提取。在称取后的药材中加入60%乙醇,对其进行加热回流并提取。提取次数为3次,每次提取时间为2h,3次提取中乙醇的添加量分别为5倍、4倍和3倍。提取后进行过滤,并对提取液进行收集。
(3)测定含量。使用高效液相法对3种提取液进行测定,测定葛根素的具体含量。本组试验中,第3次提取液内葛根素的具体含量占总含量的3.64%,所占比例较少,表明葛根素的有效成分较少,故本组试验仅对前2次提取液内葛根素的具体含量进行对比。
(4)正交试验。考察因素选择乙醇添加量、体积分数和提取时间。通过正交试验设计三个优选水平。水平一:乙醇添加量分别为3倍和2倍,体积分数均为80%,提取时间分别为2h和1.5h。水平二:乙醇添加量分
对其进行洗脱,对洗脱液进行收集。将正丁醇进行水饱和,并对洗脱液进行提取,提取次数为2次,每次提取10ml和20ml。使用40%乙醇对正丁醇残渣进行溶解,并置于量瓶中,添加40%乙醇,充分摇匀。选取5mg对照品,将其放置于量瓶中,量瓶容量为10ml。使用40%乙醇对其进行溶解,充分稀释后摇匀,从中吸取0.5ml溶液,将其放置于量瓶中,量瓶容量为25ml,使用40%乙醇对其进行溶解,充分稀释后摇匀。对照品规格为10ug/1ml。
(6)测定含量。分别对水平一、水平二和水平三供试品中葛根素的具体含量进行测定,分别对三组进行阴性干扰、回收率、精密度和重现性试验,对比三组供试品与对照品的各项指标差异。总结葛根素的最佳提取工艺。
2 试验结果
本组试验一组供试品中葛根素的具体含量为7.6ug/1ml,二组供试品中葛根素的具体含量为9.8ug/1ml,三组供试品中葛根素的具体含量为8.2ug/1ml,四组供试品中葛根素的具体含量为7.8ug/1ml,五组供试品中葛根素的具体含量为7.7ug/1ml,六组供试品中葛根素的具体含量为8.1ug/1ml,七组供试品中葛根素的具体含量为8.0ug/1ml,八组供试品中葛根素的具体含量为8.5ug/1ml,九组供试品
参考文献
[1]赵二劳,贾鹏燕.葛根有效成分的提取工艺及其解酒功效的研究[J].河南工业大学学报,2012,18(20):45-46.
[2]张振巍,张建民.正交试验优化葛根中葛根素的微波提取工艺[J].中国中医药信息杂志,2012,19(20):81-82.
[3]吴玲玲.超临界CO_2流体提取法提取葛根素及其药效学研究[J].山西大学学报,2013,16(10):41-42.
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