UV1801紫外-可见分光光度计操作
一、打开仪器主机右侧电源开关
稍等约十几秒钟,在仪器的屏幕上出现一个提示“请按键”,说明仪器可以进行自检或连接计算机自检。
二、仪器操作
(1)、仪器所有操作不联接计算机
1、仪器操作不连接计算机
按仪器面板键盘上除“”的其他任意键,仪器进行自检(大约时间2分钟)。
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蓝色液晶显示大屏幕上会出现下列图示情况
仪器使用之前保证有一个平的工作台、稳定的电压,仪器后边离墙约20cm左右,开机后等仪器蓝色液晶大屏幕上五项都显示“OK”后,最好预热时间20分钟以上使用。
按任意键进入仪器操作主菜单。
2、光度测量
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用指垛按数字键1,进入“波长扫描”; 按数字键2,进入“光度测量”; 按数字键3,进入“定量分析”……依次,按数字键6,进入“系统设置”。
按仪器面板上参数设置键“F1”,进入“参数设置”
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比色皿校正,一般看测定要求高低,如果不高的话,可以关着,如果需要则打开。当手形指示位置按左右键可以更改。
输入你所用除参比溶液比色皿的个数,如是1,则说明是一套2只比色皿,直接按面板上“F2”,进行比色皿套性测量;如共是4只,则按面板上“3”,再按“F2”进行比色皿套性测量;
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最后测完,如图显示。
继续按F2进行后边的样品测定。(注:要求每一个比色皿都要装上相同的溶液,以第一个做参比,按照面板提示进行操作,特别提醒的是比色皿的顺序和方向在测定的过程中都不能再改变。)
其实其他的功能操作同上面的基本相似,只要按“上下”方向键可使手形指示图标到相应的位置,打开对应的标签,按照面板提示,选择或输入所需波长及其他参数,按“Enter”键进行编辑确认。
(2、仪器所有操作联接计算机
打开计算机桌面上的,会出现下面的界面。
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点击界面上的“设置”,选择端口、输入仪器后边编号(序列号)进行计算机和仪器的测试联接(一般仪器会自动选择连接端口,如不能连接,可检查端口连接线的联接状况、人为选择端口或重新启动计算机进行连接)。
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确定后,在计算机屏幕右下方会出现一个信息窗口(如下图),会显示仪器编号(序列号),
说明计算机和仪器联接已经建立。
点击计算机屏幕左下方“初始化”按钮,仪器将进行反控自检。
等五项容全部显示“OK”后可选择对应的测试项目,利用仪器进行相关测试。
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注:如果初始化失败,请关闭软件与仪器,看仪器光路是否有挡光块,再重新启动仪器,在氘灯点亮后再打开软件重新连接。
下面对紫外可见分光光度计的联机操作详细情况说明如下:
第一节 光谱扫描
1、单击工具栏菜单上的,便进入光谱扫描测量方式,如图下所示。
所有图谱标签页用来显示所有图谱,其他测量图谱均用新增标签页来显示;
-测量按钮
-停止测量按钮
-波长定位按钮,将波长移动到指定波长
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-扫描参数设置按钮
-数据保存、导入和导出按钮
-图谱四则运算(加、减、乘、除)
-峰谷检测
-光谱变换(其中包括ABS-T%,倒数,对数,平滑和求导运算)
-游标按钮,移动游标查看扫描图谱数据
-打印报告按钮
2、进行参数设置
单击工具栏菜单上的,进行参数设置,如图下所示。
数据测量方式:可以进行Abs(吸光度)、T%(透过率)、E(能量)、R(反射,需要定制的
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反射架)四种测量;
波长围:扫描光谱的围,设置波长最小值不得小于190nm,波长最大值不得大于1100nm;
光度围:扫描结果显示围;设置不合适,测量完毕可以通过在图谱上按鼠标右键定制坐标进行更改;
取样间隔:扫描取样间隔;
扫描速度:分为快、中、慢,速度越快,扫描图谱的细节部分显示比较粗糙,建议做精度要求比较的扫描采用中速或者慢速;
参比测量方式:单次,在测量完毕之后,不更改任何参数,按量样品,不需要测量参比;
继续测量,则直接测
重复,在测量完毕之后,不更改任何参数,按测量样品)
继续测量,则需要测量参比之后才能
结果小数显示位数:结果保留小数位数
扫描方式:单次,则只扫描一次;
重复扫描,按照设定时间间隔和设定的扫描次数进行重复扫描;
保存方式:自动保存,在用户测量完毕系统自动保存把数据保存到用户设置的文件;如果是重复扫描保存文件,则系统自动在文件名后以加_1,_2…….表示依次扫描的文件;
手动保存,系统在扫描完毕提示用户是否保存;
不保存,测量完毕系统不提示也不自动保存,如果用户需要保存测量数据则按界面的保存
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. 按钮进行保存;
重叠:选择它将把多次测量的图谱自动叠加在所有图谱区域(所有图谱标签页上)进行显示,不选择在测量完毕后在所有图谱标签页右键选择图谱叠加按钮手动选择图谱进行叠加;
数据文件:自动保存文件路径以及文件名
样品名称:测量样品名称
备注:
在此可选择测量方式:吸光度Abs、透过率T%,能量E和反射率R(反射测量只有26系列支持),可对波长围、光度围进行设置,可选择取样间隔、扫描速度、参比测量方式、小数点位数、扫描方式、数据保存方式等,设置好所有参数后,点击确定按钮。
系统自动新增图谱1标签页,更新设定的图谱区域横纵坐标(如图下中1所示),并且在测量界面的右下方显示刚才设定的参数(如图下中2所示),右上方表格用来显示测量结果数据(如图下中3所示);最上方的方框(如图下中4所示)在调零过程中显示当前波长,在测量过程中用来显示当前波长和当前光度值;
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3、测量
单击工具栏菜单上的,开始进行测量,提示请将参比拉入光路,将参比液放入样品
池,如下图所示,根据提示,拉入参比,按确定按钮。
参比测量完成,提示将样品拉入光路,如下图所示,根据提示,将参比液取出,放入样品
液,点击OK按钮。图4-1-6
测量完成,提示扫描完成,点击OK,如下图所示,此时界面出现测量结果和相应的图谱,
如图所示。
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图4-1-8
重复性测量,可以手动进行,在单次扫描完毕后,按测量;也可以自动进行重复性
测量,其他参数设置同单次扫描测量,在参数设置中的扫描方式选择重复测量,并设定每次测量间隔时间和重复测量次数,如下图所示,表示重复测量3次,间隔3秒做下一次测量,并且把测量图谱迭加在所有图谱中显示;保存方式可以选择自动保存(每次测量完毕后保存数据,并且文件名称以_1,_2_3等序号表示测量结果,如图所示,3次测量,第一次保存文件名为Spec_1.std,第二次保存文件名为Spec_2,第三次为Spec_3,依次类推),手动保存(每次测量完毕系统提示保存数据)或者不保存(测量完毕不保存文件,用户根据需要自己保存);
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特别说明:
如果仪器正在测量中,用户又按了测量或者波长定位等功能按钮,系统提示如图4-1-10,必须等测量完毕,才可以进行其他操作;
如果仪器没有联机初始化,则系统会提示设备还未准备好,如图4-1-11所示:
图4-1-10图4-1-11
一般情况下重复扫描在单次测量完毕之后按设置,设定相应的时间间隔和测量次数!
继续测量或者在参数设置中选择重复
测量完毕之后如果要开启一个新的测量,可以不退出测量界面,直接按参数按钮进入到参数设置界面,重新设置新的测量参数,设置完毕之后按OK按钮退出,系统自动新增一个新的测量标签页!
在扫基线或者测量过程中,如果按将清空当前测量界面的所有数据,再次按
停止,则在不退出此扫描界面的情况下,系统都
,系统会重新扫基线开始新的测量;
测量完毕后,更改任何一项参数,都将开启一个新的测量窗口;如果更改了测量方式,波长围,取样间隔和参比扫描方式中的任何一项参数,系统都将重新扫基线开启新的测量;更改其他参数则不用重新扫基线!
在关闭测量界面时,系统提示如下图4-1-12所示,选择是,则停留在测量界面,用户根据需要选择数据标签页来保存数据,选择否则直接退出测量界面;
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图4-1-12
4. 附加功能
4.1 图谱调整
测量完毕,在图谱上按鼠标右键,显示如下功能;
其中:
放大:放大图谱
缩小:缩小图谱
选择:局部选择放大
自动调节:自动将图谱缩放到适合大小
恢复设置:坐标恢复到最初设置状态
复制:复制扫描图谱,以便粘贴到word或者excel等
保存:直接将图谱保存成图片格式(bmp,jpg,emf,png四种格式)
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定制坐标:如图设置参数窗体,设置完毕,按确定按钮,图谱将按设置的围进行显示;
通道颜色:在所有图谱界面有效;如图4-1-13所示,双击颜色栏,将弹出如图所示的颜色设置对话框,选择确定,设置完毕按确定按钮,一次设定,以后可不用设置;
图4-1-13
图谱叠加:在所有图谱有效,(如果在参数设置时没有选择图谱叠加加功能,没有关系,这里可以手动叠加,)如图4-1-14所示,每个选项用图谱标签页和扫描波长围,取样间隔共同表示(如图中第一个选项表示,R8-23-3表示标签页属性,190~1100nm表示扫描波长围,1表示取样间隔);选择需要叠加的图谱,按确定按钮,在所有图谱区域显示叠加图谱;迭加以后图谱如图4-1-15所示:
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图4-1-14
图4-1-15
在图谱右边栏(图示划圈处)选择相应的通道单独显示图谱;选择全部显示来显示所有图谱;
全部显示――在所有图谱可用,用来显示全部通道迭加数据;
再次选择图谱叠加则取消图谱叠加!
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4.2 游标
单击工具栏菜单上的按钮,显示一垂直游标,用鼠标拖动可观察数据。也可以通过按
键盘上向左←和向右→箭头进行慢速移动游标,如果需要快速移动游标,按Shift +向左←和向右→箭头进行快速移动游标。
4.3 峰谷检测
选择要进行峰谷检测的图谱,单击工具栏菜单上的按钮,弹出峰谷检测精度设置
窗口,如图4-1-16所示,输入检测精度(峰谷差值满足条件),设置完毕,按确定按钮。系统将峰谷值标注在测量图谱上,并且用列表的形式(峰谷检测数据)将峰谷值显示出来,并且峰谷检测精度将在表格数据的上方显示,如图划红圈处;如图4-1-17所示;
图4-1-16
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图4-1-17
如果峰谷检测精度输入过大,没有满足条件的峰谷值,则提示如图4-1-18所示;
图4-1-18
峰谷检测,如果选择的当前数据停留在所有图谱标签页上,将会提示如图4-1-19所示,这时需要选择其他标签页的数据来进行峰谷检测;
图4-1-19
4.4 光谱变换
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光谱变换是对扫描光谱进行变换,包括以下功能:
A--T%:吸光度与透过率之间的转换;
对数:对扫描光谱进行取对数运算;
倒数 :对扫描光谱求倒数运算;
平滑 :对扫描光谱进行平滑,剔除图谱毛刺;
导数:对扫描图谱进行求导,可以 选择Δλ以及求导阶数;
Δλ:表示在求导时波长间隔的点数;
注意: A--T%,对数, 倒数, 平滑直接选择相应的变换就按确定按钮就好了. 导数运算需要确定Δλ和导数求导阶数.
选择相应的图谱,单击工具栏菜单上的按钮,系统弹出光谱变换选择窗体,如图
4-1-20所示,选择相应的变换类型,点击确定按钮即可,系统将显示变换图谱。如上图测量结果类型为T%,选择ABS-T%,将透过率转换为ABS,按确定按钮,变换图谱如图4-1-21所示,图谱标签页将显示变换的图谱和所做的变换;变换后的图谱保存同测量图谱;
图4-1-20
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图4-1-21
如果选择的当前数据停留在所有标签页上,将会提示如图4-1-22所示,这时需要选择其他标签页的数据来进行峰谷检测;
图4-1-22
4.5 四则运算
单击工具栏上的,可对图谱进行四则运算,如图4-1-23所示,光谱1和光谱2
会把标签页上的所有图谱都显示出来,选择要进行运算的图谱,按确定按钮,图谱将新增一个标签页,用来显示运算后的图谱,如图4-1-24所示
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图4-1-23
图4-1-24
如果波长围,取样间隔和测量方式不同,则不能进行运算,系统提示,参数不匹配,如图4-1-25所示;
图4-1-25
4.6 数据保存和导入
单击工具栏菜单上的,下拉
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,选择保存项保存图谱;导入则导入数
.
据,打开图谱,并且用多标签页显示;导出则导出测量数据到Excel。
4.7 复制表格数据或者图谱
复制图谱:图谱上鼠标右键选择复制;可以把图谱复制到Word或者Excel中;
保存图谱为图片格式:图谱上右键按保存图谱,可以把图谱保存成bmp、jpg、emf和png四种格式;
复制表格数据:Ctrl+A全选所有表格数据,再Ctrl+C复制所有数据;或者鼠标选择需要复制的数据,再按鼠标右键选择复制;
4.8 报告打印
单击工具栏菜单上的,下拉,可预览报告。
4.9 波长定位
单击工具栏上的,弹出如图4-1-26所示窗口,在波长栏输入定位的波长,按确
定按钮;等波长走到指定的波长位置系统自动关闭此窗体;
图4-1-26
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第二节 光度测量
1、单击工具栏菜单上的,便进入光度测量方式,如图4-2-1所示。
图4-2-1
-测量按钮
-停止测量按钮
-波长定位
-参数设置按钮
-数据保存、导入和导出按钮
-打印报告按钮
2、进行参数设置
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单击工具栏菜单上的
,进行参数设置,如图4-2-2所示。
图4-2-2
在此可选择测量方式:进入常规设置,用以设置以下参数,吸光度Abs和透过率T%,选择小数点位数和参比测量方式,可对波长设置进行修改,对于波长设置,
数据测量方式:Abs(吸光度)、T%(透过率)
小数位数:结果小数显示位数;
参比测量方式:单次,在测量完毕之后,不更改任何参数,按量样品,不需要测量参比;
继续测量,则直接测
重复,在测量完毕之后,不更改任何参数,按测量样品)
继续测量,则需要测量参比之后才能
重复测量:无,表示只测量一次;
重复测量,设定重复次数N,进行N次测量
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数据文件:自动保存文件路径及文件名
波长设置:
――添加波长键,单击此键可增加波长个数,用户根据需要添加所需波长个数;添
加的波长将依次用A、B、C……表示;
――删除波长键,选择不需要的波长,按删除即可;
――修改波长按钮,选择相应的波长,在波长框输入需要的波长,按修改即可;
――用以清空所有波长列表;
参数设置中的公式设置栏,在标题栏累输入标题,在容栏里输入计算公式,按添加即可;如图4-2-3所示,其他删除、修改和清除功能用法同波长设置;
图4-2-3
参数设置完毕,点击确定按钮。
特别说明:
参数设置时,不能添加相同的波长,否则在按确定按钮确认参数时,系统将提示,如图4-2-4
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所示;
图4-2-4
考虑到报表打印的,添加波长和公式个数最多为7个,否则将提示,如图4-2-5,这时根据需要删减波长数或者公式数;
图4-2-5
公式是对测量结果作四则运算,所以在输入公式过程中一定要根绝波长的编号来输入,否则系统将不予接受!比如只测量了两个波长,公式中只能出现A、B,不能有C、D等其他出现!
3、测量
单击工具栏菜单上的,开始进行测量,提示请将参比拉入光路,将参比液放入样品
池,如图4-2-6所示,根据提示,拉入参比,按确定按钮。
图4-2-6
参比测量完成,提示将样品拉入光路,如图4-2-7所示,根据提示,将参比液取出,放入样品液,点击OK按钮。
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图4-2-7
测量完成,此时界面出现测量结果,如图4-2-8所示,其中标号列表
示样池号;手动仪器没有什么意义;
图4-2-9
特别说明:
如果仪器正在测量中,用户又按了测量或者波长定位等功能按钮,系统提示如图4-2-10,必须等测量完毕,才可以进行其他操作;
如果仪器没有联机初始化,则系统会提示设备还未准备好,如图4-2-11所示:
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图4-2-10
一般情况下重复测量在单次测量完毕之后按置,设定相应的测量次数来进行;
图4-2-11
继续测量或者在参数设置中选择重复设
测量完毕之后如果要开启一个新的测量,可以不退出测量界面,直接按参数按钮进入到参数设置界面,重新设置新的测量参数,设置完毕之后按OK按钮退出,系统自动新增一个新的测量标签页!
在调零或者测量过程中,如果按清空当前测量界面的所有数据,再次按
停止,则在不退出此测量界面的情况下,系统都将
,系统会重新调零开始新的测量;
测量完毕后,更改任何一项参数,都将开启一个新的测量窗口;如果更改了测量方式,波长,参比扫描方式中的任何一项参数,系统都将重新调零开启新的测量;更改其他参数则不用重新调零!
在关闭测量界面时,系统提示如图4-2-12所示,选择Y,则停留在测量界面,用户根据需要选择数据标签页来保存数据,选择N则直接退出测量界面;
图4-2-12
4.附加功能
4.1 数据保存和导入
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单击工具栏菜单上的,下拉,选择保存项保存图谱;导入则导入数
据,打开图谱,并且用多标签页显示;导出则导出测量数据到Excel。
4.2 复制表格数据
复制表格数据:Ctrl+A全选所有表格数据,再Ctrl+C复制所有数据;或者鼠标选择需要复制的数据,再按鼠标右键选择复制;
4.3 报告打印
单击工具栏菜单上的,下拉,可预览报告。
如果报表的表格宽度显示不太满意,可以通过用鼠标拖动表格竖线来调整测量界面表格宽度来调整报表的宽度,预览满意后打印即可!
4.4 波长定位
单击工具栏上的,弹出如图4-2-15所示窗口,在波长栏输入定位的波长,按确
定按钮;等波长走到指定的波长位置系统自动关闭此窗体;
图4-2-15
第三节 动力学测量
1、单击工具栏菜单上的,便进入动力学测量方式,如图4-3-1所示。
所有图谱标签页用来显示所有图谱,其他测量图谱均用新增标签页来显示;
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图4-3-1
-测量按钮
-停止测量按钮
-波长定位按钮,将波长移动到指定波长
-扫描参数设置按钮
-数据保存、导入和导出按钮
-图谱四则运算(加、减、乘、除)
-峰谷检测
-光谱变换(其中包括ABS-T%,倒数,对数,平滑和求导运算)
-游标按钮,移动游标查看扫描图谱数据
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-打印报告按钮
2、进行参数设置
单击工具栏菜单上的,进行参数设置,如图4-3-2所示。
图4-3-2
数据测量方式:Abs(吸光度)、T%(透过率)、E(能量)
光度围:测量结果显示围
时间(S):测量时间
取样间隔(S):间隔多长时间采样一次;
波长(nm):在哪个波长下测量;
参比测量方式:单次,在测量完毕之后,不更改任何参数,按量样品,不需要测量参比;
继续测量,则直接测
重复,在测量完毕之后,不更改任何参数,按
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继续测量,则需要测量参比之后才能
. 测量样品)
小数显示位数:结果小数显示位数
扫描方式:单次,只扫描一次;
重复,在设定的时间间隔下重复扫描设定的重复次数;
保存方式:自动保存,手动保存不保存,在此不详述了,参见光谱扫描;
重叠:选择它在多次测量时将把图谱自动迭加在所有图谱区域进行显示,不选择在测量完毕可以在所有图谱手动迭加图谱
数据文件:自动保存文件路径和文件名
样品名称:扫描样品名称;
在此可选择测量方式:吸光度Abs、透过率T%和能量E,可对光度围、时间围、时间间隔、波长、结果小数显示位数,扫描方式(单次,重复,自动),保存方式、是否图谱叠加等参数进行设置;设置完成后,点击确定按钮。
系统自动新增图谱1标签页,更新设定的图谱区域横纵坐标(如图4-3-3中1所示),并且在测量界面的右下方显示刚才设定的参数(如图4-3-3中2所示),右上方表格用来显示测量结果数据(如图中4-3-3中3所示);最上方的方框(如图4-3-3中4所示)在测量过程中显示当前测量时间和当前光度值;
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图4-3-3
3、测量
单击工具栏菜单上的,开始进行测量,提示请将参比拉入光路,将参比液放入样品
池,如图4-3-4所示,根据提示,拉入参比,点击OK按钮。
图4-3-4
参比测量完成,提示将样品拉入光路,如图4-3-5所示,根据提示,将参比液取出,放入样品液,点击OK按钮。
图4-3-5
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测量完成,提示扫描完成,按OK按钮,如图4-3-6所示,此时界面出现测量结果和相应的图谱并提示测量完成,扫描图谱如图4-3-7所示。
图4-3-6
图 4-3-7
重复性测量同光谱扫描,请参照光谱扫描设置;
特别说明:
如果仪器正在测量中,用户又按了测量,或者波长定位等功能按钮,系统提示如图4-3-8,必须等测量完毕,才可以进行其他操作;
如果仪器没有联机初始化,则系统会提示设备还未准备好,如图4-3-9所示:
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图4-3-8图4-3-9
一般情况下重复扫描在单次测量完毕之后按置,设定相应的时间间隔和测量次数!
继续测量或者在参数设置中选择重复设
测量完毕之后如果要开启一个新的测量,可以不退出测量界面,直接按参数按钮进入到参数设置界面,重新设置新的测量参数,设置完毕之后按OK按钮退出,系统自动新增一个新的测量标签页!
在调零或者测量过程中,如果按清空当前测量界面的所有数据,再次按
停止,则在不退出此扫描界面的情况下,系统都将
,系统会重新调零开始新的测量;
测量完毕后,更改任何一项参数,都将开启一个新的测量窗口;如果更改了测量方式,波长,扫描时间,取样间隔中的任何一项参数,系统都将重新调零开启新的测量;更改其他参数则不用重新调零!
在关闭测量界面时,系统提示如下图所示,选择Y,则停留在测量界面,用户根据需要选择数据标签页来保存数据,选择N则直接退出测量界面;
4.附加功能
4.1 图谱调整
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测量完毕,在图谱上按鼠标右键,显示如下功能;其中:
放大:放大图谱
缩小:缩小图谱
选择:局部选择放大
自动调节:自动将图谱缩放到适合大小
恢复设置:图谱坐标恢复到最初设置状态
复制:复制扫描图谱,以便粘贴到word或者excel等
保存:直接将图谱保存成图片格式(bmp,jpg,emf,png四种格式)
定制坐标:如图4-3-10的参数设置窗体,设置完毕,按确定按钮,图谱将按设置的围进行显示;
图4-3-10
通道颜色:在所有图谱界面有效;如图4-3-11所示,双击颜色栏,将弹出如图所示的颜色
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设置对话框,选择确定,设置完毕按确定按钮,一次设定,以后可不用设置;
图4-3-11
图谱迭加:(如果在参数设置时没有选择图谱迭加功能,没有关系,这里可以手动迭加)如图4-3-12所示,每个选项用图谱标签页和扫描时间,取样间隔共同表示(如图中第一个选项表示,Da_0表示标签页属性,0~10s表示扫描时间围,1表示取样间隔);选择需要迭加的图谱,按确定按钮,在所有图谱区域显示迭加图谱;迭加以后图谱如图4-3-13所示:
图4-3-12
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图4-3-13
在图谱右边栏(图示划圈处)选择相应的通道单独显示图谱;选择全部显示显示所有图谱;
再次选择图谱叠加则取消图谱叠加!
4.2 游标
单击工具栏菜单上的按钮,显示一垂直游标,用鼠标拖动可观察数据。也可以通过按
键盘上向左←和向右→箭头进行慢速移动游标,如果需要快速移动游标,按Shift +向左←和向右→箭头进行快速移动游标。
4.3 峰谷检测
选择相应的图谱,单击工具栏菜单上的按钮,弹出峰谷检测精度设置窗口,如图
4-3-14所示,输入检测精度(峰谷差值满足条件),设置完毕,按确定按钮。系统将峰谷值标注在测量图谱上,并且用列表的形式(峰谷检测数据)将峰谷值显示出来;如图4-3-15
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所示:
图4-3-14
图4-3-15
如果峰谷检测精度输入过大,没有满足条件的峰谷值,则提示如
图4-3-16所示;图4-3-16
峰谷检测,如果选择的当前数据停留在所有标签页上,将会提示如图4-3-17所示,这时需
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要选择其他标签页的数据来进行峰谷检测;
图4-3-17
4.4光谱变换
光谱变换是对扫描光谱进行变换,包括以下功能:
A--T%:吸光度与透过率之间的转换;
对数:对扫描光谱进行取对数运算;
倒数 :对扫描光谱求倒数运算;
平滑 :对扫描光谱进行平滑,剔除图谱毛刺;
导数:对扫描图谱进行求导,可以 选择Δt以及求导阶数;
Δt:表示在求导时波长间隔的点数;
注意: A--T%, 对数, 倒数, 平滑直接选择相应的变换就按确定按钮就好了. 导数运算需要确定Δt和导数求导阶数.
单击工具栏菜单上的按钮,系统弹出光谱变换选择窗体,如图4-3-18所示,选
择相应的变换类型,点击确定按钮即可,系统将显示变换图谱。如上图测量结果类型为T%,选择ABS-T%,ABS和T%相互转换,按确定按钮,变换图谱如图4-3-19所示;
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图4-3-18
图4-3-19
如果选择的当前数据停留在所有标签页上,将会提示如图4-3-20所示,这时需要选择其他标签页的数据来进行峰谷检测;
图4-3-20
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4.5 四则运算
单击工具栏上的,可对图谱进行四则运算,如图4-3-21所示,选择要进行运算
的图谱,按确定按钮,图谱将新增一个标签页,用来显示运算后的图谱,如图4-3-22显示图谱1和图谱2相加后的图谱;
图4-3-21
图4-3-22
如果扫描时间围,取样间隔和测量方式不同,则不能进行运算,系统提示,参数不匹配,如图4-3-23所示;
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图4-3-23
4.6 数据保存和导入
单击工具栏菜单上的,下拉,选择保存项保存图谱;导入则导入数
据,打开图谱,并且用多标签页显示;导出则导出测量数据到Excel。
4.7 复制表格数据或者图谱
复制图谱:图谱上鼠标右键选择复制;可以把图谱复制到Word或者Excel中;
保存图谱为图片格式:图谱上右键按保存图谱,可以把图谱保存成bmp、jpg、emf和png四种格式;
复制表格数据:Ctrl+A全选所有表格数据,再Ctrl+C复制所有数据;或者鼠标选择需要复制的数据,再按鼠标右键选择复制;
4.8 报告打印
单击工具栏菜单上的,下拉,可预览报告。
4.9 波长定位
单击工具栏上的,弹出如图4-3-24所示窗口,在波长栏输入定位的波长,按确
定按钮;等波长走到指定的波长位置系统自动关闭此窗体;
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图4-3-24
第四节 定量分析
1、单击工具栏菜单上的,便进入定量分析测量方式,如图4-4-1所示。
图4-4-1
-测量按钮
-停止按钮
-波长定位
-参数设置按钮
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-建立曲线按钮
-数据保存和导入、导出按钮
-报告打印按钮
2、进行参数设置
单击工具栏菜单上的,进行参数设置,如图4-4-2,4-4-3所示。
参数设置可对波长测量方法(包括单波长法,双波长系数倍率法,双波长等吸收点法,三波长法)、测量波长进行设置,并可选择参比测量方式,以及计算公式,测量方法(浓度法和系数法,系数法需要在系数设置中输入曲线拟合系数),零点插入,选择它,拟合曲线将过零点;
图 4-4-2
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图4-4-3
方法:可进行单波长标准系数法、双波长等吸收点法、双波长系数倍率法和三波长法测量;
波长:在哪个波长下测量
参比测量方式:单次,在测量完毕之后,不更改任何参数,按量样品,不需要测量参比;
继续测量,则直接测
重复,在测量完毕之后,不更改任何参数,按测量样品;
继续测量,则需要测量参比之后才能
计算公式
次数:拟合曲线方程次数;
浓度单位:测量样品的浓度单位
浓度法:未知拟合曲线的情况下用;
系数法:已知拟合曲线的系数使用
保存方式:自动保存,手动保存不保存,在此不详述了,参见光谱扫描;
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数据文件:自动保存文件路径和文件名
样品名称:扫描样品名称;
3、建立标准曲线(针对浓度法)
曲线的建立至少要用两点法建立(在参数选择里边如果选择了零点插入,建立曲线过零点),鼠标选择标样测量,标样栏上方
将变成
;
单击工具栏菜单上的,开始进行测量,提示请将参比拉入光路,将参比液放入样品
池,如图4-4-4所示,根据提示,拉入参比,点击确定按钮。
图4-4-4
参比测量完成,提示将样品拉入光路,如图4-4-5所示,根据提示,将参比液取出,放入标样样品液,点击确定按钮。
图4-4-5
标样测量完毕,在浓度栏输入对应标样的浓度值,按
进行曲线拟合。界面上显示出
以上测量参数所建立的曲线,并且显示拟合的相关系数和建立的曲线方程,如图4-4-6所示。
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图4-4-6
如果拟合曲线因为个别参比测量结果不理想,可以在标样栏点击右键,选择需要删除的标样,如图4-4-7所示,选择删除,系统提示选择是否删除该条数据,选择是,按确定删除该条数据;然后重新测量标样和拟合曲线;
如果拟合曲线因为个别参比测量结果不理想,可以在标样栏点击右键,选择需要删除的标样,如图4-4-7所示,按删除就可以了;然后重新测量标样和拟合曲线;
图4-4-7
4、测量浓度
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将未知样放入样品池,鼠标光标点击界面右下方的未知样处,使
,单击工具栏菜单上的
根据提示,放入未知样样品液,点击OK按钮。
变成
,提示将样品拉入光路,如图4-4-8所示,
图4-4-8
未知样浓度测量结果如图4-4-9所示:
图4-4-9
5.系数法
在测量方法一栏选择系数法,输入已知曲线的系数,如图4-4-10所示,其他参数设置方法同浓度法,按确定按钮确认以后,在测量界面会根据设定的曲线方程画出曲线;如图4-4-11所示:
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图4-4-10
图4-4-11
参数设置完毕,将未知样放入样品池,鼠标光标点击界面右下方的未知样处,使
,单击工具栏菜单上的
变成
,开始进行测量;其他测量步骤同浓度法;
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特别说明:
如果仪器正在测量中,用户又按了测量,或者波长定位等功能按钮,系统提示如图4-4-12,必须等测量完毕,才可以进行其他操作;
如果仪器没有联机初始化,则系统会提示设备还未准备好,如图4-4-13所示:
图4-4-12图4-4-13
如果没有选标样栏或未知样栏,直接按测量,系统不会有任何反应!
测量完毕之后如果要开启一个新的测量,可以不退出测量界面,直接按参数按钮进入到参数设置界面,重新设置新的测量参数,设置完毕之后按OK按钮退出,系统自动新增一个新的测量标签页!
在调零或者测量过程中,如果按清空当前测量界面的所有数据,再次按
停止,则在不退出此测量界面的情况下,系统都将
,系统会重新调零开始新的测量;
测量完毕后,更改任何一项参数,都将开启一个新的测量窗口;如果更改了波长,参比扫描方式中的任何一项参数,系统都将重新调零开启新的测量;更改其他参数则不用重新调零!
在关闭测量界面时,系统提示如图4-4-14所示,选择Y,则停留在测量界面,用户根据需要选择数据标签页来保存数据,选择N则直接退出测量界面;
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图4-4-14
在参数设置中,不能设置相同的波长!否则将提示,如图4-4-15
图4-4-15
6.附加功能
6.1 数据保存和导入
单击工具栏菜单上的,下拉,选择保存项保存图谱;导入则导入数据,
打开图谱,并且用多标签页显示;导出则导出测量数据到Excel。
6.2复制表格数据或者拟合曲线
复制拟合曲线:拟合曲线区域上鼠标右键选择复制;可以把拟合曲线复制到Word或者Excel中;
保存拟合曲线为图片格式:拟合曲线区域上右键按保存拟合曲线,可以把拟合曲线保存成bmp、jpg、emf和png四种格式;
复制表格数据:Ctrl+A全选所有表格数据,再Ctrl+C复制所有数据;或者鼠标选择需要复制的数据,再按鼠标右键选择复制;
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6.3报告打印
单击工具栏菜单上的,下拉,可预览报告。
如果报表的表格宽度格式显示不太满意,可以通过用鼠标拖动未知样表格竖线来调整测量界面表格宽度来调整报表的宽度,预览满意后打印即可!
6.4 波长定位
单击工具栏上的,弹出如图4-4-21所示窗口,在波长栏输入定位的波长,按确
定按钮;等波长走到指定的波长位置系统自动关闭此窗体;
图4-4-21
第五节 DNA和蛋白质测量
单击工具栏菜单上的,便进入DNA/蛋白质测量方式,如图4-5-1所示。
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图4-5-1
-测量按钮
-停止测量按钮
-波长定位
-参数设置按钮
-数据保存、导入和导出按钮
-打印报告按钮
2、进行参数设置
单击工具栏菜单上的,进行参数设置,如图4-5-2所示。
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图4-5-2
通常蛋白质测量方法有A230/A260和A280/A260两种方法(用户也可以自定义方法进行测量,设定相应波长和系数),选择相应的方法,系数已经设定好,不需要设定。设置其他参数(浓度单位,结果小数显示位数,参比测量方式,重复测量,文件保存等参数);
测量方法:A230/A260、A280/A260和用户自定义法,前两种方法的波长、DNA和蛋白质系数都已经设定好,不需要重新再设;用户自定义法需要用户设定测量波长、DNA和蛋白质系数;
浓度单位:被测量样品的浓度单位;
小数显示位数:结果小数显示位数;
参比测量次数:单次,在测量完毕之后,不更改任何参数,按量样品,不需要测量参比;
继续测量,则直接测
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重复,在测量完毕之后,不更改任何参数,按测量样品)
继续测量,则需要测量参比之后才能
重复测量:无,表示只测量一次;
重复测量,设定重复次数N,进行N次测量
数据文件:自动保存文件路径及文件名
参数设置完毕,按确定按钮确认。
3、测量
单击工具栏菜单上的,开始进行测量,提示请将参比拉入光路,将参比液放入样品
池,如图4-5-3所示,根据提示,拉入参比,点击OK按钮。
图4-5-3
参比测量完成,提示将样品拉入光路,如图4-5-4所示,根据提示,将参比液取出,放入样品液,点击OK按钮。
图4-5-4
测量完成,提示扫描完成,按OK按钮,如图4-5-5所示,此时界面出现测量结果,如图4-5-6所示。
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图4-5-5
图4-5-6
特别说明:
如果仪器正在测量中,用户又按了测量或者波长定位等功能按钮,系统提示如图4-5-6,必须等测量完毕,才可以进行其他操作;
如果仪器没有联机初始化,则系统会提示设备还未准备好,如图4-5-7所示:
图4-5-6
一般情况下重复测量在单次测量完毕之后按
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图4-5-7
继续测量或者在参数设置中选择Repeat
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设置,设定相应的测量次数来进行;
测量完毕之后如果要开启一个新的测量,可以不退出测量界面,直接按参数按钮进入到参数设置界面,重新设置新的测量参数,设置完毕之后按OK按钮退出,系统自动新增一个新的测量标签页!
在调零或者测量过程中,如果按清空当前测量界面的所有数据,再次按
停止,则在不退出此测量界面的情况下,系统都将
,系统会重新调零开始新的测量;
测量完毕后,更改任何一项参数,都将开启一个新的测量窗口;如果更改了测量方式,波长,参比扫描方式中的任何一项参数,系统都将重新调零开启新的测量;更改其他参数则不用重新调零!
在关闭测量界面时,系统提示如图4-5-8所示,选择Y,则停留在测量界面,用户根据需要选择数据标签页来保存数据,选择N则直接退出测量界面;
图4-5-8
在参数设置中,不能设置相同的波长!否则将提示,如图4-5-9
4-5-9
4.附加功能
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4.1 数据保存和导入
单击工具栏菜单上的,下拉,选择保存项保存图谱;导入则导入数据,
打开图谱,并且用多标签页显示;导出则导出测量数据到Excel。
4.2 报告打印
单击工具栏菜单上的,下拉,可预览报告。
4.3 复制表格数据
按Ctrl+A全选所有数据,再按Ctrl+C复制所有数据;
或者鼠标移动选择表格数据,然后右键选择复制;
4.4 波长定位
单击工具栏上的,弹出如图4-5-10所示窗口,在波长栏输入定位的波长,按确
定按钮;等波长走到指定的波长位置系统自动关闭此窗体;
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图4-5-10
第六节仪器相关操作
1.设置换灯点
选择菜单仪器-设置换灯点,进入换灯点设置界面,如图4-6-1所示,输入换灯点,按确定按钮确认,设置完毕窗体自动关闭。
注意:必须仪器通过初始化才可以设定!设置完毕,只要仪器一直处于开机状态,保存换灯点!换灯点设置断电不保存,下次开机仪器换灯点回到仪器的设置的换灯点!
图4-6-1
2.波长定位
选择菜单仪器-波长定位,进入换灯点设置界面,如图4-6-2所示,在波长栏输入定位的波长,按确定按钮;等波长走到指定的波长位置系统自动关闭此窗体;
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注意:必须仪器通过初始化才可以设定!
图4-6-2
3.开/关氘灯
选择菜单仪器-开/关氘灯,进入氘灯开关界面,如图4-6-3所示,开氘灯,选择开,按确定按钮;关氘灯,选择关,按确定按钮!
注意:必须仪器通过初始化才可以设定!
图4-6-3
仪器如果初始化成功,打开该窗体,系统自动读取当前氘灯状态,氘灯开,则开氘灯选中,氘灯关,则关氘灯选中;
关闭氘灯,选则关氘灯,按确定按钮,如果关氘灯成功,则系统提示,按OK按钮关退出设定界面;
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图4-6-4
开氘灯,选则开氘灯,按确定按钮,系统显示“请稍等……”,如果开氘灯成功,大约十秒左右,则系统提示,开氘灯成功,否则提示开氘灯失败,按OK按钮,退出设定界面;
图4-6-5
4.比色皿校正
选择菜单仪器-比色皿校正,进入比色皿校正界面,如图4-6-6所示,系统默认是比色皿关,需要进行比色皿校正选择开,将会出现如图4-6-7所示的参数设置界面,设置需要校正的比色皿个数(除参比),以及在哪个或哪些波长下校正。
图4-6-6图4-6-7
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――添加波长键,单击此键可增加波长个数,用户根据需要添加所需波长个数;添
加的波长将依次用A、B、C……表示;
――删除波长键,选择不需要的波长,按删除即可;
――修改波长按钮,选择相应的波长,在波长框输入需要的波长,按修改即可;
――用以清空所有波长列表;
比色皿校正:比如校正两个比色皿(除去参比),在比色皿个数处输入2,设置波长为500nm和600nm;参数设置完毕,按校正按钮开始校正!如图4-6-8所示;
图4-6-8
系统提示提示请将参比拉入光路,将作为参比的比色皿放入样品池,拉入光路,如图4-6-9所示,根据提示,拉入参比,按确定按钮。
图4-6-9
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参比测量完毕,系统提示请将1号比色皿拉入光路,如图4-6-10所示,根据提示,拉入1号比色皿,按确定按钮。
图4-6-10
1号校正完毕,系统提示将2号比色皿拉入光路,如图4-6-11所示,根据提示,拉入2号比色皿,按确定按钮;
图4-6-11
校正完毕,系统自动关闭比色皿校正窗体!
校正完毕,下面就可以进行光度测量或者定量分析了,以光度测量为例,打开光度测量界面,添加两个波长,将波长设置为500nm和600nm(跟比色皿校正时设置的波长一样),如图4-6-12所示;
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图4-6-12
测量:
在比色皿校正完毕的前提下,单击工具栏菜单上的,开始进行测量,系统弹出比色
皿选择窗体,如图图4-6-13所示,选择所有已校正的比色皿(此时不能设置比色皿了),则对刚才校正的1号和2号比色皿都进行样品测量;否则,在比色皿栏输入要用的比色皿,因为校正了两个,所以只能输入1或者2;输入几,则对几号比色皿样品进行测量。
本例选择所有已校正的比色皿,如图图4-6-13所示,按确定按钮开始测量;
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图4-6-13
系统提示请将参比拉入光路,如图4-6-14所示,根据提示,将参比拉入光路,按确定按钮。
图4-6-14
参比测量完毕,系统提示请将1号比色皿拉入光路,如图4-6-15所示,根据提示,将1号比色皿样品液拉入光路,按确定按钮。
图4-6-15
1号测量完毕,系统提示请将2号比色皿拉入光路,如图4-6-16所示,根据提示,将2号比色皿样品液拉入光路,按确定按钮。
图4-6-16
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测量完毕,测量结果如下所示,在样池号一栏显示比色皿编号,在常规测量中显示为0,如图4-6-17所示:
图4-6-17
其他定量分析和DNA/蛋白质使用比色皿测量方法一样!先校正后测量!
注意:
(1)比色皿个数(除参比):除去参比以外的需要校正的比色皿的个数;最小为1;
(2) 波长设置时,不能设置相同的波长,波长数目不能超过七个(配合光度测量不能超过七个,因报表!)!
(3) 如在测量中需要对比色皿进行校正,那么在校正比色皿的时候波长设置数目和波长值必须一致;一旦更改波长,则需要重新进行比色皿校正!
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(4)比色皿校正设置为开的时候,在光度测量,定量分析和DNA/蛋白质测量的时候都使用比色皿校正的值;光谱扫描和时间扫描仍然为常规测量;
(5)如果之前进行了比色皿校正,而现在的测量不需要比色皿校正了,不用关闭软件,只需要在菜单-比色皿校正界面(如图4-6-6)选择关,按确定按钮就可以了!反之,如果之前进行的是常规测量,而现在需要比色皿校正测量,则在比色皿校正界面输入需要校正的比色皿个数和波长值,按校正按钮进行校正!校正完毕开始测量就可以了;
由常规测量转为比色皿校正测量,或者由比色皿校正测量转为常规测量时,系统都将自动开启一个新的测量页面。
(6)如果整个软件没有关闭,系统都将保存当前的比色皿校正结果,比色皿校正界面显示参数也是最近一次参数设置!
(7)软件在正常关闭时,无论当前比色皿状态是开还是关,都将把状态设置为关,下次打开软件,比色皿校正界面的状态为关!也不会记忆校正结果!
(8)如果正在进行比色皿校正,按取消按钮,则停止校正!
(9)比色皿校正完毕,比色皿校正界面自动关闭!
第七节 测试报告设置及打印
单击工具栏菜单上的,可编辑报表打印相关容,如图4-7-1所示。
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图4-7-1
编辑好以上容,按确定按钮。
70 / 70
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