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核型分析protocol

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核型分析PROTOCOL(张亮):

试剂准备:1%的柠檬酸三钠,3倍甲醇和1倍乙酸混合物

操作步骤:

1, 口吸管吸取20个活卵到37度1%的柠檬酸三钠液滴中20分钟(置于湿盒)。 2, 逐个转移两个卵子到载玻片上,注意不要吸过多的柠檬酸钠液体。 3, 用吸15微升配好的甲醇乙酸混合物从1.5厘米高处垂直砸向卵子,注意头使用前先

用剪刀剪一下,扩大头顶部开口易于混合液滴下落。

4, 在混合液干燥前迅速标记卵子的位置(混合液干燥后无法看到卵子)。 5, 晾干后加PI染色液。

6, 待PI染色液未干时加盖玻片。 7, 显微镜下观察并拍照。

8, 好的结果如图2,卵母细胞的染色体分散均匀,每个染色体都能清楚鉴别,并且与极体

染色体也能轻易区分。图1则无法辨别各个染色体,与极体染色体混为一体。

图1

图2

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