基于大肠杆菌表达系统的制备多肽的方法

（12）发明专利申请

（21）申请号 CN201711350063.X （22）申请日 2017.12.15 （71）申请人 南京理工大学

地址 210094 江苏省南京市孝陵卫200号

（10）申请公布号 CN108048477A

（43）申请公布日 2018.05.18

（72）发明人 周敏;李霖;卢颖洪;洪涛;周文昭;马文龙;宁瑞琦;卢明龙 （74）专利代理机构 南京理工大学专利中心

代理人 刘海霞

（51）Int.CI

权利要求说明书 说明书 幅图

（）发明名称

基于大肠杆菌表达系统的制备多肽的方法

（57）摘要

本发明公开了一种基于大肠杆菌表达系统

的制备多肽的方法。所述方法先将多肽的目的基因重组到载体质粒中，将重组质粒转化进大肠杆菌DH5α，扩增重组质粒，通过抗性基因进行筛选，并测序验证，获得重组质粒转化成功的大肠杆菌DH5α，并通过碱裂解法提取重组质粒，再将重组质粒转化进入大肠杆菌BL21(DE3)Star pLysS菌株中，诱导目的多肽的表达，培养并收集菌体，最后将菌体用PBS缓冲液重悬、破碎、

离心取沉淀，利用含有Triton X‑100的缓冲溶液重复重悬和离心步骤，反复清洗沉淀，然后溶解沉淀得到目的多肽。本发明利用大肠杆菌菌株BL21(DE3)Star和高表达量形成的包涵体，极大地提高多肽产量的同时简化了多肽纯化的步骤，提高了多肽的纯度，在基因重组制备多肽领域具有应用前景。

法律状态

法律状态公告日2018-05-18 2018-05-18 2018-06-12

法律状态信息

公开 公开

实质审查的生效

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权利要求说明书

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说明书

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