中外医疗2019NO.15China&ForeignMedicalTreatmentDOI院10.16662/j.cnki.1674-0742.2019.15.196白血病小鼠模型的构建与应用1.桂林医学院临床医学院袁广西桂林胡燕宁1袁刘小高1袁董敏2541004曰2.桂林医学院附属医院血液科袁广西桂林541001[摘要]临床上针对白血病的发病机制以及治疗方案的探索一直都是大家普遍关注的问题袁而白血病细胞小鼠白血病模型的建立则是实现这一目标的重要途径及手段遥在该次研究中首先介绍了白血病的致病因素及其分类袁接着阐述了建立白血病模型的小鼠类型以及白血病细胞小鼠白血病模型的构建方法袁最后探讨了白血病细胞小鼠白血病模型的应用前景袁以供参考遥[关键词]白血病曰小鼠模型曰致病因素曰应用前景[中图分类号]R733[文献标识码]A[文章编号]1674-074圆渊圆园员9冤05渊c冤原园196-03ConstructionandApplicationofLeukemiaMouseModelHUYan-ning1,LIUXiao-gao1,DONGMin21.DepartmentofClinicalMedicine,GuilinMedicalCollege,Guilin,Guangxi,541004China;2.DepartmentofHematology,AffiliatedHospitalofGuilinMedicalCollege,Guilin,Guangxi,541001China[Abstract]Theclinicalinvestigationofthepathogenesisandtreatmentofleukemiahasalwaysbeenacommonconcern,andtheestablishmentofleukemiacellleukemiamodelisanimportantwayandmeanstoachievethisgoal.Inthisstudy,theauthorfirstintroducedthepathogenicfactorsandclassificationofleukemia,andthendescribedthemousetypeofleukemiamodelandtheconstructionmethodofmouseleukemiamodelofleukemiacells.Finally,theapplicationofmouseleukemiamodelinleukemiacellswasdiscussedforreference.[Keywords]Leukemia;Mousemodel;Pathogenicfactors;Applicationprospects白血病属于目前临床上的一种常见疾病类型袁该病症以人体中的造血细胞失控性增殖为主要特点,该病属于造血干细胞恶性克隆性疾病袁克隆性白血病细胞因为凋亡受阻尧分化障碍以及增殖失控等机制在骨髓和其他造血组织中大量增殖累积袁并浸润其他非造血组织和器官袁同时对骨髓中的造血细胞的造血功能具病制定和进行了许多的研究袁并提出在白血病的患病过程中肿瘤干细胞起着极为关键的作用袁并且这对该病的发病机制和病因建立起一套科学的模型进行研1白血病的致病因素及其分类1.1白血病的致病因素白血病属于临床上一种常见病症类型袁其直接致[基金项目]国家自然科学基金项目渊81560032冤遥北京医卫健康公益基金会医学科学研究基金资助项目渊YWJKJJHKYJJ-B17485冤遥[作者简介]胡燕宁渊1994-冤袁女袁江苏南通人袁在读硕士袁研究方向院急性髓系白血病干细胞遥[通讯作者]董敏渊1972-冤袁女袁黑龙江哈尔滨人袁博士袁教授袁研究方向院血液系统疾病治疗新技术的探索袁E-mail院dm1175@sina.cn遥196中外医疗China&ForeignMedicalTreatment病原因为人体中的造血干细胞出现恶性增殖袁进一步致使患者的造血组织以及骨髓中出现大量无核白血细胞,该类细胞失去了进一步分化的能力袁而导致其停滞在细胞分化过程中的某一阶段遥从深层次来看袁导致白血病的发病机制异常复杂袁就现阶段的研究结果来看袁导致白血病的因素主要包括遗传因素尧化学因素尧病毒1.2白血病的分类感染尧各种辐射以及药物作用等[4]遥就目前而言袁临床上根据发病程度将白血病分为慢性病及急性病2大类袁具体而言主要分为慢性淋巴细胞白血病尧慢性髓系白血病尧急性淋巴细胞白血病以及急性髓系白血病遥2构建小鼠白血病模型的临床意义近些年袁各种研究癌症的动物模型纷纷出现袁并且借助这些动物模型袁临床上针对癌症的研究也取得了较大的进步和发展遥具体而言袁构建这些癌症研究动物模型可以有效帮助人们认识这些癌症病症的病理学特征尧发病机制以及各种生化免疫方面的特点[5]遥而之所以在进行疾病研究时要采用小鼠为材料袁其原因在于鼠科动物繁殖起来相对方便袁且其造血系统以及遗传学特性均和人类较为相似遥体显著的抑制性作用遥目前临床上许多学者也针对该[1]究袁具有极为重要的临床意义[2-3]遥3建立白血病的细胞株其中慢性淋巴细胞白血病的细胞株院HS505.T遥慢性髓系白血病的细胞株院K562遥急性淋巴细胞白血病的M0院M091曰M1院KG1a曰M2院Kasuml1曰M3院NB4细胞株院MCLT-3及Jurkat遥急性髓系白血病的细胞株院M4院ML2曰M5院THP1以及HL60曰4建立白血病模型的小鼠类型以及MV-4-11曰M6院HEL曰M7院M07e遥临床上经常用于构建白血病模型的小鼠类型主要分为突变系以及近交系遥4.1突变系小鼠4.1.1肥胖糖尿病型重症联合免疫缺陷型小鼠NOD/SCID小鼠NOD/SCID小鼠渊TGB袁即指的是非和NK联合缺陷袁较易成功移植到不同的物种袁NOD/SCID小鼠是目前临川上最容易建立构建白血病模型的小鼠类型遥在对临床化疗方案设计的指导中袁NOD/SCID小鼠已经显示出了极为突出的临床疗效袁该小鼠类型已经逐渐成为目前临床上血液学实验研究的必要性工具[6]但是采用该类型小鼠进行白血病模型构建的时候也会遥存在一定的缺陷袁即该种类型的小鼠的价格通常较高袁因此在采用该种类型小鼠进行大型的试验的时候袁经常成本会比较高4.1.2SCID小鼠遥SCID小鼠袁即指严重B淋巴细胞及效小鼠类型T淋巴细胞联合免疫缺陷小鼠遥该类型小鼠淋巴结无明显皮质区袁是构建白血病模型的有袁无麸皮质区袁并有网状细胞占据遥小肠粘膜下和支气管淋巴集结较少见袁结构内无淋巴聚集[7]数SCID小鼠袁在青年期可出现一定程度的免疫功能恢遥特别值得注意的是袁少复袁此即为SCID小鼠的渗漏现象遥其渗漏现象不遗传袁但与小鼠的饲养环境尧品系以及年龄等有关遥SCID小鼠4.1.3极易感染BALB/c-nude袁在高度洁净的小鼠SPFBALB/c-nude环境下可存活小鼠1年以上袁即指裸遥小鼠袁这种类型的老鼠是1962在英国的非近亲繁殖的老鼠中发现的无毛老鼠遥该小鼠具有先天性T淋巴细胞以及胸腺功能缺失遥通过将裸基因导入其他小鼠品系NU冤袁从而获得BALB/c-nude类型的小鼠遥纯合裸鼠于正常小鼠无毛发和胸腺袁但粒细胞数量和活性却要低于正常小鼠遥成年裸鼠的NK细胞活性要显著高渊NU/遥目前袁裸鼠已成为白血病领域不可缺少的临床实验研究工具遥4.2近交系小鼠4.2.1脏尧肝脏等器官的重量及体积都要比普通小鼠大BALB/c小鼠BALB/c小鼠的毛色为白色袁袁其脾该类型小鼠的基BALB/c病发病率为小鼠雄鼠的白血病发病率为因型为院Aabbcc遥据既往临床研究发现12%遥基于该种类型的小鼠对射线均较为10%袁雌鼠的白血敏感袁因此其在白血病的临床试验中也具有较为广泛2019NO.15China&ForeignMedicalTreatment中外医疗的运用遥类型的小鼠在临床上经常被用来研究白血病的发病机4.2.2L615小鼠L615小鼠的基因型为aabbCC袁该种制以及其药物的疗效4.2.3遥对化学致癌因子的敏感性通常较低C57BL/6小鼠C57BL/6小鼠的毛色为黑色袁但是其对Graffi袁其白血病的致病因子则较为敏感aaBBCC遥袁该类型小鼠的基因型为院鼠进行全身处理之后既往临床实践证明采用射线对该种类型的小袁可以导致该种类型小鼠的淋巴瘤发生率达到90%以上遥该种类型的小鼠在白血病的研究中也经常会被使用到遥5白血病细胞小鼠白血病模型的构建方法5.1基因修饰小鼠肿瘤模型5.1.1入到小鼠受精卵基因转移小鼠袁可以采用不同的方法具体而言袁指的是将外源基因引,进而生产出携带外源基因的老鼠菌株,1976年,美国科学家Jaenisch和其他人等将莫氏白血病病毒基因插入小鼠基因组之中袁建立了有史以来临床上第一个白血病小鼠体系袁具有划时代的意义遥自此之后袁利用基因转移技术建立白血病细胞小鼠白血病模型的技术手段在临床上5.1.2时有用到[8-9]基因编辑技术基因敲除小鼠遥袁在小鼠的特定基因位点上插入或者敲该技术手段指的是在临床上使用出掉部分的基因片段袁从而使得小鼠患上白血病的技术手段遥该技术手段不仅在理论上具有可行性袁而且在既往的临床研究实践当中也经常会被用到[10]5.2自发及诱发小鼠肿瘤模型遥5.2.1生物因素引起的白血病模型诱发性小鼠模型在小鼠体内使用物理遥临床上经常使用的致癌尧化学和酌化学物质有射线袁既往临床实践证明3-甲基胆蒽袁经常使用的电离辐射类型为大程度上引起小鼠患上白血病袁使用该遥在临床研究中使用该2种方式可以在较诱导模型具有一定的优势袁但同时也不可避免的具有一定的劣势袁优势为操作起来相对简单袁但是其缺点主要有该模型的生物学特性通通常不够稳定袁并且所使用的诱导因子可能会对人体造成一定的伤害袁因此该种模型在现代临床上的使用率相对偏低5.2.2遥鼠的白血病一般自然发生自发性小鼠模型自发性小鼠模型中所使用的小袁其发病机制主要是由于其基因发生突变而导致袁该种类型的小鼠白血病模型的自发性肿瘤通常比实验方法诱导的肿瘤肿大遥该种模型中小鼠的肿瘤发生的条件更加自然袁通过仔细观察和统计分析袁重点观察遗传因素所导致的白血病机制袁通过该种模型往往可以发现以前未知的环境或其他致癌因素遥但是该种模型的使用过程中同样也存在着一些无法避免的缺陷袁即该种模型中小鼠的肿瘤发生通China&ForeignMedicalTreatment中外医疗197中外医疗2019NO.15China&ForeignMedicalTreatment常不均匀袁不可能实现在先对较短的时间内获得大量的试验材料袁导致其试验周期一般较长袁相应的其花费的实验成本也会相对较大遥5.3移植性小鼠肿瘤模型5.3.1后采用尾静脉注射的方式注射入小鼠提内异种移植采集处于对数生长期的肿瘤细胞袁从而构建袁然起白血病小鼠体系遥该种模型构建难度相对较小袁其肿瘤发生率也相对较高袁观察时间也会相对集中袁在临床上具有较为广泛的运用[11]5.3.2内袁通过连续传代的方式形成白血病小鼠体系同种移植可以将肿瘤细胞移植于同系的小鼠体遥遥该种方式构建白血病小鼠肿瘤模型的时间周期也先对较短袁而且具有较好的重复性袁在临床上具有较为广泛的运用袁并且和异种移植模型相比袁该模型不会产生排异反应而对试验结果造成干扰遥6白血病细胞小鼠模型的应用前景分析6.1利用此模型来对肿瘤细胞的生物学特性进行研究临床上袁利用白血病细胞小鼠白血病模型可以对白血病的患者的肿瘤细胞的分化尧增殖以及各种调控机制进行必要的研究袁进而使得人们对肿瘤细胞的恶性增殖机制有一个更为深入的了解袁深化人们对该病肿瘤细胞的生物学特性方面的认知遥同样在接下来的针对肿瘤细胞生活学特性的临床研究实践当中袁依然可以借助于白血病细胞小鼠模型遥6.2对白血病的干细胞特性进行研究白血病干细胞是一种极少量具有自我更新和增殖能力的白血病细胞袁有别于一般造血干细胞遥它也不同于其他的无性系白血病细胞遥既往临床上有学者利用白血病细胞小鼠白血病模型对白血病的干细胞特性进行有效的研究袁这也可以在一定程度上对该病的治疗起到必要的参考作用遥6.3对微小残留白血病诊断及治疗的研究既往临床研究证明袁微小残留是致使癌症病症复发的直接性原因之一袁而既往有学者研究证明借助于白血病细胞小鼠模型可以实现对微小残留白血病诊断及治疗遥我国学者史剑慧等[12]借助于白血病细胞小鼠模型袁研究了微小残留白血病在身体内的分布规律遥7讨论基于小鼠自我繁殖能力较强以及和人体结构的相似袁其在医疗科学的研究中具有极为广泛的运用袁同样198中外医疗China&ForeignMedicalTreatment其在白血病的临床研究中也具有相对广泛而深入的运用袁在该文中首先介绍了白血病细胞小鼠白血病模型的建立过程中需要重点注意的一些问题袁最后结合实际简单探讨了小鼠白血病模型的一些运用袁希望能够对相关人员的工作起到一定的参考性作用遥[参考文献][1]强琬婷细胞对骨髓基质细胞增殖及功能影响的研究,诸江.急性早幼粒细胞白血病小鼠模型中白血病[J].诊断学理论与实践,2016(1):25-29.[2]王艺潼的研究现状,徐雯[J]..急性早幼粒细胞白血病小鼠动物模型建立实用肿瘤学杂志,2017,31(5):454-457.[3]徐玉洁模型的建,贾文华立[J].,中国刘苍春实验血,等.人源化慢性髓系白血病小鼠液学杂志,2016,24(5):1329-[4]1333.王雪病小鼠模型的建立和鉴定,祁娜,马莎,等.费城染色体阳性急性淋巴细胞白血[J].中国实验血液学杂志,2016,[5]24(5):1324-1328.immuneShihYL,responsesWuLY,inLeeaWEHICH, et3 al.inducedSulforaphaneleukemiapromotesmodelmousenaturalthroughkillercellenhancedphagocytosisofmacrophagesand[6]Reports,HumanSongM2016,J,Qi13(5):4023.activitiesinvivo[J].MolecularMedicineL,ZhangXW,etal.DynamicTrackingInhalationMesenchymalInjuryStemCellsTropismfollowingSmokeInternational袁2016,2016(1):1-13.inNOD/SCIDMice:[J].StemCells[7]mesenchymalSecchieroP袁ZorzetmicestemcellsS袁TripododisplayC袁etanti-canceral.HumanactivityboneinmarrowSCIDxenografts.[J].bearingPlosdisseminatedOne,2016,5(6):e11140.non-Hodgkin'slymphoma[8]叶永斌的建立,[J].张明宛中国实验血液学杂志,邱大发,等.斑马鱼异种异体白血病模型,2017,25(1):35-41.[9]及意义王艳飞[J].,梅芬生命科学研究,沈涛,等.,Nestin2016,基因在髓系白血病的表达20(5):413-417.[10]庄琳征转白血病细胞株的建立,马燕,王倩,等.稳定表达[J].中国实验血液学杂志GFP的骨髓增生异常综合,2017,[11]25(5):1487-1492.杨焕芝对小鼠移植性肿瘤的抗肿瘤活性及其毒性研究,周轶平,翁稚颖,等.旱生香茶菜总二萜包合物[J].中国临床药理学杂志,2016,32(19):1785-1788.[12]史剑慧建立[J].,许小平复旦学报,程文英院医学版,等,.小鼠微小残留白血病模型的2002,29(5):383-386.渊收稿日期院2019-02-17冤
