ＪＩＡＮＧＸＩＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＴＲＡＤＩＴＩＯＮＡＬ ＣＨＩＮＥＳＥＭＥＤＩＣＩＮＥ 苍耳子药材薄层鉴别与含量测定 ★ 吴建伟 付小梅 ５１８１１０；２．江西中医学院谭道鹏 吴志瑰 裴建国 褚小兰 （１．广东省深圳市观澜人民医院 深 南昌３３０００６） 摘要：目的：建立苍耳子药材的薄层鉴别及其中绿原酸的含量测定方法。方法：运用薄层色谱鉴别、高效液相色谱法测定，色 谱柱为Ｚｏｒｂａｘ Ｃｌ８（２５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ，５ ｍ），流动相为乙腈－０．４％磷酸溶液（１０：９０），流速：１．０ ｍＥ／分钟，检测波长３２７ ｎｍ。 结果：绿原酸在０．１４２ １—３．５５２ ０ ｔＬｇ范围内线性关系良好，ｒ＝０．９９９ ９，平均回收率为９９．８６％，ＲＳＤ＝０．５％。结论：本法方 便，准确，可用于苍耳子药材的质量控制。 关键词：苍耳子；绿原酸；薄层鉴别；含量测定 中图分类号：Ｒ ２８４．１ 文献标识码：Ｂ 苍耳子为菊科植物苍耳Ｘａｎｔｈｉｕｍ ｓｉｂｉｒｉｃｕｍ Ｐａｔｒｉｎ ｅｘ Ｗｉｄｄｅｒ．带总苞的果实，作为常用中药材被 历版中国药典收载，用于治疗风寒头痛、鼻渊流涕、 风疹瘙痒、湿痹拘挛等……。绿原酸具有广泛的抗 菌消炎、利胆、止血及增高白血球数量的作用 ］】 ， 为苍耳子药材的有效成分之一。目前，苍耳子药材 ２００５年版一部附录ⅥＢ）试验，分别吸取上述三种溶 液各５ ｌ，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合 剂的硅胶Ｇ板上，以甲苯．乙酸乙酯一甲酸（５：４：１）为 展开剂，展开，取出，晾干，喷以１０％硫酸乙醇溶液， 在１０５ ｏＣ加热使斑点显色清晰，置紫外光灯（３６５ ｎｍ）下检视。供试品色谱中，在与对照药材及对照 品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的荧光斑点。 ２．２绿原酸的含量测定 质量控制仅限于显微及薄层鉴别，尚无含量测定的 报道。本实验采用新的展开系统可以更好地鉴别不 同来源苍耳子，并首次进行了苍耳子中有效成分之 一２．２．１ 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱采用 Ｚｏｒｂａｘ Ｃ】８（２５０ ｍｉｌｌ×４．６ ｍｍ，５ Ｉｘｍ），流动相为乙 绿原酸的含量测定研究，对苍耳子药材的质量控 制具有重要意义。 腈－０．４％磷酸溶液（１０：９０），流速：１．０ ｍＬ／分钟，检 测波长３２７ ｎｍ（参考文献 ）。进样量１０ Ｉｘｌ；柱温 １仪器与试药 高效液相色谱仪：Ａｇｉｌｅｎｔ１２００四元低压梯度泵 系列，Ａｇｉｌｅｎｔ化学工作站，二级管阵列检测器。 绿原酸对照品（批号：１ １０７３６—２００４２２，供含量测 为室温。理论塔板数按绿原酸峰计算，应不低于３ ０００，对照品与样品的色谱图见图１。 ２．２．２对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照 定用）及苍耳子对照药材（批号：１２１１６８－２００５０３）购 于中国药品生物制品检定所。 品适量，置棕色瓶中，加５０％甲醇制成每１ ｍＬ含７０ ｇ的溶液，即得。 ２．２．３ 供试品溶液的制备 取本品粉末０．５ ｇ，精 —乙腈为色谱纯，水为超纯水，其它试剂均为分析 纯。 密称定，置圆底烧瓶中，精密加入５０％甲醇２５ ｍＬ， 苍耳子药材由江西中医学院褚小兰教授鉴定。 ２方法与结果 称定重量，回流提取３Ｏ分钟，放冷，再称定重量，加 ５０％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即 得。 ２．１薄层鉴别取苍耳子粉末１ ｇ，加甲醇３０ ｍＬ， 加热回流３０分钟，滤过，滤液蒸干，加甲醇１ ｍＬ使 ２．２．４ 线性关系考察 精密称取绿原酸对照品 １７．７６ ｍｇ置２５ ｍＬ量瓶中，加５０％甲醇使溶解，并 稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密吸取上述 对照品溶液１．０、２．０、５．０、１０．０ ｍＬ，分别置２５ ｍＬ 溶解，作为供试品溶液。另取苍耳子对照药材，同法 制成对照药材溶液。取绿原酸对照品，加甲醇制成 每１ ｍＬ含ｌ ｍｇ的溶液。照薄层色谱法（中国药典 通讯作者：付小梅，Ｔｅｌ：（０７９１）７１１８９８３，Ｅ—ｍａｉｌ：ｓｍｉｌｅｆｘｍ＠１６３．ｃｏｎｒ ・６２・ 江西中医药２０１１年４月第４期总４２卷第３４０期 按２．２．３项下方法制备供试品溶液，进样分析，测定 Ａ 结果见表２。 表２苍耳子中绿原酸含量测定结果 Ｌ ｔ／ｒａｉｎ 图１苍耳子药材含量测定ＨＰＬＣ图 Ａ对照品Ｂ样品１绿原酸 量瓶中，加５０％甲醇稀释至刻度，摇匀，分别精密吸 ３讨论 取上述各溶液１０ ｌ注人液相色谱仪分析。以进样 ２００５年版药典（一部），苍耳子药材的ＴＬＣ鉴 量（ ｇ）为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线 别方法不能很好区别不同种来源苍耳子，且采用正 并进行回归分析，得回归方程：Ｙ＝３０２５．１Ｘ一 丁醇展开系统，展开时间过长，本实验所采用展开条 １２．３９１，ｒ＝０．９９９ ９。结果表明：绿原酸在０．１４２ １— 件可以弥补这些缺点。 ３．５５２ ０ Ｉ．Ｌｇ范围内，线性关系良好。 提取条件的确定。实验中比较了超声和回流两 ２．２．５精密度试验精密吸取绿原酸对照品溶液 种常用方便的提取方法，回流提取法明显好于超声 １０ Ｌ，重复进样测定６次，记录峰面积，ＲＳＤ＝ 法；对３０％、５０％甲醇、７０％甲醇、９５％甲醇作为提 ０．０７％，表明仪器精密度良好。 取溶剂进行考察，５０％甲醇优于其他提取溶剂；对 ２．２．６ 稳定性试验取供试品溶液，分别在０、２、 １０、２５、５０ ｍＬ三个提取溶剂体积进行考察，２５ ｍＬ ４、６、８、１０、１２、１４小时测定，记录峰面积，其ＲＳＤ＝ ５０％甲醇可以提取完全；比较了提取１５、３０、４５、６０ １．０６％，表明供试品溶液在ｌ４小时内，基本稳定。 分钟的差别，提取３０分钟即可将绿原酸提取完全。 ２．２．７重复性试验精密称取６份同一批药材（批 苍耳原植物在全国广为分布，苍耳子药材也多 号：２００５１０２６）粉末０．５ ｇ，同２．２．３项下方法制备供 为各地自产自销，但不同产地苍耳子有效成分的含 试品溶液，进样分析，计算绿原酸含量，其含量的 量差异也较大。本实验建立了苍耳子药材中绿原酸 ＲＳＤ＝１．４％。 的含量测定方法，可为苍耳子药材质量标准的提高 ２．２．８ 回收率试验取本品（批号：２００５１０２６，含量 提供参考。 据作者调查，目前苍耳子药材品种较为混乱，尤 ３．６１３ ５ ｍｒ／ｇ）约０．２５ ｇ，精密称定，各精密加入绿 其是蒙古苍耳子应用也较为广泛。对两种来源苍耳 原酸对照品溶液（０．０３６ ２２ ｍｇ／ｍＬ）２５ ｍＬ，同２．２．３ 子的含量测定结果显示，蒙古苍耳子中绿原酸的含 项下方法制备供试品溶液，进样分析，由测得量与加 量要普遍高于苍耳子，建议对其进行安全性评价以 人量计算回收率，结果见表１，表明方法回收率良 好。 明确是否可以替代苍耳子入药。 参考文献 表１ 绿原酸回收率试验结果 ／ｍｇ ［１］国家药典委员会．中国药典（一部）［ｓ］．北京：化学工业出版社， 取样量 （ｇ） 样品中堡原酸的量 绿原酸加入量 绿原酸测得量 回收率（２００５：１１１，１５２． ％） 平均回收率 ＲＳＤ （％） （％） ｏ．２５５５ ０．９２３２ ０．９０５５ １．８２６１ ９９．７１ ［２］吴卫华，康桢，欧阳冬生，等．绿原酸的药理学研究进展［Ｊ］．天 Ｏ．２４８３ ０．８９＂／２ ０．９０５５ １．８０１２ ９９．８３ 然产物研究与开发，２００６，１８：６９１—６９４． ｏ．２５３８ ０．９１７１ ０．９０５５ １．８２４９ １００．２５ ９９．８６ ０ ５ ０．２５２７ ０．９１３１ ０．９０５５ １．８２２４ １００．４２ （收稿日期：２Ｏｌ１－０２．１４责任编辑：曾文雪） Ｏ．２５４９ ０．９２ｌｌ ０．９０５５ １．８１８４ ９９ ０９ ２．２．９样品测定对采集或购买到的苍耳子药材 ・６３－
