送公司进行菌种鉴定的菌悬液的配置流程
1、菌种制备
从菌种保藏管中吸取少量菌液，转接到新鲜的TSB中，于30℃-35℃培养箱中培养18-24小时。
注意事项：也可使用TSA平板进行培养，如果转接的是冷冻保藏管中的菌，zui好再转接一次，使用第二次转接的菌种。
2、稀释
取步骤1的培养物1ml，加入到9ml的pH7.0氯化钠蛋白质缓冲液中，进行倍比稀释。
注意事项：取菌液的时候，需要先对菌液进行振荡或吹打混匀，方可吸取菌液。可以不用进行倍比稀释，只要能保证ZH加入到测试样品中的菌的数量符合要求即可。
3、平板计数
取稀释好的菌液，一般取3个稀释级，每个梯度取2ml，分别加入两块90cm的平皿中，每皿加入1ml菌液，倾注45℃左右的已经经过确定的TSA培养基，轻轻摇匀，静置，培养基凝固后，置30-35℃培养箱中倒置培养48小时。
注意事项：取菌液时同样需要先将试管中的菌液进行混匀。
4、菌落计数
将培养后的平板，置于菌落计数器下进行菌落计数，以确定哪个稀释级的浓度能够满足测试的要求。
注意事项：不建议逐日观察结果，因为平板中可能有凝集水，逐日观察拿动平板，可能会导致水落到菌落上，菌跟着水流到下一个空白地方，导致结果不准确；另外如果是霉菌，因为有孢子，拿动也会导致孢子落到平板空白地方，影响结果。
操作步骤总结
菌悬液的使用时效性要求导致样品测试需要做至少三个梯度
2020版 这里说的三个梯度不是说只是计数，而是菌悬液实际运用的测试中也需要三个梯度。 举个例子，某个无菌产品无菌检查中的阳性对照测试，需要做三个对照。当然，同样的产品方法适用性，培养基促生长测试也是如此。 笔者之前在实验室工作，有一次做了5次的菌悬液制备，为了保证实验的成功，每次都做三个梯度。虽然大多数都是同一个稀释级的含量符合要求，但偶尔还会有另一个稀释级才符合要求。还好笔者当时依据的法规中，日常的无菌检查和控制菌检查中还没有阳性对照的要求，不然步骤还会更加繁琐 因篇幅问题不能全部显示，请点此查看更多更全内容