QuEChERS结合液相色谱-串联质谱法快速测定鸡肉中喹诺酮类残留

QuEChERS结合液相色谱-串联质谱法快速测定鸡肉中喹诺酮类残留文 吕警 乌鲁木齐市农产品质量安全检测中心

摘要：采用QuEChERS方法提取和净化鸡肉样品，建立测定8种兽药残留的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）检测方法。样品经乙腈和缓冲盐包SBEQ-CA8802-B提取，提取液经净化管净化后取上清液，旋转蒸发仪减压蒸干，溶解过膜，在电喷雾离子源多反应监测（MRM）模式下进行测定，基质外标法定量。结果表明，8种喹诺酮类药物的线性范围为1～100μg/kg，线性相关系数r均大于0.996，定量检出限为0.05～0.10μg/kg，10 µg/kg添加范围的平均回收率为.7%～97.7%，相对标准偏差为3.87%～11.7%。该方法操作简单、净化效果好、灵敏度高，能够快速有效地检测鸡肉中的喹诺酮药物残留。关键词：鸡肉；喹诺酮残留；液相色谱-串联质谱法；外标法定量喹诺酮类药物又称吡喹酮酸类化合物，具有良好的抗菌性，适用于家畜养殖行业。调查发现，在日常使用中，一些家畜易出现多种类型的不良反应，最严重的是胃肠道疾病。目前，检测鸡肉中喹诺酮类药物最常见的方式是微生物法、酶联免疫法和放射免疫法，最具有普遍应用价值的是液相色谱法和液相色谱-质谱联用法。本文用QuEChERS结合液相色谱-串联质谱法对鸡肉中喹诺酮类残留的检测工作进行了详细探究，为相关行业人士提供参考。为甲醇。梯度洗脱程序见表1。1.3.2 质谱条件ESI离子源；正离子扫描；毛细管电压3.2kV；离子源温度110℃；去溶剂气温度400℃；去溶剂气流量（氮气）650L/h；气帘气流量50L/h；多重反应监测模式扫描（MRM）。2. 结果与分析2.1 质谱分析条件的优化参与本次检测活动的工作人员，前后开展了多次检测流程，期间完全按照行业操作标准实时处理，最终获取了8种喹诺酮类兽药的最优质谱条件。具体见表2。表1 梯度洗脱程序表序号1234567

时间/min0.02.03.04.05.05.17.0

0.1%甲酸水

959040309595

乙腈556060755

1. 材料与方法1.1 试剂与仪器Milli-Q 高纯水；氧氟沙星；洛美沙星等；液相色谱-质谱联用仪等。1.2 样品前处理上述提取液按先后顺序依次加入到净化管中，涡旋混合5min，5000-10000r/min离心5min。取出净化管中所有上清液，40℃减压蒸发至近干。加入1mL甲醇-水溶液（1∶1）溶解，涡旋混合1min，过0.22µm滤膜，供液相色谱-质谱联用仪测定。1.3 仪器条件1.3.1 液相色谱条件沃特世ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（2.1mm×50mm，1.7μm），进样量10μL，柱温35℃，流速为0.3mL/min，流动相A为0.1%甲酸水溶液，B12345678序号

表2 所有待测物质的质谱分析参数表化合物名称氧氟沙星洛美沙星诺氟沙星环丙沙星恩诺沙星培氟沙星沙拉沙星达氟沙星

保留时间/min2.983.022.983.003.042.993.113.45

离子对（m/z）362>261.1*,362>318.2352.1>237.05*,352.1>265.05319.>219.2,319.>233.25*331.94>231.1*,331.94>245.1359.9>245.1*,359.9>316334.1>233.15*,334.1>290.1386>299.1*,386>322.2358>96.16*,358>283.1

锥孔电压碰撞能量

/V/V

3040203838363636

24.2936.3026.3338.2424.2228.2334.2824.26

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表3 8种喹诺酮药物的表征参数表序号12345678

磺胺药物氧氟沙星洛美沙星诺氟沙星环丙沙星恩诺沙星培氟沙星沙拉沙星达氟沙星

线性范围/（μg/kg）1-1001-1001-1001-1001-1001-1001-1001-100

线性方程y=1.993 x+459.08y=635.212 x-286.16y=216.708 x+77.2y=116.221 x-75.00y=1524.62 x+755.62y=209.539 x +85.53y=339.168 x+76.30y=245.778 x-60.18

相关系数0.999 5 0.999 70.998 80.999 50.998 90.999 40.996 90.999 1

检出限/（μg/kg）

5.05.05.05.05.05.05.05.0

2.2 基质效应鸡肉的基质物质较复杂，对其进行质谱研究时，浸提物分组对电喷雾离子化效果和检测信号有增强作用。相关工作人员在确定检测样品时，主要借助阴性部分，结合基质溶液配制标准，妥善做好标准溶液制定工作，减少或消除基质反应。2.3 线性范围与检出限由表3可知，在1-100μg/kg浓度范围内，8种喹诺酮药物呈良好的线性关系，相关系数r均大于0.996。以定量离子3倍的信噪比响应值对应的浓度为检出限，10倍的信噪比响应值对应的浓度为定量限。2.4 回收率与精密度取鸡肉空白基质配制的10µg/kg的混合标准溶液，重复进样6次，计算回收率和标准相对偏差，结果见表4。8种喹诺酮药物的回收率为.7%-97.7%，相对标准偏差为3.87%-11.70%。表4 8种喹诺酮的加标回收率表序号12345678

化合物名称氧氟沙星洛美沙星诺氟沙星环丙沙星恩诺沙星培氟沙星沙拉沙星达氟沙星

基质加标平均测定值

9.728.979.779.659.239.009.449.04

平均回收率（/%）RSD/（%）

97.2.797.796.592.390.094.490.4

3.877.8711.7011.607.938.4411.508.79

结论本文将QuEChERS方法与液相色谱-串联质谱联用法相结合，测定鸡肉中8种喹诺酮药物残留。与其他方法相比，该方法大大缩短了前处理周期，节约了检测成本，而且这种方法操作简便、快速、准确，可有效消除基质中蛋白质的干扰，提高了喹诺酮药物测定的灵敏度、分析效率和确证能力等，不仅为喹诺酮类药物的测定提供了技术支持，也适用于日常样品的检测分析。作者简介：吕警（1984-），男，重庆人，硕士，高级农艺师。研究方向：农产品质量安全。I FOOD INDUSTRY I 109

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