浙江中医杂志２０１０年７月第４５卷第７期 【中药研究】 斑蝥素ＰＬＧＡ缓释微球的制备及其缓释作用的研究 陈 斌 浙江省宁海县中医医院 浙江宁海３１５６００ 关键词 斑蝥素 聚乳酸羟基乙酸共聚物微球乳化溶剂挥发法动态膜透析法 芫菁科昆虫南方大斑蝥（Ｍｙｌａｂｒｉｓ ｐｈａｌｅｒａｔａ Ｐａｌ— ｌａｓ）或黄黑小斑蝥（Ｍｙｌａｂｒｉｓ ｃｉｃｈｏｒｉｉ Ｌｉｎｎａｅｕｓ）的干燥 １０ｍｇ和ＰＬＧＡ ９０ｍｇ，溶于０．８ｍｌ二氯甲烷中，将油相 恒速滴加至３５ｍｌ，浓度为１ 的ＰＶＡ溶液中，１０００ｒ／ ｍｉｎ搅拌１００ｓ，形成ｏ／ｗ乳剂，室温搅拌（３００ｒ／ｍｉｎ） ３ｈ，挥发有机溶剂制得斑蝥素ＰＬＧＡ微球。将制得的 全虫是一味传统中药，性寒，微辛，有大毒，具有攻毒、 破血、引赤、发泡之效，收载于２００５年版《中国药典（一 部）》Ｌ１］。斑蝥素是斑蝥药材中的一种单萜烯类提取 物，为无色鳞状结晶，不溶于冷水，微溶于热水，易溶于 微球混悬液离心（４０００ｒ／ｍｉｎ）２０ｍｉｎ，弃去上清液，用蒸 馏水洗涤３次，室温干燥即得斑蝥素ＰＬＧＡ微球［２］。 ２．２ 包封率和载药量的测定：取干燥微球适量，加氯 仿１０ｍｌ，超声使微球充分溶解，离心（１００００ｒ／ｍｉｎ） １０ｍｉｎ，取上清液ｌｍｌ置于１Ｏｍｌ容量瓶中，加氯仿定容至 刻度，于２２３ｎｍ波长处测定吸光度，按下式计算载药量和 包封率。载药量一（微球中药物含量／微球质量）×１００ 。 包封率一（微球中药物含量／理论投药量）×１００％。 ２．３微球外观形态的观察：取微球适量加水复溶，在 显微镜下观察微球形态并拍照。 ２．４微球粒径与粒径分布：取微球冻干粉适量，加水 丙酮、氯仿及乙醚，具有明显的抗癌活性。斑蝥素口服 生物利用率低，对胃肠道粘膜有很强的刺激性，且使用 过量可致人死亡，临床上使用较多。聚乳酸羟基 乙酸共聚物（ＰＬＧＡ）是一种具有良好生物相容性与生 物降解性的合成聚合物，目前已通过美国ＦＤＡ的认 证，可以用于人体的疾病治疗及诊断。ＰＬＧＡ的体内 生物降解速度由两种单体的比例及其聚合物的分子量 所决定。 微球是指粒径在１～５００￣ｍ范围内的圆形或类圆 形载药颗粒。根据其粒径及给药方式等的不同，微球 可在体内达到缓释或靶向传递等多种目的。根据ＰＬ— 复溶，用粒度分布仪测定粒径及粒径分布。 ２．５ 体外释放试验：参考动态膜透析法进行微球体外 释药试验。精密称取载药微球适量，加ｐＨ７．４磷酸盐 ＧＡ的生物降解性质，将ＰＬＧＡ制成微球后，可达到体 内一次给药，长期起效，减少血药浓度波动，降低药物 的毒副作用，提高生物利用度等目的。且生物可降解 缓冲液（含０．５ ｓＤｓ和０．０４ ９／６ＮａＮ３）１００ｍｌ混悬，置 预处理过的透析袋中，扎紧袋口，放人４８ｍｌ上述释放 介质中，将试样置恒温振荡器，温度在（３７±１）℃，转速 微球，给药后不用手术取出，从而提高患者的依从性。 本研究拟将毒性较大的斑蝥素包裹在ＰＬＧＡ微球 为１００ｒ／ｒａｉｎ，定时吸取透析液５ｍｌ，并及时补充等量新 鲜释放介质，过滤，稀释后测定药物浓度，按下式计算 累积释放百分率Ｑ。用等质量的斑蝥素原料药做对照。 厂、一一内，通过皮下注射给药，使其具有长期的药效，并达到 减少给药剂量及减低毒副作用等目的。 １仪器与材料 Ｇ×Ｖ＋（Ｇ一 × 一＋ 一２× 一ｚ＋……＋Ｃｌ× ） 一 一 ’。 １．１仪器：ＪＢ４０一Ｃ电动搅拌机（上海标本模型厂）； Ｌ５１０５４６电磁搅拌仪（ＥＨＳＹ ＬＡＢ）；恒温水浴振荡器 （金坛市国旺实验仪器厂）；５４１８小型高速离心机（Ｅｐ— ｐｅｎｄｏｒｆ Ｃｈｉｎａ Ｌｔｄ）；ＵＶ一２１０２ＰＣＳ紫外分光光度计 ×１００ 式中： 为第ｉ次取样时的浓度， 为释放介质体积。 Ｃ 为第一次取样时的浓度，Ｖ 为第一次取样的体积， ＣＨ、 依次类推，Ｗ为透析袋内斑蝥素的量。 ３ 实验结果 （上海尤尼柯仪器有限公司）。 １．２药品与试剂：斑蝥素（南京泽朗医药科技有限公 司）；ＰＬＧＡ（ＬＡ／ＧＡ一７５／２５，Ｍｗ：３００００，成都有机化 ３．１微球理化性质：干燥微球外观为白色粉末，再分 散性良好，无粘连现象。显微镜观察结果表明，干燥后 微球均为圆球形（详见图Ｉ），粒径分布均匀（详见图 ２）。平均粒径为３Ｏ±５．１７“ｍ，平均包封率为（７４．５４± 学研究所）；聚乙烯醇（ＰＶＡ，醇解度８５ ～９Ｏ ，Ｓｉｇ— ｍａ公司）；其他试剂均为市售分析纯。 ２ 实验方法 ２．１ 斑蝥素ＰＬＧＡ微球的制备：精密称取斑蝥素 ０．４５） ，平均载药量为（９．４７±０．６８）％。 浙江中医杂志２０１０年７月第４５卷第７期 巧用葫芦巴丸治阴挺 陈 珑 浙江省瑞安市玉海街道卫生院 浙江瑞安３２５２００ 关键词 葫芦巴丸 阴挺 医话 阴挺又称阴脱、产肠不收，是指子宫从正常位置沿 图１ 斑蝥素ＰＬＧＡ微球的显微镜照片（×２００） 阴道下降，宫颈外口达坐骨棘水平以下，甚至子宫全部 脱出于阴道口以外，常合并阴道前后壁膨出。临床常 见气虚型、肾虚型。气虚型多见子宫下移或脱出于阴 体 积 （％） 道口外，劳累后则加剧，小腹下坠，四肢无力，少气懒 言，面色少华，带下量多，质稀色白。舌淡、苔薄，脉细。 其病机系气虚下陷，摄纳无力。肾虚型表现为子宫下 脱，头晕耳鸣，腰酸腿软，小腹下坠，小便频数，夜间尤 甚。舌淡红，脉沉弱。究其病机乃为冲任不固，带脉弛 图２斑蝥素ＰＬＧＡ微球的粒径分布图 纵，无力系脱。 ３．２斑蝥素ＰＬＧＡ微球的体外释放曲线：详见图３。 笔者曾治一阴挺患者，予以补中益气汤等方剂加 减治疗１个月，未见寸功。后在家父“治阴挺与治寒症 原理有相同之处，需鼓动阳气，调整机体气机升降为 宜”的提示下，遵照“寒者温之，虚者补之，陷者举之”之 辇 时间（ｈ） 图３斑蝥素ＰＬＧＡ微球的体外释放曲线 法，应用葫芦巴丸加减治疗多例阴挺患者，取得满意 疗效。 葫芦巴丸出自《太平惠民和剂局方》，原为治寒症 而设。笔者试将其改丸为汤剂。药物组成：葫芦巴、紫 石英、巴戟天各１２ｇ，吴茱萸、小茴香各３ｇ，枳实９ｇ；当 归１０ｇ，川Ｉ芎、炙甘草各６ｇ。加减：偏气虚者加别直参 ９ｇ，生黄芪２０ｇ；腰酸者加炒杜仲２０ｇ，川续断１０ｇ；兼有 黄色带下加黄柏１０ｇ；大便于结加甜苁蓉２０ｇ。每日１ 剂，水煎２次，每次取药汁１２０ｍｌ，合并药汁后内服。若 湿热内盛者当先清除湿热，尔后才可用本方治疗。同 时嘱患者避免重体力劳动，保持大便通畅，睡眠时采用 脚略高体位，睡前及晨起做提肛运动多次。 从上述结果可见，斑蝥素混悬液在２４ｈ内释放完 全。而将斑蝥素包裹在ＰＬＧＡ微球里，药物的释放时 间可延长至２个月，且释放曲线平缓。 ４ 结论 本实验制得的斑蝥素ＰＬＧＡ微球具有较高的包封 率和载药量，粒径为３０ ｍ左右，适宜于皮下注射给药。 显微镜下照片显示微球形态圆整，无粘连。体外释放 试验表明，药物在２个月左右释放完全，可以达到了缓 方中葫芦巴温肾逐寒、鼓动阳气；巴戟天补肾阳、 强筋骨；吴茱萸、小茴香温中散寒；枳实理气行滞，现代 药理研究，枳实可兴奋子宫活动，增强其肌张力；紫石 释长效设计的要求。 ５参考文献 ［１］国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）ＥＭ］．北京：化 学工业出版社，２００５：２３３． 英甘温暖宫；当归、川芎活血化瘀；炙甘草调和诸药。 且兼便秘者用甜苁蓉润肠补肾；偏气虚者加别直参、生 黄芪益气升陷；腰酸者用炒杜仲、川续断补肾壮腰；黄 色带下者用黄柏清热燥湿。全方配伍，虽系温通，但不 Ｅ２３朱家蕙，沈正荣，王芳，等．含睾丸酮的乳酸一乙醇酸共聚物 微球的制备及体外药物释放ＥＪ］．中国药学杂志，１９９７，ｌＯ（３２）： ５９５—５９８． 甚燥烈，以取补其中而升其阳，举其陷而固其脱之效， 切中病机，使阴挺痼疾得以痊愈。 收稿日期 ２Ｏ１０—０４—２２ 收稿日期 ２Ｏ１０—０３—２４
