植物提取物中总糖测定方法
1. 仪器:UV-Agilent8453紫外-可见分光光度计
2. 试剂:5%苯酚水溶液 浓硫酸
二、测定步骤
1.对照品溶液制备:精密称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖约50mg,置50ml容量瓶中,加水溶解定容,
2.标准曲线制备:分别精密量取对照品溶液0、0.5、1、2、5、10ml于50ml容量瓶中加水定容至刻度,各取2ml上述溶液于25ml,具塞试管中,分别加入5%苯酚溶液1.0ml摇匀,加入浓硫酸10ml摇匀。于沸水浴中煮沸3-5min,取出后放置至室温,在485nm和以试剂空白作参比测吸收度。以吸收度为纵坐标,浓度C(mg/ml)为横坐标,绘声绘制标准曲线,求回归方程,
3.样品溶液制备:精密称取待测样品约150mg置50ml容量瓶中,加入80~90℃热水适量超声溶解后,放冷定容。取上述溶液2mL稀释至50ml即为供试品溶液。再取供试品液2ml于25ml具塞试管中,加入5%苯酚溶液1.0ml摇匀,加入浓硫酸10ml摇匀。于沸水浴中煮沸3-5min,取出后放至室温,即为待测样品溶液。
三、样品测定
打开仪器电源,预热20min,待仪器自检通过后,在485nm处以试剂空白作能比测
待测样品溶液吸收度,求得样品溶度。
四、结果计算
50×25×Ci
总糖含量(%)=–––––– ×100
Wi
Ci:由标准曲线求得样品浓度(mg/ml)
Wi:样品称取量(Mg)
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