AM-AM-FS-Ac-19016 糖及糖浆中的果糖

AMAMFSAc19016  糖  糖浆  果糖  旋光测定法

AM-AM-FS-Ac-19016

糖及糖浆中的果糖

1.试剂

    标准溶液——将250g无水K₂CO₃溶解于大约700ml的热水中，加1O0g粉状KHCO₃，搅拌至完全溶解。冷却后在剧烈搅拌下加入含25.3g CuSO₄·5H₂O的溶液100-15Oml，稀释至1L后过滤。

2.试验过程

    移取5Oml标准溶液到125ml锥形瓶中，滴加含≤92mg果糖的样品溶液或与此相当的果糖-葡萄糖混合物溶液(葡萄糖的还原能力大约为果糖的1/2)。加水至70ml，置于55℃水浴中，温度最好能控制在±0.l℃。还原反应时间准确控制在75min，每10或l5min摇动一次。

    将Cu₂O沉淀过滤到古氏漏斗中压紧石棉层上，充分洗涤锥形瓶及沉淀，但不必定量转移。由于通常很难把锥形瓶中的沉淀定量地转移出，所以可选择把所有的铜全部溶解在HNO₃中，然后再用电解或者Na₂S₂0₃滴定的方法测定。

    若样品中除了果糖外还含有葡萄糖，则按上述方法得到的结果并非是果糖量的真实值，而是表观值，因为葡萄糖在分析条件下有不可忽略的还原作用。为了校正葡萄糖的作用，也可分析总还原糖的量，然后用一系列近似法计算葡萄糖和果糖各自的真实含量。先计算出原样品还原糖的百分含量及果糖百分含量的表观值，这两个数的差即为葡萄糖的表观百分含量。葡萄糖含量的表观值除以12.4，从果糖含量的表观值中减去该值便得到果糖含量真实值的近似值。从总还原糖的含量中减去该近似值便可得到更接近葡萄糖真实量的校正值。此值再除以12.4，并从原来果糖含量的表观值中减去。按上述逼近法连续计算，直到果糖百分含量的相邻两次近似值基本保持不变为止。

    如果原样品中含有蔗糖，则按19-9【(a)直接读数——按19-8B(a)制备样品。移取50ml无Pb滤液到100ml容量瓶，加2.315g NaCl和25ml水。在20℃下用水稀释到刻度，并在同一温度下用200mm管测旋光值，读数乘以2便可以得到直接读数。(b)转化后读数——移取50ml无Pb滤液到100ml容量瓶，加20ml水。一边摇动一边一点一点地加10ml HCl(在20/4℃下比重为1.102g，或在20℃下白利糖度为24.85°)。将容量瓶放在60℃水浴中，不断摇动约3min，再在水浴中放置7min。将容量瓶立即放入20℃水浴中。当溶液冷却至约35℃时用水稀释到近刻度。让容量瓶在20℃水浴中放置至少30min，然后再稀释至刻度。混匀后用200mm管测旋光度，测定管带侧管及水套以保持温度在20℃。此读数必须乘以2才可得到转化读数。若有必要在非20℃下测定，可在比较窄的温度范围内变化测定温度，但最后定容以及直接和转化后旋光度的测定都必须在完全相同的温度下进行。

按下式计算蔗糖百分含量S：

式中P=标准溶液的直接读数;I=标准溶液的转化读数;t=读数时溶液的温度;m=100ml转化溶液中原样品固体总重量的克数。对液体样品，可先求出原始样品固体的百分含量，然后再乘以100ml转化后溶液中所含原液体样品的总重量获得。(c)室温下的转化——转化也可以按下述方法完成：(1)移取50ml无Pb滤液到100ml容量瓶，加20ml水及10ml HCl (在20/4℃下比重为1.102g或在20℃下自利糖度为24.85°)在≥22℃下放置24h；或(2)在>28℃下放置10h。在20℃下稀释至100ml，按(b)测旋光度。在这些条件下计算式转变为：

】

用Clerget方法测定。在查表之前校正蔗糖还原作用的影响。在分析条件下每1，2，3，4和5g蔗糖分别沉淀3.3，5.7，7.4，8.5和9.Omg的铜。

3.来源

AOAC官方方法932.15（第17版）